两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性研究（可编辑）

两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性研究（可编辑） 两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性研究 干尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 研究生: 王尚尚 导师:陶建平教授 中文摘要 刚地弓形虫 是一种细胞内寄生原虫,在分类上隶属顶复门 、孢子虫纲、真球虫目、弓形虫科 、弓形虫属。弓形虫呈世界性分布,人和多种动物 都可感染,猫是终末宿主,人及其它动物均为中间宿主。弓形虫病对人畜的危害很大,孕 妇感染弓形虫后导致早产、流产、胎儿发育畸形,是当今致畸胎的四大原因之一,也是免 疫功能低下患者如病人等死亡的主要原因。动物感染很普遍,多数呈隐性感染, 但猪可大批发病,死亡率高,给养猪业造成巨大的经济损失。’ 弓形虫的传播途径包括先天性感染和获得性感染。人类的感染多数为获得性感染,因 生食含包囊的肉制品所致。猪肉是我国居民普遍喜食的肉品,养猪业是我国 畜牧业中的支 柱产业。受弓形虫感染的猪肉可能是人体弓形虫病的一个重要传染源。因此,开展对猪源 弓形虫虫株的研究不仅有助于对猪弓形虫病流行特征的了解以及诊断与防治,也有助于掌 握弓形虫的传播规律,从而制定公共卫生策略。为此,本文开展了以下研究。 、弓形虫 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 的建立 国际 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 株株经腹腔接种小鼠, 后采集小鼠腹水,经.纤维素柱 纯化速殖子,提取虫体。以基因和 重复片段序列做为靶点基因,分别进行 了单基因和双基因扩增,并优化反应体系。结果表明重复片段比基因的 敏感性高倍,前者相当于可检测.个速殖子,后者可检测个速殖子;双重可 检测到约个速殖子。 、猪源弓形虫虫株的分离 对临床上出现高温、呼吸困难等症状以及剖检在肝脏、肺脏、淋巴结、肠道等有出血、 坏死等病变的兽医院门诊病猪进行了弓形虫检测。从例病死猪中检出例阳性,阳性 率达%。对检测为阳性的病死猪取脏器组织用小鼠传代,进行虫体分离。取死亡 小鼠腹水染色镜检,可见较多月牙形、半月形或椭圆形的虫体,还可见假包囊。成功分离 出株虫体,分离成功率为%。两株分离株分别命名为一家养野猪和一商 品猪。 、两株猪源刚地弓形虫的鼠毒力 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 将株分离株在小鼠体内连续传代,且传代时每次经腹腔接种的虫体数相同,直至虫扬州入学硕士学位论文 体在小鼠稳定寄生。以株为参考株,每个虫株各设个剂量组,分别经腹腔接种梯度 稀释的速殖子。结果表明分离的株猪源弓形虫分离株对小鼠的毒力与株相同,经腹 腔接种个速殖子致小鼠%的死亡,且死亡发生规律与株相似,因此将这株猪 源弓形虫分离株鉴定为鼠毒力株。但株猪源弓形虫分离株基因的克隆与序列分析 显示,基因序列中同时存在 和 片段的缺失,与鼠弱毒株 的完全一致。 、两株猪源刚地弓形虫的基因型分析 采用?方法,以,,,?,删,,.,, 等个常用分型基因位点对两株猪源弓形虫分离株进行基因型分析,结果显示,分 离的两株猪源弓形虫的基因型完全一致,为非经典型,与报道的中国猫源株中 基因型完全一致。另外,两株猪源弓形虫分离株在、和三个基 因位点上的基因型均为型,且在进化树分析中也显示与基因型聚合在一个分 支。 、两株猪源刚地弓形虫的区序列分析 对两株猪源弓形虫分离株的及. 基因进行了克隆及序列分析,并与 上登录的株及其他弓形虫株的序列进行比较,结果表明弓形虫种内序列存在 极少变异,具有高度保守性。对弓形虫及外源参考群的和.序列构建.进化树 分析,结果显示序列适于弓形虫与其他原虫的种间鉴定,但不适合用于弓形 虫种内遗 传变异的研究。 关键词:猪;刚地弓形虫;分离;鼠毒力分析;基因型;三 ????????』.堂堂堕堡鲨塑旦丝曼垄皇塑坌宣壑基圭塑堂壁丝丝婴窒 ‘ 一 ?..: :. 唧 四 舢 ? 嗍 眦 舢 四 , , , , . . . . ., . , , . , .,. . .. ?., . . ..’ , . . 丁., .. . . . . 一 . . . .., ?. . . .. 扬州大学硕士学位论文 ,; ,, . %... . , .一 %. 一, ..... . , . , . .,. ? . . ..?.?,. . . 、 , , . 一 一... , .. . ? .., . ,.. , ;;? ;; :; 千尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 日三重 目累 中文摘要 ..........................................................,...... ..................................................................... .,... 符号说明?. 文献综述?. 刚地弓形虫病的病原学?一 流行病学? 虫株基因分型小结 参考文献本论文研究的目的和意义 第一章 弓形虫检测方法的建立. 