【方案】机能学实验设计格式和范例

【 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 】机能学实验 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 格式 pdf格式笔记格式下载页码格式下载公文格式下载简报格式下载 和范例 机能学实验设计大纲 实验名称,外源性PS和内源性PS在肺水肿疗效 中的比较 课题来源,自选 设计班级,2006级临床医学本科1班 设计人员,林静 设计日期,2006年10月8日 指导老师,张晓 成都医学院实验技术教研室 2009年制 一、实验设计的目的意义,实验设计的目的意义,国内外研究现状,存在 的问题,解决问题的思路。 目的与意义:复制肺水肿模型,利用直接使用外源性表面活性物质和 药物促进内源性表面活性物质释放的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ,比较研究外源性PS和内源性 PS在肺水肿中的治疗作用。本实验的目的即在于探讨外源性PS能否在肺 水肿的防治中作为一种较为理想的内源性PS不足的替代药物,为临床上 治疗肺水肿的联合用药提供一种新思路,具有十分重要的意义。 国内外研究现状,任何原因引起肺泡表面活性物质,PS)减少或灭活, 均可使肺泡表面张力增加,肺泡过度缩小甚至萎陷,间质负压加大,继而 诱发或加重间质及肺泡水肿,临床体外循环后发现,肺含水量的明显增加 [1]与内源性PS活性降低有显著的相关性。肺泡表面活性物质,PS)具有 降低肺泡表面张力,维持肺泡稳定性,防止肺胞萎缩,调节肺顺应性,阻 止肺毛细血管内液体渗入肺间质和肺泡内,促进肺水的清除等重要生理功 [2]能。据相关文献报道,外源性PS能够在一定程度上抑制肺水肿的发生。 张更荣等观察了气管内滴注外源性PS治疗家兔急性肺水肿的疗效,发现伤 [3]肺肺含水量明显减少、存活时间显著延长。同样应用外源性PS治疗大 鼠肺水肿、肺出血实验中也发现肺泡内蛋白质渗出显著减少,肺体指数降 [45]低,肺含水量显著降低,肺水肿程度减轻.。诸多资料显示,外源性 PS疗法可能成为有效治疗肺水肿的综合措施之一。外源性PS治疗可减轻肺 水肿程度,抑制肺水肿形成。 目前,内源性PS的产生机制国内已经研究的很透彻了,PS与肺泡II型 上皮细胞共同构成了PS系统,该系统异常与肺部损伤密不可分,它既是肺 损伤的结果,同时也是肺损伤过程中的重要内在因素。肺泡II型上皮细胞 是合成表面活性物质的主要场所,细支气管非纤毛上皮细胞,Clara细胞) 也能分泌少量的PS物质。PS在细胞内质网中合成,通过某种机制转运到高 尔基复合体和多囊泡体,然后转运到板层体储存,板层体通过胞吐作用分 [6]泌入肺泡腔。肺水肿可导致表面活性物质减少、功能缺陷。那么,就 目前,一部分药物具有直接恢复肺泡II型上皮细胞的生理功能,使其分泌 肺泡表面活性物质增多,以达到辅助治疗肺水肿的作用,如,肾上腺糖皮 质激素,内皮素-1,盐酸氨溴索等,而其中盐酸氨溴索具有可促进肺表面 活性物质的分泌的作用,而对肺水肿没有其他干扰的治疗作用。 结合本实验的目的,即探讨外源性PS能否在肺水肿的防治中作为一 种较为理想的内源性PS不足的替代药物。利用直接使用外源性表面活性 物质和药物促进内源性表面活性物质释放的方法,看那种更具有临床使用 价值。 存在的问题,目前市场上已有外源性的PS使用,主要用于新生儿呼 吸窘迫综合征的治疗。外源性PS目前只局限在实验室证明有治疗肺水肿 的作用,还未查见广泛用于临床。 解决问题的思路,用快速滴注生理盐水制作动物试验性肺水肿模型。 对肺水肿动物分别行外源性PS灌入气管治疗和促内源性表面活性物质释 放药,灌入气管治疗,并作实验对照和空白对照。 参考文献, [1] 邢泉生,张善通,陈张根,等.体外循环影响内源性表面活性物质的 机制.上海医科大学学报,1999,26(1), 1—3. [2] 徐建洪周继红杨军民.表面活性物质在创伤性肺水肿的作用.中华现 代临床医学杂志2004年5月第2卷第5B期 [3] 张更荣王雁曹勇.肺表面活性物质防治急性肺水肿作用的实验.江 西医学院学报1996; 36(1), 17-20 [4] 金IIb立,徐锦,孙家娥,等.应用不同配方磷脂预防大鼠肺出血和 肺水肿的研究.中华儿科杂志,1997,35(2), 71—73. [5] 郑珊,张文颖,孙波,等.一氧化氮治疗小肠缺血再灌注所致肺损伤 的实验研究.中华小儿外科杂志,2001,22(3), 177—179. [6] N itta K, Kobay,~hi T. III aim lt of sttrfactant activity and ventilationby protein in lung edemafluid. RespirPhysiol, 1994, 95(1), 43—51. [7] 丁延楷,唐亦奇.