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KCNQ1及SLC30A8基因多态性与2型糖尿病患者相关性研究

徐婷　潘佰灵　丁萍英

[Summary] 目的 分析KCNQ1及SLC30A8基因多態性与2型糖尿病（T2DM）患者的相关性。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 选取2015年9月～2017年9月间在本院确诊并接受治疗的T2DM患者100例作为观察组，选取同期在本院进行体检健康者100例作为对照组，收集两组对象早晨空腹静脉血5 mL，全自动生化分析仪检测糖化血红蛋白、空腹血糖水平、胰岛素和血脂的水平，基因型检测使用单碱基延伸法，分析不同基因位点和T2DM相关性状况。 结果 SLC30A8基因对照组TT、CT及CC基因型的频率依次为16%、52%及32%，观察组依次为13%、49%、38%，差异无统计学意义（χ2=1.290，P>0.05）；对照组T、C等位的基因频率依次为61%、39%，观察组依次为73%、27%，差异有统计学意义（95%CI=0.795～1.684，OR=1.205，χ2=11.553，P<0.05）。观察组TT基因型血清FINS及HOMA-B高于CT基因型和CC基因型，观察组TT基因型血清TC、TG和FPG低于CT基因型和CC基因型，差异均有统计学意义（P0.05）；对照组T、C等位的基因频率依次为53%、47%，观察组依次为64%、36%，差异有统计学意义（95%CI=0.863-2.104，OR=1.171，χ2=12.995，P<0.05），CC基因型血清TC、TG、FPG及HbA1c低于CT、TT基因型，血清FINS高于CT、TT基因型，差异均有统计学意义（P

[Key] 2型糖尿病；SLC30A8基因；KCNQ1基因；相关性

[] R587.1 [] A [] 1673-9701（2018）09-0001-04

Correlation study between gene polymorphism of KCNQ1 and SLC30A8 and type 2 diabetes mellitus

XU Ting PAN Bailing DING Pingying

Department of Endocrinology， Taizhou Hospital in Zhejiang Province， Linhai 317000， China

[Abstract] Objective To analyze the correlation between KCNQ1 and SLC30A8 gene polymorphisms and type 2 diabetes mellitus（T2DM）. Methods 100 patients receiving treatment and diagnosed as T2DM in our hospital from September 2015 to September 2017 were selected as the observation group， and 100 healthy subjects undergoing physical examination in our hospital were selected as the control group during the same period. 5 mL of fasting venous blood were collected from participants of two groups， and detection of glycosylated hemoglobin， fasting blood glucose， insulin and lipid levels were analyzed by automatic biochemical analyzer. Genotype were detected by single base extension method. The correlation between different gene loci and T2DM was analyzed. Results The gene frequencies of TT， CT and CC genotypes of SLC30A8 were 16%， 52% and 32% in the control group， and were 13%， 49% and 38% in the observation group， respectively， with no significant difference（χ2=1.290， P>0.05）. The frequencies of T and C alleles were 61% and 39% in the control group and were 73% and 27% in the observation group， where the difference was significant（95%CI=0.795-1.684， OR=1.205， χ2=11.553， P<0.05）. The serum FINS and HOMA-B levels of TT genotype in the observation group were higher than those in CT and CC genotype， while the levels of serum TC， TG and FPG in TT genotype in the observation group were lower than those in CT and CC genotype， where the differences were both significant（P<0.05）. The gene frequencies of TT， CT and CC genotypes of KCNQ1 were 27%， 41% and 32% in the control group， and were 24%， 45% and 31% in the observation group， with no significant difference（χ2=2.006， P>0.05）. The frequencies of T and C alleles were 53% and 47% in the control group and were 64% and 36% in the observation group， where the difference was significant（95%CI=0.863-2.104，OR=1.171，χ2=12.995，P<0.05）. The serum TC， TG， FPG and HbA1c levels of CC genotype were lower than those in CT and TT genotype， while the levels of serum FINS in CC genotype were higher than CT and TT genotype， where the differences were both significant（P<0.05）. Conclusion rs13266634 locus of SLC30A8 polymorphism and rs2237892 locus of KCNQ1 gene polymorphism are correlated with T2DM incidence and its vascular complications.

[Key words] Type 2 diabetes； SLC30A8 gene； KCNQ1 gene； Correlation

2型糖尿病（T2DM）为临床较为常见疾病，是环境与遗传因素共同影响所产生的结果。近些年来，随着社会快速发展，人们生活方式和饮食习惯发生较大改变，T2DM发病率也呈逐年增加趋势[1，2]。目前，全基因组关联研究法的应用使人们对T2DM的易感基因有更深入认识，和T2DM联系紧密的基因变异区域有近40个，但其中多数研究主要集中在欧美人群内，不同位置和种族在T2DM 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 型与遗传中异质性较大，且不同种族内SNP位点分布的基因频率差异也很大，相关报道基因多态性和国内人群T2DM是否也有易感性还需要进一步验证[3，4]。因此，本文通过分析KCNQ1及SLC30A8基因多态性与T2DM患者相关性，为临床患者治疗提供一些实验室依据。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2015年9月～2017年9月间在本院确诊并接受治疗的T2DM患者100例作为观察组，选取同期在本院进行体检健康者100例作为对照组，其中观察组男68例，女32例，平均年龄（50.6±7.5）岁，饮酒者65例，吸烟者48例；对照组男57例，女43例，平均年龄（48.9±8.4）岁，饮酒者60例，吸烟者51例。两组患者的临床资料对比差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属知情并同意。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：（1）符合糖尿病专家委员会编写T2DM诊断准则；（2）无酮症等其他应激状况。排除标准：（1）线粒体及1型糖尿病；（2）合并造血系统、心脑血管、肾及肝等原发性疾病者；（3）患有糖尿病慢、急性并发症者。