材料与方法 结果讨论?., 参考文献第二章猪源弓形虫虫株的分离 材料与方法 结果讨仑参考文献第三章 两株猪源刚地弓形虫的毒力分析材料与方法 结果 讨仑参考文献第四章 两株猪源刚地弓形虫的基因型分析? 材料与方法 结果 讨论.?.. 参考文献第五章 两株猪源刚地弓形虫的区序列分析材料与方法 结果 讨论参考文献全文小结? 致谢攻读硕士学位期间发表的论文? 扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书??扬州火学硕十学位论文 符号说明 刚地弓形虫 . 氨苄青霉素 蛋白酶 脱氧核糖核苷三磷酸,、乙二胺四乙酸 酶联免疫吸附试验磷酸盐缓冲液 十二烷基磺酸钠三氨基甲烷盐酸盐 溴化乙锭 ?? 异丙基弗..硫代吡喃半乳糖营 一一一? ? 一溴一氯一一引哚一?半乳糖苛 . 聚合酶链式反应脱氧核糖核酸 醋酸钠核糖核酸酶 碱基对 厘米 天 克皮克 垮 飞克小时 】 升 毫摩尔/升毫克分钟毫升 .。摩尔/升印 转/分秒单位??‘ 微摩尔/升微克微升 微米 千尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 文献综述 刚地弓形虫病的病原生物学及其研究进展 弓形虫又译为弓形体或弓浆虫,是年由和在突尼斯的刚地梳 趾鼠体内发现而建弓形虫属,并定名为刚地弓形虫 。弓形虫呈世界性分布,人和多种动物都可感染。猫是终末宿主, 人及其它动物均为中间宿主。弓形虫病对人畜的危害很大,孕妇感染弓形虫后导致早产、 流产、胎儿发育畸形,是当今致畸胎的四大原因之一,也是免疫功能低下患者如 病人等死亡的主要原因。动物感染很普遍,多数呈隐性感染,但猪可大批发病,死亡率 高,给养猪业造成巨大的经济损失。本文就弓形虫病的病原生物学及其研究进展作一综述。 刚地弓形虫病的病原学 弓形虫是一种细胞内寄生原虫,在分类上属于顶复门、孢子虫纲 、真球虫目、弓形虫科、弓形虫属 。弓形虫在不同发育阶段有不同的形态。在人畜等中间宿主体内有滋养体、 包囊、假包囊发育阶段。在终末宿主猫体内还有裂殖体、配子体和卵囊等发育阶段。卵囊 子孢子,速殖子和包囊缓殖子对中间宿主和终末宿主均具有感染性。 .卵囊 猫科动物是弓形虫的终末宿主,虫体在其肠内增殖,最后形成卵囊?。急性感染阶段, 。卵囊经 孢子生殖 猫科动物可以排出几百万个卵囊× ,并持续~ 形成孢子化卵囊,当包括人在内的哺乳动物食入这种孢子化卵囊,卵囊内的具有感染力 的子孢子被释放出来,变为速殖子阶段。猫感染弓形虫后一般不体现出症状,垂直传播的 概率也很小【’】。即便如此,全世界内的家猫与野生猫科动物存在潜在的弓形虫感染【引。报 道指出至少有种猫科动物可以排出弓形虫卵囊【】。家猫以及一些猫科动物由于吞食环境 中有感染力的卵囊或扑食带有包囊的中间宿主,从而引起弓形虫感染。家猫是唯一的一种 作为弓形虫终末宿主的家养猫科动物,在弓形虫感染的流行病学上具有重要作用。首次感 染弓形虫的家猫可能会排出大量卵囊,这就使其主人处于感染弓形虫的风险中。流浪猫或 者农场周围出没的猫可能会携带卵囊而污染农场周围环境,这就可能使被用于人们消费的 家畜受到感染【。 猫初次感染弓形虫组织包囊后,缓殖子在小肠部位立刻进入无性增殖阶段, 增殖阶段 结束后,进入形成卵囊的最后阶段。几乎所有的猫在初次感染组织包囊后经过~ 就 可排出卵囊,并可持续 之久【】相比之下,初次感染卵囊后,子孢子首先进行无性增 殖,在此过程中,一些虫体迁移至肠组织并开始有性生殖。大约有/的猫在初次感染 的前显期后有长达 的排卵囊时间【。猫吞食大量速殖子 卵囊并经过较长的~ 之久【。刚排出的 兰可以引起弓形虫感染,于~ 排出卵囊,可以持续 卵囊未孢子化,不具有感染力,因此,与猫直接接触一般不会导致弓形虫感染。如果形成扬州大学硕十学位论文 有效的保护措施并每天及时清理猫的粪便,则即使将猫养在家中也不会造成弓形虫感染。 外界环境中的的孢子化卵囊是人和其它中间宿主受到弓形虫感染的潜在因素,主要是 受到弓形虫感染的家猫及野生猫科动物造成的?。一只猫可以排出亿多个卵囊到外界环 形成具有感染 境中,】。在含有足够空气、适度及适宜温度的外界条件下卵囊经过~ 力的孢子化卵囊,在厌氧环境中孢子化时间推迟【】。孢子化卵囊对外界环境 有一定的抵 抗力,在低温和干燥环境下短暂存活,在潮湿土壤或泥沙中存活个月仍具有感染力。 在实验室条件下,孢子化卵囊在?可以存活高达个月,在一?可以存活 ,但 是在加热至~?就可在~ 内死亡【引。孢子化卵囊的外壁不易被渗透,因而对 杀虫剂具有一定的抗性【。 卵囊可通过风、雨、表层水或收获的饲料传播到外界环境。污染猫粪便的干草,稻草 及谷物可能是家畜感染弓形虫的原因【引。另外,卵囊也可能通过蚯蚓,食粪无脊椎动物或 肥料传播【。在修整花园时,人类可能通过被卵囊污染的土壤受到感染。已从世界上不同 地区的土样中分离出弓形虫卵囊【。犬类的毛发沾有猫粪时,也可将卵囊传递给人类【】。 通过一些预防措施可以较少卵囊对人的感染。首先,猫的主人要检查其猫是否感染了 弓形虫,家猫要喂食干的,灌装或加工过得食物,并阻止其外出捕猎,从而预防其感染弓 形虫,控制猫出没的地方不存在老鼠等弓形虫潜在中间宿主的出现,以及控制蟑螂和其它 无脊椎动物作为转运宿主的出没;其次,宠物猫的粪便要每天打扫出去,猫舍 及其它沾有 猫粪的器具要戴着手套并用热水?及清洁剂清洗,免疫抑制患者和孕妇不便清扫; 最后,食用的肉类要充分煮熟后食用?刚。 .