无菌室的使用与
管理制度
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安徽华恒生物工程有限公司
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无菌室的使用与管理制度
一、无菌室的使用
1、无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的实验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、 镊子、接种针、接种环、记号笔等。不要放与检测无关的物品。
2、用75%酒精擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用75%酒精喷雾消毒空气，最 后臭氧杀菌1小时。
3、定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立 即彻底消毒灭菌。
4、无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位(待检物例外)，然后打开紫外灯杀 菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。
5、进入无菌室前，必须于缓冲间更换工作服、工作鞋。
6、操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话不喧哗，以保持环境的无菌状态。 7、火焰灭菌: 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
8、一 般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行 灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用75%酒精擦拭消毒，工作人员的手也用此法 进行消毒。
二、无菌室的准备工作及要求
1、实验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。
2、操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好白大褂和鞋，才能进入无菌室。 4、进入无菌室后再一次消毒手部，戴上口罩然后才进行实验操作。
三、无菌室操作过程注意事项
1、玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。
2、操作应在近火焰区进行，以免染菌。
3、接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再 灼烧灭菌。
4、使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作。
5、观察平板时不好开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能大
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开，而是上下盖适当开缝。
6、工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，不要的废品带出无菌室，最后用消毒液擦 拭工作台。
四、无菌室管理规定
1、无菌室地面、台面、其它
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面每3日擦拭1次。操作台每日用75%酒精擦拭消毒，每 次使用前准备好物品紫外灭菌30分钟后方可使用。
2、从室外带入无菌室内的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射预先消毒。无菌操作前 75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执行无菌操作。
3、无菌室内定期消毒灭菌:无菌室内地面拖干净并喷雾消毒。每三天一次。 4、无菌室内无菌状况定期检测:灭菌后的接种室内桌上和桌下各放一套培养基平皿， 暴露15分钟，盖上，37?培养24小时，每个平皿的菌落?4，则认为效果良好，否则 需延长照射时间或加强其它措施。半个月一次。
5、灭菌后物品放在指定位置，注明灭菌日期，高压灭菌物品可存放7-14天，过期不能 再用，需重新包装灭菌。
五、无菌室菌种管理规定
1、车间用的菌种按编码严格划分做好标识区别摆放，与技术部的实验菌种分冰箱摆放。 2、车间用菌种每日传代一次，并做好传代记录。
2、车间用的菌种一个月活化一次，严格做好标识。
3、车间用菌种每种菌种一年做两次甘油管冷冻保藏。
4、车间菌种每半年做一次菌种筛选，保持菌种的纯正。
六、无菌室外来人员管理规定
1、外来人员进入无菌室必须申请，得到公司领导批准方可进入，进入后必须有专人陪 同，并填写出入记录。
2、除本部门以外人员必须穿戴好白大褂、更换鞋，才能进入无菌室。
3、无菌室内无人做实验，必须保持门锁闭，其他人进入必须与无菌室保管人员申请。 4、除本部门以外人员在无菌室操作，必须严格执行无菌室各项管理制度，否则接受成 长赞助每项5元。
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七、无菌室蒸汽灭菌锅安全使用
1、注意用电安全，锅内水位要在
标准
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水位以上方可通电使用。 2、锅内带灭菌物品不得超过灭菌锅容积的2/3。 3、灭菌过程中工作人员不得长时间离开，如果因工作需要室内有班组其他工作人员，
要予以提醒，并做好看护，以防烫伤。
4、灭菌完毕后要缓慢放气，必须在压力表的指针回到“0”以后，放气阀完全打开，待
锅内蒸气放尽后，方可开盖。
5、灭菌锅的压力表按时送检。
目录
1. 无菌室的使用
2. 无菌室的准备工作及要求
3. 无菌室操作过程注意事项
4. 无菌室管理规定
5. 无菌室菌种管理规定
6. 无菌室外来人员管理规定
7. 无菌室蒸汽灭菌锅安全使用
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