1.3 实验方法

1.3.1 生化指标检测 收集两组对象早晨空腹静脉血5 mL，全自动生化分析仪（中国迈瑞公司生产，型号：BS-400）检测糖化血红蛋白、空腹血糖水平、胰岛素和血脂水平。

1.3.2 基因型检测 提取两组对象血清DNA，对T2DM易感基因内SNP位点行多重PCR，PCR产物行单碱基延伸，多功能遗传分析系统（美国BeckMAN公司生产，型号：GenomeLabTM GeXp）行基因分型。

1.4 观察指标

观察两组对象SLC30A8基因、KCNQ1基因内TT、CT及CC基因型分布和T、C等位基因频率状况；观察T2DM患者临床变量和SLC30A8基因、KCNQ1基因联系情况。

1.5 统计学分析

使用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，行单因素方差和独立样本t检验，计数资料采用χ2检验，Hardy-Weinberg平衡法对基因频率群体代表性检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 T2DM与SLC30A8基因rs13266634位点联系情况

两组对象内TT、CT及CC分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）；对照组TT、CT及CC基因型的频率依次为16%、52%及32%，观察组依次为13%、49%、38%，差异无统计学意义（χ2=1.290，P>0.05）；对照组T、C等位的基因频率依次为61%、39%，观察组依次为73%、27%，差异有统计学意义（95%CI=0.795～1.684，OR=1.205，χ2=11.553，P<0.05）。

2.2 T2DM与KCNQ1基因rs2237892位点联系情况

两组对象内TT、CT及CC分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）；对照组TT、CT及CC基因型的频率依次为27%、41%及32%，观察组依次为24%、45%、31%，差异无统计学意义（χ2=2.006，P>0.05）；对照组T、C等位的基因频率依次为53%、47%，观察组依次为64%、36%，差异有统计学意义（95%CI=0.863～2.104，OR=1.171，χ2=12.995，P<0.05）。

2.3 SLC30A8（rs13266634）基因型和T2DM患者临床变量情况

TT基因型血清FINS及HOMA-B高于CT、CC基因型，血清TC、TG和FPG低于CT、CC基因型，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.4 KCNQ1（rs2237892）基因型和T2DM患者临床变量情况

CC基因型血清TC、TG、FPG及HbA1c低于CT、TT基因型，血清FINS高于CT、TT基因型，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

3讨论

糖尿病是多基因疾病，其发病与进展涉及多种因素，如年龄、肥胖和遗传等，为多因素的复合体，其遗传方式为常染色体的多基因隐性遗传，家族发病特征明显[5，6]。遗传异常基因会造成后代对糖尿病更易感，遇到肥胖等外部因素时易发病，T2DM相比1型更易受遗传因素影响，单一因素对患者影响较小，多因素结合会增大其发病概率[7，8]。

KCNQ1基因为KCNQ家族之一，在染色体11p15.5上可产生四聚体，与KCNE蛋白相互影响组成功能性钾通路，在机体外周血白细胞、心脏、前列腺、内耳血管纹、前列腺、小肠、肾脏及胰腺内呈现高表达[9，10]。KCNQ1主要作用为参加心肌动作电位复极，同时对上皮细胞水盐平衡进行调节。KCNQ编码K+通路为膜电位钾离子通路主要分支，常表达于心肌组织，主要作用是转运上皮组织内盐与水。KCNQ1编码内K+电压则主要依赖成孔α亚基。机体血管平滑肌内有多个钾离子通路，糖尿病患者血管相关并发症中都有它们参与，在T2DM原发病原中也可能参加[11-14]。平滑肌的激发-收缩偶联内Kv通路有重要影响，Kv通路阻滞则造成膜极化，KvLQT1通路阻滞对INS-1产生胰岛素有刺激作用。相关研究显示，KCNQ1基因敲除小鼠其心脏能力会发生紊乱，并且小鼠整个机体对胰岛素敏感性变强[15-17]。同时该基因突变会造成家族性房颤和QT延长综合征。近些年来，关于KCNAI基因复制与缺失在QT延长综合征患者内被检测出，说明KCNQ1的拷贝数量发生改变在T2DM易感性内有重要影响。SCL30A8基因在8号染色体内，编码于胰腺细胞囊泡内表达锌转运体8，主要通过将锌转送到胰岛素囊泡内对胰岛素合成与储存进行调整。本文研究显示，CC与CT基因型FINS含量低于TT基因型，差异有统计学意义；FINS为反映胰岛B细胞功能指标，说明rs13266634内C等位基因和胰岛素能力衰竭及空腹胰岛素形成不足有联系。SLC30A8基因特异性地在胰岛B细胞中表达，可促进细胞质内锌转移至有胰岛素的囊泡内，然后胰岛素和两个Zn2+结合产生稳定的六聚体储存起来，当胰岛B细胞受到刺激时将其分泌出去。相关研究显示，SCL30A8发生基因变异会使机体空腹胰岛素含量升高，其原理可能为增大胰島B细胞凋亡或者降低增殖使B细胞质量下降，进而造成胰岛素原在转变为胰岛素分子时受到损坏[18-20]。本文研究说明C等位基因可能会使心血管并发症出现概率增大。心血管疾病和糖尿病联系相关研究中，指出在校正性别、年龄和其他变量模型后，LDL-C与TC含量上升对心血管类疾病有更高预测价值。

综上所述，SLC30A8基因多态性rs13266634位点和KCNQ1基因多态性rs2237892位点与T2DM发病及血管并发症有一定相关性。

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