速殖子 速殖子长“,宽为新月形或卵圆形,是虫体快速增值阶段。速殖子 主动侵入有核细胞并形成质内空泡【】。速殖子不断地增殖,宿主细胞破裂,速殖子通过血 流散布感染中枢神经,眼,骨骼,心肌及胎盘等组织。速殖子通过不断增殖造成细胞死亡 并侵蚀周围组织,因此引起严重的炎症反应及组织破损,从而产生临床症状。在免疫应答 反应的压力下,速殖子将转化为缓殖子,进而形成包囊。 速殖子在垂直传播中扮演重要角色。相比之下,速殖子对外界环境很敏感,在宿主外 很快死亡,因此普遍认为速殖子作为水平感染传播的流行病学意义不大,但有时仍可以发 生速殖子通过水平传播造成的弓形虫的感染【?。近些年,由于弓形虫感染的存在,心、肾、 肝及骨髓的移植也变得更复杂。因为移植的器官内可能存在速殖子或者组织包囊【。速殖 子也可通过血液制品传播,尤其是含有白细胞碎片的制品及在实验室意外被 扎到而注射了 这些制品,然而第一次感染时,虫血症只存在很短的时间,因此通过常规输血而受到弓形 虫感染的机率很低【】。 在一些中间宿主绵羊,山羊和母牛的乳汁中发现了速殖子“。但至今,人 因为乳制品而感染弓形虫的病例是因为喝了未经高温灭菌的羊奶引起的卜。速殖子对蛋 白裂解酶敏感,一般地,胃液可以将速殖子杀死。但报道表明:速殖子可以在胃蛋白酶溶干尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 液中短暂存活高达 ,于是经口途径感染高剂量速殖子可以引起小鼠和猫的弓形虫感 染一。研究还表明,在到达胃部之前,速殖子可能通过入侵宿主的黏膜组织进而进入宿主 的循环或淋巴系统【 ’】。这或许可以解释初次感染弓形虫的母亲用母乳喂养而引起婴儿的 弓形虫病的原因【。速殖子对温度很敏感,通过巴氏灭菌法和加热就可将其杀死,所以乳 制品,尤其是羊奶应该巴氏灭菌或煮沸后饮用,尤其对蛋白裂解酶缺乏的婴儿阶段而言是 很重要的。过去认为通过饮用牛奶而感染弓形虫的几率很小,但是不能排除生食任何一种 乳制品而感染弓形虫的可能性【?。 另外,速殖子不仅存在于血液和乳制品中,还存在于唾液,痰,尿液,眼泪及精液中 一,比,但是并没有证据表明人可以通过这些途径水平传播弓形虫。早期研究表明,从实验 室人工感染弓形虫的母鸡产出的生鸡蛋中分离出速殖子【。由于速殖子对高温及高盐条件 敏感,任何中工方法都可杀死鸡蛋中的速殖子。总之,水平传播造成人的弓形虫感染 大都因为食入弓形虫的两个耐受阶段之一:组织包囊或卵囊。 .包囊 缓殖子存在于包囊内。它们与速殖子的形态一致,但增殖较慢,表达阶 段特异性分子,在功能上与速殖子也不同。组织包囊包含成千上万个缓殖子,形成于脑, 骨骼及心肌等部位。在免疫力低下的患者中,缓殖子从包囊中释放出来,转化成速殖子, 引起感染复发。包囊是中间和终末宿主的感染阶段。 牲畜肉类中包含的弓形虫组织包囊是人受到感染的重要来源,中间宿主受到卵囊或组 织包囊感染后,经过~ 形成组织包囊皿。在特定宿主形成大量组织包囊,并且弓形虫 在不同中间宿主中的寄生部位也不同【。经常可以在感染的猪,绵羊,山羊等动物中观 察到组织包囊,而感染的家禽,兔子,狗和马很少发现有组织包囊。尽管牛及水牛的弓形 虫抗体水平较高,但在牛肉或水牛肉中极少出现组织包囊?。野味及其它野兔,野猪,鹿, 袋鼠及熊等野生动物中的组织包囊是人感染弓形虫的又一潜在因素。猎人及他的家人可能 。 由于在处理猎物时而受到感染【 缓殖子比速殖子对消化酶例如胃蛋白酶和胰蛋白酶更 有耐受力【’引。因此,无免疫力的宿主食入具有活力的组织包囊将产生.感染。虽然 组织包囊对外界环境抵抗力不及卵囊强,但是它对温度的变化有一定的抗性,而且~? 保存高达周的含有包囊的肉制品仍具有感染人的能力【】。组织包囊在.?~.?温度 范围内可以生存周之久,大多数包囊在.?或更低温度就可被杀死,但有时在更低温 ,。相比之下, 度环境下包囊可以存活,这也就表明有些弓形虫虫株对低温具有抗性【’ 肉类中的组织包囊在?温度下可被杀死,处理时间对具有低温抗性的包囊有一定影响: 实验室保存的组织包囊在?条件下处理 或?处理 仍具有感染活性皿’引。 因此,延长处理时间使肉类的各个部分都达到可以杀死包囊的温度,这一点很重要。如果 加热不均匀,例如微波炉加热,则致使含有包囊的肉类仍具有感染力,一些研究表明通过 盐制,糖制或低温烟熏等商业途径可以杀死组织包囊【】。因此,之前认为经过商业加工扬州大学硕学位论文 的肉类不可能是人类受到弓形虫感染的原刚】。但是,很大程度上,组织包囊的耐受时问 依赖于盐溶液的浓度和贮存温度。在实验室环境中,一?的温度范围下,%溶 液可以将组织包囊杀死,但在低盐水溶液中,组织包囊可以存活几周。自制猪肉香肠时 可被 的盐制方法不能杀死包囊,有报道表明组织包囊在%家庭用盐溶液中经过~ 杀死,但是香肠的储存时间较短,所以单独使用盐处理不足够人因组织包囊而引起的弓形 虫的感染‘。组织包囊可以被. 剂量的伽马射线杀死【,这种做法只有少数国家认 可,许多地区持反对态度。水可以杀死组织包囊和速殖子,所以手和用于准备生肉或其它 动物性食物的厨房器具应该用热水喝肥皂充分刷洗口允删。 流行病学 .人 ..血清流行病学 人由于食用被孢子化卵囊污染的食物和含有包囊的未煮熟的肉类或接触到被含有活 性卵囊的猫粪污染的土壤或其它物质材料会发生获得性弓形虫病 【,。而由于输血,器官移植或实验事故造成的获得性弓形虫病案例较少】。弓形虫具 有广泛的全球性传播,至少在五个不同的洲发现人感染的血清学证据【 。估计世界上超过 /的人已经感染这种寄生虫【。