肺血管外肺水量的重量分析法及其应用.中国病理 生理学杂志,1987,4, 254-255. 二、实验设计方案,实验设计目标,拟解决的主要问题,实验动物设计, 实验专业设计,实验统计设计,实验方法设计,可行性分析,预期结果,实 验设计工作时间安排,。 (一)实验设计目标,拟解决的关键问题 设计目标,探讨外源性肺表面活性物质和内源性肺表面活性物质对 实验性肺水肿治疗作用上所存在的区别,从而探讨外源性PS能否在肺 水肿的防治中作为一种较为理想的内源性PS不足的替代药物。 拟解决的关键问题,实验模型的制备。对试验性肺水肿的模型进行分 组与实验结果分析。 (二,实验设计 1、实验动物设计 我们选用家兔作为实验动物,有以下几点理由, 1) 、家兔易得到,容易饲养,在科研工作中被广泛利用。 2) 、家兔肺相对较大,易于得到样品,能在称重过程中减少实验误差。 2、实验专业设计 选用家兔作为实验动物,给予外源性肺表面活性物质和内源性肺表面 活性物质,观察对实验性肺水肿治疗作用,观察兔子死亡时间,min), 肺系数,g/kg),肺湿/干重比,g/g),血管外肺水,g)等实验指标。 3、实验统计设计 实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。 (1) 随机,选正常成年健康重相近的家兔80只,将80只家兔按体 重由小变大编号后,从随机数字表中查取随机数字,依次抄录于家兔编号 下。具体方法,动物编号为1—80号,随机数字从11行第一个数字开始 接着抄写80个,按照能被4除的规律,不余到A组,余1到B1组,余2 到B2组,余3到B3组,每组20只。 (2) 对照,本组实验做了空白对照和实验对照,在前面的专业设计 里已经提及。 (3) 重复,本实验采用的是每实验小组有20只家兔,具有一定的重 复性。 (4) 统计数据收集,本实验搜集计量资料,初步确定对各组实验数 据的比较分为实验值和基础值比较。 表1 实验数据收集记录表 肺系数,g/ 肺湿/干重比 血管外肺水 兔子死亡时间 编 kg) ( g/ g) ( g) ( min) 号 A B1 B2 B3 A B1 B2 B3 A B1 B2 B3 A B1 B2 B3 表2四组动物体重及模型形成时间比较G?s) 组别 模型形成时间,min) 兔子死亡时间 ( min) A (n = 20) B1 (n = 20) B2 (n = 20) B3 (n = 20) 注,基础值比较 3 四组动物肺组织含水量测定比较G?s) 表 组别 肺系数,g / 肺湿/干重比,g 血管外肺水 kg) / g) ( g) A (n = 20) B1 (n = 20) B2 (n = 20) B3 (n = 20) 注,实验值比较 (5)统计数据分析 本实验采用计量资料来测定各种指标的数值,所有数据均采用平均数 土 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 差G?s)表示,四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析, 组间两两比较行q检验,B1、B2、B3组模型形成时间行两样本比较t检 验,均以0.05作为显著性检验水准。实验数据记录如表3。 四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析,如各组肺系数总体 均值的比较,其方法如下, (1)建立检验假设 H0, +1 = +2 = +3 (各组肺系数总体均值相等,。 (2)计算统计量 利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOVA。 (3 )查F值表,确定P值,得出结论。 B1、B2、B3组模型形成时间行两样本比较t检验,如B1与B2组之 间模型形成时间的比较,其方法如下, (1) 建立检验假设 H0, +i = +2 (两组肺模型形成时间总体均值相等,。 H1 , +i、 +2不等或不全相等，a =0.05。 (2) 计算统计量 X=(X1+X2+X3+ ... +Xn)/n M=E (Xi-X)2/(n-1) t= (x-u) /Sx (3 )查t值表,确定P值,得出结论。 4、实验方法设计 实验技术路线 家兔 实验技术方法 (1) 随机抽样,随机80只正常的家兔,并分别编号,再随机平分成 四组,并称重,实验室共8组同学,1、2组做A组实验,3、4组做B1组 8组做B3组实验。 