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磺酰罗丹明B蛋白染色法

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磺酰罗丹明B蛋白染色法sigmas9012-5G磺酰罗丹明B蛋白染色法（SulforhodamineB,SRB）［实验原理］SulforhodamineB是一种蛋白结合染料，可于生物大分子中的碱性氨基酸结合，其在515nm的OD读数与细胞数呈良好的线性关系，故可用作细胞数的定量。［主要试剂］SulforhodamineB购自sigma（s9012）三氯醋酸（TCA）、醋酸购自国药，分析纯Trisbase购自Promege［实验材料］SY5Yneo（空载，来源：北京）P+17-P+20代［样品资料］++化合物编号分子量溶解介质33...

磺酰罗丹明B蛋白染色法

sigmas9012-5G磺酰罗丹明B蛋白染色法（SulforhodamineB,SRB）［实验原理］SulforhodamineB是一种蛋白结合染料，可于生物大分子中的碱性氨基酸结合，其在515nm的OD读数与细胞数呈良好的线性关系，故可用作细胞数的定量。［主要试剂］SulforhodamineB购自sigma（s9012）三氯醋酸（TCA）、醋酸购自国药，分析纯Trisbase购自Promege［实验材料］SY5Yneo（空载，来源：北京）P+17-P+20代［样品资料］++化合物编号分子量溶解介质3311a274DMSO33222558DMSOPE-13536DMSO［样品处理］样品于2011-1-8用DMSO配成浓度为10mM。［实验步骤］SY5Yneo细胞经胰蛋白酶消化后，悬于含10%胎牛血清（FBS）的。MEM（高糖）培养液中。以1.5x105cells/ml的密度将SY5Yneo细胞接种于96孔培养板上，接种体积为100皿/孔，置于含5%CO2的37°C恒温培养箱内培养。SY5Yneo细胞培养24小时后，HO模型：将各组的培养液均换成含FBS血清的22新鲜DMEM（高糖）培养液；A0模型：将各组的培养液均换成无血清的新鲜DMEM(高糖)培养液。在给药组中加入相应浓度的待测化合物(10Rl/well),终浓度为10-5M。孵育2小时后，在给药组与H2O2损伤组中分别加入H2O2(10Rl/well)，终浓度为200rM；在给药组与H2O2损伤组中分别加入AP25-35(10Rl/well)，终浓度为1rM。7加入用1%冰醋酸配置的4mg/mlSRB溶液100以/孔，室温染色15分钟。染色后倾去上清液，用1%冰醋酸洗涤5次，空气中干燥(同前)。8加入150Rl/well的10mM的Tris液，摇匀测板，515nm处OD值。

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