一般地,弓形虫水平传播的结果表明血清阳性率随着 年龄的增加而增高,但是在不同地理区域血清阳性率变化较大,大多数人出生后感染弓形 虫无明显症状【】。然而,有时个别会稍微发病,极少有严重的系统病症。人一旦受到感染 将终身带虫感染,直到免疫力低下后,虫体重新感染,但仍保持无症状。一些针对慢性感 染是否对反应时间】,事故发生?,行为四和精神疾病五等方面有影响的研究正在进行。 在美国,之前的弓形虫血清学显示阳性率在%和%之间, 在和分别为%和%。雨在非洲,欧洲和拉丁美洲则有更高的弓形虫 血清阳性率,其变化范围分别为%和%,%和%,?。 ,%,和% 最近一项基于人口的国家健康和营养监测研究机构进行血清学调查表明:美 国本地的~年龄阶段的弓形虫流行性,从?年的.%下降至?年 的%。~年,美国本土~年龄女士的血清阳性率为%,而国外出生的 女士的血清阳性率为.%,%怀孕女士可能受到弓形虫的感染【 。总的血清阳性率随 年龄的增加而增高,非西班牙裔黑人和墨西哥裔美国人的阳性率比非西班牙裔白人更高; 而在美国出生的人群中,墨西哥裔人群的血清阳性率比非西班牙裔黑人或白人低。早期研 究表明岁人群的阳性率为.%,而东托部的弓形虫感染与年龄呈线性相关增长,阳 性率率为.%,较南部.%,中西部.%或西部.%更高【】。西部地 区具有较低的弓形虫感染率,可能因为该地区比较干燥,卵囊在这种环境不宜生存。总之, 由于受到气候多样性,猫群体结构及人类活动行为的影响,这就造成美国地区的弓形虫流干尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 行的多样性【。 在中国,等对上海、长春及大庆等地方共多个的血清样品用间接和 直接凝集实验检测抗;形虫的水平,.%具有血清阳性率。临床表现健康者的血清 阳性率为.%,精神病患者的阳性率为。%。在健康者中,男性和女性的血清阳性率 表现出显著差异,~岁年龄的男女表现极显著,女性更易受到弓形虫的感染‘】。 世纪年代,中欧地区,,,及无产科 病史的怀孕女士的血清阳性率在%和%之间,与其人口相当的,. ,, 等地亦有相似的血清阳性率;拉丁美洲一些地区 ,,,和 及位于海峡的非洲西部地区. ,,,具有更高的阳性率分别为%~%和%~%。 东南亚,中国,韩国等地的孕妇血清阳性率比较低,在%~%之间。冷气候地区的血 清阳性率也是较低的%~%,因此,总的弓形虫感染在全世界的成年人中具有很 高的流行性【?。 ..先天感染婴儿,儿童等 年,首先从 月大婴儿并患有先天脑水肿和小眼疾病的视网膜中描述了弓 形虫组织包囊,之后,这被认为是第一例人的先天弓形虫病的报道【。世纪年代以 后,和的研究引导了人们对弓形虫引起人类初生婴儿脑脊髓炎的认识【】。 。一 在世纪年代早期就认为弓形虫病具有先天性,通过垂直传播由母亲传给婴儿 般地,患有先天弓形虫病的胎儿经产前超声波诊断看起来很正常。如有异常,则超声波影 射图像表现为颅内钙化、 心室扩张、肝扩大、腹水和增加胎盘厚度。新生儿的先天弓 形虫病的症状很多,包括脑积水、小头畸形、颅内钙化、脉络膜视网膜炎、斜视、失明、 癫痫、精神运动性或精神发育迟滞、血小板减少症和贫血【】。临床上脉络膜视网膜炎、脑 积水、脑钙化点等经典弓形虫病特征比较少。没有哪种对患有先天性疾病的新生儿的病症 的描述是能诊断为弓形虫病,并且这些症状与巨细胞病毒、疱疹病毒、风疹和梅毒引起的 先天性感染相似?引,因此,临床诊断弓形虫病经常会遇到很多问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 。并且,大多数患有先 天性弓形虫病的婴儿在出生时是没有临床症状”】。许多婴儿开始不表现出任何症状, 直到几个月或几年后才表现出明显的临床症状,并且大多数为眼病或脑病【】。以上所提 及无临床症状的初生儿中,%不会发生眼病或精神疾病【。延迟发病大都发生于早产 儿,一般为出生的前三个月。具有免疫力或免疫力低下患者在数月或几年后都可以重新患 眼病。至今仍没有预测哪些新生儿将会获得后期并发症的可靠地方法【 。因此,尽早诊断 先天弓形虫病及开展特异性治疗来减少患有此类并发症是非常重要的。除非初级卫生保健 提供者怀疑新生儿很可能患有先天性弓形虫病,否则不会进行弓形虫的诊断,婴儿直到出 现失明,精神发育迟滞或死亡时才会进行适当的治疗。仍有少数先天感染婴儿会患有亚临 床感染,但除非症状可疑才会进行诊断。 虽然,怀孕前感染弓形虫只有极少的例外【?,但在怀孕期间初次感染弓形虫往往会造扬州大学硕十学位论文 成胎儿的先天性弓形虫病【】。另外,免疫抑制女士在怀孕前获得性感染弓形虫将导致 的先天性弓形虫病。母亲受到感染发生头个月内,则造成先天性弓形虫感染的机率 为%~%,但发生在后个月内造成先天性弓形虫感染的机率最高,为%~%?。 。怀孕期间,母 然而,在头个月造成的先天性弓形虫感染一般会导致更严重的疾病岣, 系获得性感染越靠后,将使更多的弓形虫传播给胎儿。 一项研究表明,从位未怀孕并表现为弓形虫血清阳性的女士的胎盘中并未发现弓 形虫【。另一项研究将位孕妇分为两组:一组为怀孕前获得弓形虫感染,另一组为怀 孕期间受到感染。结果表明,怀孕期间获得感染的一组,其中有位女士的胎盘 中发现 虫体,而怀孕前受到感染的孕妇胎盘中未见虫体【川。这些数据证明了怀孕期间受到弓形虫 感染将会引起弓形虫的垂直传播,但在怀孕前就获得免疫力的女士,胎儿因为母源影 响而受到保护【。 ..具有免疫力的成人和儿童的弓形虫病 人的弓形虫感染很普遍,大多数具有免疫力的人受到感染时并不表现出临床症状。