实验,5、6组做B2组实验,7、 (2) 实验分组, (3) 实验手术,AB组同时取兔,称重,婴儿秤,后固定于兔台上, 剪去颈部长毛,换药碗装水,。用1%普鲁卡因局麻,大约三公分长,不同 点局麻),切开颈部皮肤,*轻点, 不要损伤气管和血管,,呈钝形分离出气管,分离干净),做倒T形切口, 插入气管插管并结扎固定,分离颈外静脉,静脉插管。 (4) 模型复制,B组制造家兔试验性肺水肿模型,从颈外静脉输入 37?C生理盐水,输入量按150ml/kg,输入速度按200滴/min计算,待输 液量为总量的2/3时,兔子该输的总量),向管内加入肾上腺素0.5g。输 液过程中密切观察家兔的呼吸是否急促和困难,气管插管管口是否有粉红 色泡沫样液体溢出。 (5) 处理措施, 1)外源性肺表面活性物质,PS)的提取, 取肉联厂新鲜猪肺,洗净肺表面血液,用生理盐水自气管灌入肺内, 直到完全膨胀,轻轻拍打后自气管内自然流出灌洗液,若灌洗液呈红色弃 掉。每只肺反复灌洗8次,灌洗液回收率85 %,共6批,每批6个,共36个 猪肺。灌洗液合并后在4C、 1 000 Xg离心10min,去除细胞和组织碎片等沉淀物,取上清液在4C, 10000Xg离心40min,得白色沉淀即为Ps粗品,将收集的PS粗品用生理 盐水溶解后在4C , 20000 g • 0. 68、0. 25mol/l鹿糖梯度离心30min, 取两蔗糖之间的沉淀物,用蒸馏水溶解后同法离心1次,所得沉淀根据F。 Ich方法,用生理盐水溶解后加2倍体积的氯仿一甲醇(2/1,V/V)旋涡混 匀2min,置4C冰箱过夜。然后用700 Xg,4C离心1 Omin取下相液, N吹干,再加冷丙酮于4C，2000 X g离心10min沉淀,获乳白色物 质即为PS纯品。所有操作均在常温下进行,所得PS在4 C冰箱保存, Ps加入含0. 05mmol CaCU的0.1mol生理盐水超声乳化后制成混悬渡, 浓度为50g / L。 2)滴注药品, 当家兔出现肺水肿时,有粉红色泡沫样液体时,,B1组为外源性PS 治疗组,迅速实行气管内注入37CPS100mg/kg药物解救,B2组为内源 性PS治疗组,同时迅速实行气管内注入37C15mg/kg盐酸氨溴索葡萄糖 注射液,B3组为治疗对照组,同时迅速实行气管内注入同等体积的生理 盐水,NS) 2.0ml / kg。A组为假手术组,在模型复制及治疗相应时间注 入同等体积NS作为PS疗效的对照。 (6) 取材,等家兔自然死亡,并记录其死亡的时间。解剖家兔胸腔, 支气管分叉处用线结扎,防止水肿液溢出。结扎处上方切断气管,将肺清 理出,把心脏等清除,,切勿挤压。 [7](7) 肺组织含水量测定,采用重量分析法 肺系数,准确称肺重量,并计算肺系数,肺系数=肺重量,g) /体重 ( kg) 肺湿干重比,取左上肺叶称湿重,然后放入烤箱(80 C,48 h)中烘烤 至恒重, 再秤干重,计算肺W/D以评估肺组织的水肿程度 血管外肺水,取下右下肺并剪成两半(用2把止血钳夹住切口,避免肺 内液体 流出,,各称湿质量;一半肺即刻剪碎,按1 ml/ 100 mg组织加入生理盐水 匀浆,分别测血液和匀浆中Hb的含量,剩余组织匀浆迅速置于-70 C保存 备用,另一半肺置于80 C烘箱内干燥72 h至恒质量,称肺干质量;计算公 式为,总肺水量指数,TLW)=(肺湿质量-肺干质量,/肺湿质量,每克湿 肺含残血量=(匀浆液Hb/血液Hb) X匀浆总样本量X 1.055/匀浆肺质 量,湿肺含残血量=肺湿质量X每克湿肺含残血量，EVLWI =(肺湿质量- 肺干质量-湿肺含残血量,/肺湿质量。 (三,可行性分析, 1、家兔易得到,容易侍养,在科研工作中被广泛利用。 2、ps提取方法已具备,我们事先自己提取,盐酸氨溴索葡萄糖注射 液市场有买,价格不高。 3、手术器材和设备均为实验室常用,手术方法我们也相对熟练。 (四,预期效果, 1、外源性PS能够在肺水肿的防治更具优势,作为一种较为理想的内 源性PS不足的替代药物。 2、为临床上进一步研制有关外源性表面活性物质的药物提供可靠依 据。 3、外源性ps可以考虑作为临床上一种联合用药治疗肺水肿。 (五,实验设计工作时间安排, 1、共计1D完成药物提取 2、共计0.5D完成实验动物模型制备和取材 3、共计0.5D完成材料重量分析 三、完成实验的条件 1、仪器设备情况,本实验采用机能实验室常用设备,具体如下,兔 台、静脉输液装置、滤纸、婴儿磅秤、Y字型气管插管、手术器械、注射 器。 2、实验动物情况:健康的家兔80只。 3、药品试剂来源,本实验采用盐酸氨溴索葡萄糖注射液、生理盐水、 戊巴比 妥钠、外源性肺表面活性物质,PS)、蔗糖。 教研室评审意见 2、实验设计和技术路线安排是否恰当 3、实验条件是否具备 实验技术教研 室 年月 日