偶 尔可见一些轻微症状,其中淋巴结病为最典型的临床变现刨,在成年怀孕女士中变现为子 宫颈脱离或枕骨淋巴结病。淋巴结不痛,不溃烂,通常为分散状,并保持肿大至少 周。慢性淋巴结病为弓形虫感染的一种形式,淋巴结肿大可持续数月【引。也可能出现脑炎、 脓毒症综合征/休克、心肌炎或肝炎等一些严重病症,但是这些症状在具有免疫力的人群中 很少见【 。大多数女士在怀孕期间受到弓形虫急性感染并不表现出临床症状【。 世纪年代早期认为弓形虫感染也是造成视网膜脉络膜炎的重要原副。然而, 眼弓形虫病一直被认为是先天弓形虫感染的结果,在以后的生活中逐渐显现出来【。 大都认为先天性弓形虫病引起婴儿的视网膜脉络膜炎,但儿童或成年人忠有相似的眼部病 变是由于近期弓形虫感染,初次感染或先天感染复发引起的,在这些方面仍存在争议 。然而,有一些眼部症状表现为视网膜炎和视网膜脉络膜炎的报道证实与人的获得 性弓形虫病有关【。在美国,超过%的感染弓形虫但表现健康的人口会发展为眼部 。 疾病,常常表现为视网膜脉络膜炎【 一些关于急性弓形虫病爆发时间和可能原因的流行病学调查结果表明,初次感染和眼 部出现疾病症状之间的时间范围为个月至.年,而患者的年龄为 】。最 大的一次获得性弓形虫病爆发中,病例中均龄岁的位男女患者在弓形虫病爆发 后年内都表现出视网膜病变【】。另外,在巴西南部乡村,一项基于人口的家庭调查表 明此地区具有异常高的类似眼弓形虫病的流行,比其它地区的获得性病原感染的可能性高 倍【。在法国,位获得性弓形虫病患者中有位患有眼部病症【】。法国自年 起强制实行先天弓形虫病产前诊断,基于母亲的免疫水平排除是否先天感染弓形虫。因此, 眼弓形虫病可能是由于先天感染弓形虫或后天获得性感染弓形虫导致的【】。 ..免疫力低下患者 与大多数具有免疫力的人群相比,弓形虫病对免疫力低下患者是致命的,慢性感染复 王尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 发造成免疫力低下患者的弓形虫病【】。血清阴性者接受心脏移植将处于获得弓形虫病的高 风险中,但通过乙胺嘧啶和磺胺嘧啶进行周的预防可以阻止弓形虫的感染。 中枢神经系统是弓形虫感染最典型部位。弓形虫脑炎临床表征变化从持续几 周的亚急性轻缓过程到持续数天的急性精神错乱阶段,伴随着或不表现局灶性神经功能障 碍。临床表现包括心理状态变化,癫痫,局灶性运动缺陷,颅内神经紊乱,感觉异常,小 脑病症,运动障碍和神经精神性病。脑膜病变很少见。体质症状和诸如发烧、不适等症状 也有不同变化。最典型的局灶性神经功能障碍表现为轻微偏瘫和语言异常【引。免疫力低下 患者的弓形虫病也变现为脉络膜视网膜炎,肺炎,多器官相关急性呼吸衰竭和似感染性休 克的血流动力学异常,弓形虫肺炎在接受骨髓移植和患者中比较常见。 弓形虫脑炎是患有弓形虫病的病人中最常见的临床症状【 。当患有严重的免疫 抑制病时,潜在的组织包囊造成人的弓形虫脑炎,而最危险的情况是淋巴细胞数降 到个/【】。临床症状常常为伴随头痛,精神迷乱,运动衰弱和发烧的局灶性脑炎, 若不进行治疗,则发展为抽搐,木僵和昏迷【。语言异常和轻微偏瘫是最典型的局灶性 神经功能障碍‘。弓形虫脑炎的基本病变是脑坏死,尤其发生在丘脑【】。患者可见肺 炎,其它传播性系统疾病或视网膜脉络膜炎,但不如弓形虫脑炎常见。患有恶性肿瘤和输 。 血或移植后进行免疫抑制治疗的人也会引起临床上严重的弓形虫病【 .动物 弓形虫感染广泛流行于人及世界范围内的其它动物【。人由于食入未煮熟的含有包囊 的肉类,食入被卵囊污染的食物或饮料,或不经意食入环境中的卵囊而引起后天的弓形虫 感染。在美国,血清流行病学数据表明:食用经过不恰当加工的含有弓形虫的肉类是人受 到其感染的主要原因【 。家畜肉类中的弓形虫组织包囊是人受到感染的的重要原因,动物 性食品中组织包囊常常发现于受感染的猪,绵羊和山羊,而受感染的家禽,兔 子,狗和马 却不常见【】。 ..猪 家猪野猪 被认为是人受到弓形虫感染的重要原斟,而且已报道的人急 性弓形虫病是由于食用未煮熟的并受到弓形虫感染的猪肉引起的【 。在某些地区,食用未 煮熟的猪肉是人感染弓形虫的重要原因【。在欧洲和美国,广泛地认为猪肉是人感染弓形 虫的主要原因【 ,,这是基于在大多数商品猪肉中发现弓形虫组织包囊这个事实及于 世纪或年代对猪的弓形虫感染的流行病学调查而做出的假设【。在中国,由于饮食 习惯,猪肉也被认为是食源性弓形虫病的重要来源【。 弓形虫可引起猪的死亡,尤其是引起初生小猪的死亡。大多数猪因为吞入环境中的卵 囊或被弓形虫感染的动物组织而引起后天弓形虫感染,很少因为通过胎盘的垂直传播而引 起先天感染。封闭式养殖可以极大地减少弓形虫感染,但是如今有机农业发展趋势可能会 增加猪的弓形虫感染。近来,用山羊乳清喂猪将会是有机饲养中使猪受到弓形虫感染的风 险因素之一川。 扬州人学硕士学位论文 早期关于猪的临床弓形虫病比较少。在美国俄亥俄州的一个农场第一次报道了猪的弓 形虫病【】。这个农场的猪表现出咳嗽,协调障碍,震颤和腹泻,并有%的死亡率;也有 死胎,早产和产后死亡的现象,也在初乳和母猪的乳汁中可发现活的弓形虫虫体。这些研 究结果还未得到证实而且这场疾病暴发由于其它的原因而变得复杂【。在美国印地安那州 发现一头患有急性弓形虫病的小猪表现为肠坏死、淋巴结炎、肺炎和脑炎;坏死部分可见 弓形虫速殖子。这头小猪和其余同窝出生的头小猪在出生时外表看似正常,但~周 后表现为腹泻,~周内有头死亡。流行病学数据表明这些小猪可能在出生后受到弓形 虫卵囊的感染】。虽然在猪群中可以诱发先天弓形虫病【,但我们还不清楚美国或其它地 方记录的弓形体流产事件刈。 由于食入环境中的卵囊或食用被污染的肉类而受到弓形虫感染的人口比例还不清楚, 至今也没有可靠的方法来确定传染源。然而在美国,血清流行病学数据表明 食用经过不恰 当烹饪方法加工被弓形虫感染的肉类是人受到感染的主要原因【 。检测猪的弓形虫特异性 抗体在确定猪的实际感染状况中具有重要的应用,并且可以作为监视猪群弓形虫病的一种 工具。直接检测弓形虫虫体比较繁琐,需要大量的实验动物。由于组织包囊及弓形虫特异 性抗体在大多数哺乳动物中持续存在较长时间,因此,动物血清阳性率结果常常代表了其 体肉具有的感染力状况一圳。 在中国,近年一些省份关于猪弓形虫感染的血清流行病学调查【见表?,不同的流 行率可能由于不同方法的敏感性不同,不同的血清学方法可能会造成所调查猪群的弓形虫 感染血清阳性率的少许改变。掣比较了,和在检测弓形虫抗体 方面的有效性,结果表明和有较高的阳性检测率。等?峙艮道表明 在检测猪弓形虫感染血清阳性率时比其他调查者【应用得到更高阳性率。 表中国大陆猪弓形虫的流行情况 . ’ . % .. : . : .. :. :. : . . : . : . :. :. .. :. : . .. : . : . : :: ;: ;: .:.鄄%尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 一 在美国,近一些年的猪群弓形虫血清阳性率数据见表.。不同种类猪群具有明显不 同的弓形虫流行率。饲养猪和市场猪大都是室内饲养,并在 良好管理设施环境中避免接触啮齿类动物和猫,于是弓形虫流行率在最近十几年中有很大 的降低。 及在相同地方进行的调查发现血清阳性率明显降低【】。管理系 统也影响弓形虫在猪群中的流行率。在差的非封闭式管理条件下,弓形虫流行率可高达 %。危险评估表明暴露于有猫和老鼠出没的环境中,即使不在户外活动,也可能感染猪 群。 表美国猪血清弓形虫抗体情况 墅坠::苎堡塾塑丝竺翌堕兰竺旦竺璺堡:垫竺竺旦堕堑竺皇旦曼垒 坚垒塑巳垒 巳 墨竺坚旦垒 塑旦:鱼 丝呈竺堑 嘲郴 絮?粤 荔 ?. ? .一 . 嘤豇? 焉 恭 . .世豇 黑 , 翟; . .。 舶 嘤? .;。 ,, . , ,弩? , 。 . 堕 坚型垫皇:垒塑 鱼: 坚尘壁皇竺墅 堡 : .: .:.: . 从屠宰场或农场的猪组织中分离到活的弓形虫虫体表.,部分由于检测过程 的影 响,分离弓形虫的成功率也出现很大变化。用猫进行弓形虫的分离所得到的 分离率比用小 鼠得到的要高,这可能由于用猫进行分离时所用的组织量比较大的缘故。不 管所检测猪的 弓形虫抗体水平如何,通过抗体检测再进行生物分离将增加弓形虫分离的有效性。因为肉 类后期屠宰处理贮存,盐处理将影响组织包囊的的活力,所以基于屠宰场样品的血清 学或寄生虫调查并不能提供一个人受弓形虫感染的实际评价【 。例如,美国近半数的肉类 零售商都会用盐水注入猪肉中。一些盐处理标有“深加工”肉类方法可以杀死弓形虫组 织包囊【 。等调查了零售店里猪肉中具有活力的弓形虫的流行性,从家都市统 计局获取个解冻猪肉样品中分离出株弓形虫【】。 另外,通过小鼠实验,在南斯拉夫,等嘶】从组成年猪隔膜中的组 里检测到获得弓形虫虫体,每组含有.个样品。等【从加拿大头猪的 心脏中没分离出弓形虫,但是血清阳性率为.%。 篙 .竺扬州大学硕十学位论文 表从自然感染猪组织中分离的弓形虫 .? 鱼旦璺壁垒丝 竺竺翌塑 皇里 塑旦:苎璺 塑竺:望竺堑?堑 坠星竺型垒 旦垒垒曼璺坐壁望. . .. ... ..... .. .。 . .‘. . 垦尘里堕 兰竺 :: 生旦璺 。皇曼型苎旦:兰 笪 : .. . .。 ..鸡 鸡对临床弓形虫病有一定的抗性。直接检测土壤中的弓形虫卵囊比较困难,因此,鸡 可作为土壤受到弓形虫卵囊污染的指示动物。因为鸡可作为猫的有效食物来源,而猫可 向环境中排泄卵囊,再者,人可能因为食用未煮熟的被弓形虫感染的鸡肉而受到感染,所 以,鸡被认为是弓形虫流行病学中重要的宿主之一?。不像封闭式养殖的鸡群,后院散养 的鸡群很容易受到弓形虫的感染【 。在农村环境下,由于自由散养.鸡对弓 形虫有一定抵抗力,并且比啮齿类生活时间长,所以自由散养.鸡在弓形虫 的流行病学方面或许比啮齿类动物更具重要作用【】。鸡可能感染有鼠毒力型弓形虫,但并 不表现为临床症状??。 国内,大都数流行病调查为很多年前进行的表?,如今家禽养殖管理已经发生 了 改变。由于使用不同的血清学检测方法以及鸡的种类及地区来源不同,所以血清学调查的 可比性不强。大多数调查使用检测,而这种方法对禽类弓形虫检测的敏感性不强 】。再者,禽类养殖管理在不停地改进,而且在禽流感过后,动物卫生得到普遍提高】。 被检测的鸡中,有高达%的鸡可以分离出活的弓形虫虫体,这些变化可能因为鸡龄, 检测数量,方法和组织不同引起的。在密西西比州、蒙大拿州、得克萨斯州、俄亥俄州、 伊利诺伊州、格鲁吉亚和路易斯安那州等地的小农场,%~%后院散养的鸡可以分 离到活的弓形虫虫体【。 世界范围内只有仅有的一些临床鸡弓形虫病的报道。最早是在德国报道的母 鸡弓形虫病,显微镜观察主要表现为坐骨神经神经炎、脉络膜视网膜炎和脑炎【。临床表 现为厌食,头颈痉挛,麻痹和失明。在印第安纳州一个鸡场,和 报道了死于弓形虫脑炎和脉络膜视网膜炎的鸡弓形虫病【】。等报道了格鲁吉亚 的三只鸡通过免疫组化方法诊断其患有外周神经炎,但不排除受到疱疹病毒马立克氏病 感染的可能【】。最近在伊利诺伊州,只后院散养的鸡群中有只突然死亡。临 床症状 只表现为斜颈,不能站立和侧卧。其中一只进行剖检,只在脑部可见多区域坏 死、血管周千尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 旦 围淋巴细胞袖口和胶质细胞增生,在病变区域发现大量组织包囊和速殖子。 剩余的只鸡 。 无临床症状,而且含有活的弓形虫虫体 表中国大陆鸡弓形虫的流行情况 .?’ .?/ %% 。 ? 叫’ 。? 。?“ : 一 :孑 . . :. : . . :. :. :. :. : ?. : . : ? : . . : :.: ::‘ : .: .:..: . ,..其它家畜 牛 牛不是弓形虫的良好宿主【 。虽然牛可能被弓形虫卵囊感染,但可能由于先天的 弓形虫抗性,牛受到感染后,虫体在几周后会被清除掉或者降低到不能被检测到的水平【。 肉牛喂食,个弓形虫卵囊,于、、 和给头体重在、 死 和 后依次死亡;尸体检验后,用猫进行虫体分离,只在、和 亡的肉牛中分离到虫体,第四只没分离到获得弓形虫虫体?‘不。另一个实验研究是从暴露于 自然环境的肉母牛中分离弓形虫,所用动物为猫或小鼠,从可食用的组织中没有分离出虫 体,但从肠匀浆中分离到虫体【博。因此,很难从牛组织中检测到弓形虫。牛的临床弓形虫 是造成牛流产的原因 病没有确切的报道【 。在没有发现犬新孢子虫 前,这种寄生虫被错误地认为是弓形虫,因为弓形虫和犬新孢子虫在形态上相似】。在美 国华盛顿州,从一头流产胎儿中分离出弓形虫虫体,由于对死亡胎儿未进行组织学检查, 。 所以这头母牛的流产是否由于弓形虫病引起的还没有得到确定【 羊 弓形虫引起绵羊的流产和新生儿死亡。先天感染的羔羊出生后若在一周内存活下 来,一般生长正常,但将是人受到感染的感染源【】。在美国南达科他州的一羊群中, 和从只自然感染的羔羊中分离出弓形虫。这几只羔羊由于弓形虫病而引起流 产。也从 只新生死胎的组织中发现弓形虫【。在美国及其它地方还没有成年绵羊的临 床弓形虫病事件的记录。山羊弓形虫病的临床征兆表现为流产和新生儿死亡,但成年山羊 会发展为肝、肾、脑的临床弓形虫病【】。报道的乳羊弓形虫病临床症状为流产和新生儿死 亡。 :扬州人学硕十学位论文 马马对弓形虫有抵抗力,最近的两次血清学调查表明弓形虫在马中有很低的流行性。 。 马的临床弓形虫病没有明确的报道 ..宠物 猫猫的弓形虫感染有重要的流行病学及临床意义。猫的血清阳性率因年龄和生活方 式的不同而变化。野猫比宠物猫和家养猫有更高的弓形虫流行性。猫患有临床弓形 虫病表现为精神低迷,厌食和突然死亡。肺炎是猫弓形虫病的最重要临床表现。其他常见 的临床表现是肝炎、胰腺坏死、肌炎、心肌炎、葡萄膜炎、皮炎和脑炎。先天感染小猫的 临床弓形虫病最为严重【 。猫也可患有免疫缺陷病毒,虽然实验表明感染可以 使猫容易患有弓形虫病【,但是这种现象在自然感染的猫上很少见,因为只有很少关于猫 弓形虫病爆发伴随着感染的报道【。当猫感染弓形虫和时,血清阳性率和抗体 滴度都比较高,所以两者之间的相互影响比较有趣引。 狗狗的先天弓形虫病很少见,狗弓形虫病的临床症状常常为肺炎、肝炎和脑炎。 在美国,报道的狗急性弓形虫病大都是因为未注射抗免疫抑制性犬瘟热病毒疫苗 而引起的【。小狗会发展为更严重疾病,但是还没有狗先天弓形虫病的记录】。 其它兔子,松鼠,水貂及宠物鸟尤其是金丝雀和朱雀都有零星临床弓形虫病的 爆发【,兔子与松鼠的弓形虫病相似。松鼠弓形虫病的临床症状表现为厌食、腹泻、昏睡、 暴力、呼吸困难,并且有时会撕咬小松鼠。一例罕见的金丝雀弓形虫病表现为失明及两眼 完全损伤【?。 ..野生动物,圈养动物园里动物及濒危动物 鹿、熊和浣熊的弓形虫感染具有重要的流行病学意义。鹿是严格的食草动物,但有很 高的弓形虫流行性,这表明环境中广泛存在弓形虫卵囊的污染。熊和浣熊是杂食动物,他 们受到弓形虫感染表明环境中的有卵囊及受感染中间宿主的污染 。肯塔基州、印第安纳 州、密歇根州和俄亥俄州地区的红狐 和灰狐 的血清阳性率较高,并从体内分离到弓形虫【】。 动物园的某些种类很容易患有弓形虫病引。报道的一些灵长类动物如环尾狐猴,松鼠 猴,绒猴,伍利猴患有急性弓形虫病,在病变发展到脑部之前,这些动物突然死亡,常常 伴有内脏的弓形虫病;肠固有层细胞坏死和肠系膜淋巴结炎为特征的肠炎表明食用污染卵 囊的食物和水造成弓形虫感染【】。有许多关于沙袋鼠和袋鼠急性弓形虫病的报道【。有 袋哺乳动物中,袋鼠容易患急性弓形虫病,临床症状为肺炎、心肌炎、肝炎和失明,甚至 乙胺嘧啶与磺胺类药物治疗后仍会死亡【 。 濒危动物夏威夷乌鸦 数量极少,但在野外仍有数只死于弓形虫 病【。 ..海洋动物 和鲸类动物海 弓形虫常常感染海洋哺乳动物,并且是南方海獭 。 豚,鼠海豚和鲸鱼的病原,引起中枢神经损伤,行为改变,流产及胎儿或新生儿死亡于尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 旦 和报道了海獭的原虫脑炎病?妯,集中于病原的环境研究目的在于提高公众对 生物污染损害淡水及沿海海洋生态系统的意识;已有许多包括水源弓形虫病爆发损害人类 。 健康的详细研究记录【 在不同的海洋哺乳动物海獭,海豚,海豹和海象中检测到弓形虫抗体 。海洋哺 乳动物具有很高的弓形虫感染令人感到意外,因为他们很少捕食中间宿主,这可能由于卵 囊污染水源引起的【 。土壤被卵囊污染的地方是家猫盛行的地区 。卵囊可能通过淡水 流通进入近海岸的海洋环境?。在到达海洋之前,卵囊被滤食无脊椎动物富集,这就成为 海洋野生生物的感染源;双壳类生物食入的卵囊仍对实验鼠有感染性【 。在夏威夷僧海豹 中发现抗体和临床弓形虫病,这表明太平洋海水被污染了【?。 都有很高的弓形虫抗体阳性率,并分离出虫体【 , 海獭和宽吻海豚 经胎盘传播的弓形虫病在海洋哺乳动物中很少见【。 虫株基因分型 关于弓形虫的分型有很多方法,不同方法各有优缺点;早期对虫株的基因分型是在多 位点酶切电泳基础上进行的【 。从法国收集的大部分虫株采用一些多态酶用于 弓形虫的特性研究,并将这些虫株分为,和三大同工酶系【 。但是,方法 需要大量的纯化虫体。微卫星标记位点是比较短的重复片段,后来也用此进行基因 分型【圳。标记位点比较敏感、可靠,并易于高通量分析。虽然标记位点具有高度 多形性,但是由于在复制过程中有大量重复片段也可延伸扩增,因此最终的图谱可能很相 似‘。随机扩增多态性已用于弓形虫特性的研究‘;然而,这项技术很容易受宿 主污染的影响,这也是造成结果多变的主要原因。与致病性相关的寄生虫因素,如 虫体,寄生虫感染阶段和分离株的基因型,还未进行充分研究。近来,虽然定量用于 先天弓形虫病诊断,解释了超声异常和腹水中高虫体数之间的关系,但是主要原因是早期 母源感染【 。一些研究对先天弓形虫病和弓形虫基因型的关系进型研究,但结果有时会有 差异。 特异性基因位点的限制性片段长度多态性讧分析已被广泛用于弓形虫的基因分 型。标记位点可用于扩增的高通量分析,然后进行限制性酶切和凝胶电泳检测。 个 北美及欧洲的弓形虫分离株应用多位点分析其特性,把弓形虫分为、 主要群体基于这些地区的高度克隆群体结构,所以只在位点进行临床样品弓形虫的 分型研究已经足够了。但仅仅这一个位点不足以分辨出重组或外来虫株。为了改进对混 合型,重组型及非典型株的分型方法,采用多位点.的结合进行基因分型【引。 重要的是,标记位点在识别一些改变限制酶切位点的变化上有一定限制,很多标记 位点的多态性并不能用这种方法进行区分。已经建立了检测某些沉默突变的单核苷酸多态 性分析方法【,但是这种方法需要监测大量的基因位点,并且需要大量的时间 去开发和优化每个标记位点【。扬州人学硕士学位论文 以上方法可能将变异虫体进行错误地分类,这是由于变异虫体具有形态相似或方法的 分辨力不足造成的。相比之下,基因组区域的直接测序能揭示包括单核苷酸多态性 和小插入片段及缺失在内的全基因多样性,并可检测到更多的基因多样性。基因位 点通过测序表明具有高度多态性,但.分析只能检测到个群体【。于是,对 于新分离株或先前未取样的群体,基于测序的方法是对其进行多态性分析的最好途径。包 括管家基因,抗原及选择性中性内含子的编码区在内的许多不同位点被用于测序分析,高 度多态性抗原为区分弓形虫群体内的分支提供了最大的解决方法;相比之下,选择性中性 区域为估计不同世系之间的共同世系年代和预测共同世系提供最好的数据资源【?。基于序 列的分型具有明显的缺点就是花费越来越高,并需要使用尖端技术。 由于弓形虫虫株的紧密相似性,共同拥有最主要的抗原决定簇,所以,血清分型有一 定的限制。认识到一些抗原表位既有多态性和免疫原性,所以利用一些抗原的多态性分析, 血清分型方法可以将基因型与基因、型区分开来。但是这种方法不能将基因和 型区分出来,或者不能将某些地区其它主要基因型进行准确的分型。以后需要研制更特 异的血清学分型方法使对动物及人的慢性弓形虫感染进行虫体的分型成为可能?。 .弓形虫的基因分型 为了进行生物学和流行病学研究,通过扩增六个独立的单拷贝基因,并以限制性 片段长度多态性分析,将弓形虫群体被分为个主要的基因型:、和型, 然而从系统发育的观点来看,基因型属于同一个克隆群体【。利用不同的多位点分 型方法对不同的分离株进行基因分型,基因型是人疾病患者的主要流行基因型,包括人 的先天弓形虫病引。在巴黎,从腹水样本中发现了非基因型【。然而,对不同来源分 离株包括动物及人的弓形虫重新感染或先天弓形虫病进行分析表明基因型与人的先 天弓形虫病相关性比与动物感染或慢性感染患者的相关性更明显。一位西班牙人 对有限数量的先天弓形虫病患者进行研究发现在%的先天感染患者中发现基因型分 离株【】。所有这些研究并不能解释基因型与先天弓形虫病严重程度的确切关系。 在北美,与人弓形虫病先天感染及患者密切相关的虫株大都属于基因型 虫株【。在欧洲,人的弓形虫感染主要也与基因型虫株相关。一些研究结果表明 从农业动物中分离的虫体大都属于基因型,包括猪和绵羊。在北美,鸡的弓形虫 分离株表现为基因型比型有更高的流行性【 。早期调查表明动物源的弓形虫常常为基 因型和型【。在无临床症状或良性先天性弓形虫病患者中没有发现基因型和非典型 虫株,但在患有严重弓形虫性视网膜脉络膜炎患者和急性散发性弓形虫病的免疫力低下患 者中发现了基因型和非典型虫株【。人的弓形虫感染大都为基因型,与动物感染之间 的不同之处还不清楚,但可以反映出易感性的不同。其一,入源分离株主要是从疾病事例 中得到的,而动物源感染主要为亚临床症状。最近的一些调查研究,使用更多 的标 记位点进行分型,结果表明北美的绵羊群体中主要流行基因型为型,同时也发现了许多 明显不同的新基因型。这些新的变种可能由于体细胞突变,有性重组造成的,或者就是千尚尚:两株猪源刚地弓形虫的分离及其生物学特性的研究 。 一个全新的基因型,要完全了解这些不同之处,需要进一步的进行基于序列的分析【 不同的克隆世系在许多方面如生长、迁移等方面有