一起猪牛急性死亡病例的诊断与分析

对1头发病死亡耕牛进行剖解病变观察,主要表现为：肝一起猪牛急性死亡病例的诊断与 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 中图分类号:S858.28;S858.23文献标识码:B文章编号：1007-273X(2010)01-0029-02黔西县林泉镇韦寨村3组有10户人家,从2003年4月到2009年7月共死亡耕牛24头，猪近20头。死亡耕牛多在4〜10月发生,耕牛死前症状相似,且一般在较为封闭的圈内饲养。耕牛发病后,主要症状为不食草料、不愿走动、四肢无力、肌肉颤抖、口有白沫和神经症状等;多数耕牛发病后迅速倒地死亡，少数病例病程稍长，可达到12h;耕牛死后尸僵正常。同户饲养的猪也有死亡现象,主要表现为兴奋、不吃饲料、皮肤发红等,而家禽无异常现象。为查清死亡原因,我们对送检的猪血清样本12份、牛血清样本13份及相应血推片、1头病死牛脏器病料等样品进行了一系列化验,现将诊断情况介绍如下。病理剖检观察情况脏表面散布较多的坏死结节灶;肠内容为黑绿色,散发出恶臭味。实验室诊断情况送检猪牛血样的实验室 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 血推片染色镜检:将送检的猪血推片和牛血推片分别进行姬姆萨氏染色和瑞氏染色后,于光学显微镜下观察,未发现血液原虫。血清样本抗体检测:根据流行病学与临床症状特征,对送检猪血清样本主要进行了猪伪狂犬病(PR)和猪乙型脑炎(JE)抗体的检测。采用的试剂盒是猪伪狂犬病乳胶凝集试验(LAT)诊断试剂盒和猪乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒购自武汉科前生物技术有限公司;检测方法和结果判定按照试剂盒说明书进行。检测结果见表1。由表1可见,该自然村猪群存在不同程度的猪伪狂犬病和猪乙型脑炎感染,其感染抗体的阳性率分别达到25.0%和33.3%。由于目前实验室没有检测牛伪狂犬病和乙型脑炎的抗体检测试剂盒,因此本次未对牛血清样本进行检测。送检牛组织病料的实验室诊断肠黏膜寄生虫检查。取送检病死牛的肠黏膜进行触片,于光学显微镜(40X)下观察，可见到蛔虫和肝片吸虫等寄生虫的虫卵。送检脑组织病原检测。PCR检测:取送检牛脑组织,加入适量灭菌生理盐水,研磨成匀浆,10000r/min离心10min,收集上清液，采用SDS-蛋白酶K法提取DNA样本,以针对猪伪狂犬病病毒(PRV)gD基因引物进行PCR扩增,结果见图1。动物接种试验:分别取牛脑组织匀浆液0.1mL和0.2mL,腹腔注射两只健康小白鼠。小白鼠于注射后呈现短暂的兴奋症状,但不久可恢复正常。细菌分离鉴定细菌分离培养。用接种环取送检牛肝、脾和肠内容物划线接种于鲜血琼脂平板,分别进行需氧和厌氧培养,24h培养后肝和肠内容物病料均能生长出三种不同的菌落:一是灰白色、圆形、湿润、边缘整齐、凸起、溶血的菌落,染色镜检为G+球菌;二是灰白色、湿润、边缘整齐、凸起、不完全溶血的菌落，染色镜检为G-球杆菌；三是白色、湿润、边缘整齐、凸起、完全溶血的菌落,染色镜检为G-小杆菌。⑵细菌分离物鉴定。①G+球菌的鉴定：用煮沸法提取G+球菌分离物的DNA样本,分别以针对链球菌和葡萄球菌的特异性引物进行PCR扩增,结果未扩增出链球菌特异性DNA片段,但可见到葡萄球菌的特异性DNA片段，即可判定该G+球菌分离物为葡萄球菌。②G-球杆菌的鉴定：取G-球杆菌分离物接种麦康凯培养基,培养24h未见细菌生长;可发酵葡萄糖、麦芽糖和乳糖,不分解菊糖、鼠李糖和尿素,不产生靛基质和硫化氢,不液化明胶,能还原硝酸盐,结合菌体形态和培养特性初步判定为溶血性巴氏杆菌。③G-小杆菌的鉴定：取G-小杆菌分离物接种麦康凯培养基,培养24h后可见生长出粉红色小菌落;生化试验结果显示,该分离菌在尿素、西蒙氏枸橼酸盐、硫化氢试验中均为阴性,而对氧化酶试验呈阴性;取该菌分离物与沙门氏菌属A-F多价血清进行玻片凝集试验,结果为阴性。综上所述，即可判定该G-小杆菌为大肠杆菌。细菌动物接种试验。取上述3种细菌的纯培养物各0.2mL,以腹腔注射法接种到健康小白鼠体内，24h后大肠杆菌组和葡萄球菌组小白鼠即可见明显的临床症状,如视觉模糊、精神不振、不愿走动、厌食等；36〜48h后大肠杆菌组小白鼠发生死亡,并能从死亡鼠肺、肝和腹腔中分离到大肠杆菌,即可判定该细菌为致病性大肠杆菌。连续观察5d,葡萄球菌组小白鼠虽有精神委顿等症状，但不发生死亡；而溶血性巴氏杆菌组小白鼠无明显的临床表现,也不发生死亡现象。细菌分离物药敏试验。取致病性大肠杆菌的纯培养物进行抗生素敏感性试验,结果见表2。结果与分析(1)从送检猪血清样本的实验室检测结果来看,该自然村猪群存在不同程度的猪伪狂犬病和猪乙型脑炎感染,其感染抗体的阳性率分别达到25.0%和33.3%(该村养猪户从未免疫过猪伪狂犬病和猪乙型脑炎疫苗)。但由于武汉科前生物技术公司生产的检测试剂盒不能检测牛伪狂犬病和牛乙型脑炎抗体,因此目前还不能判定牛群是否存在上述两种疫病的感染。伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起多种家畜的一种急性传染病。感染猪主要表现为母猪流产、产死胎及公猪睾丸肿胀等繁殖障碍,新生仔猪大量死亡和哺乳仔猪拉稀、呕吐和神经症状。感染牛主要表现为局部皮肤瘙痒,体温升高;病情加深时可见麻痹、呼吸困难、磨牙吼叫等症状;部分牛发病后数小时死亡,不表现奇痒症状。乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的一种人畜共患病。猪感染后主要表现为体温升高呈稽留热,精神沉郁,食欲减少,饮欲增加;有的病猪可见视力障碍、乱冲乱撞,最后后躯麻痹,倒地而亡;母猪妊娠后期流产和新产仔猪发生痉挛。牛感染后主要表现为发热、食欲废绝、磨牙呻吟、转圈运动、四肢僵直等，病程少则1〜2d,多则10〜15d。（2）根据送检病死牛组织病料的实验室检测结果,该村死亡牛感染有致病性大肠杆菌、葡萄球菌和溶血性巴氏杆菌,同时还有蛔虫、肝片吸虫等寄生虫的感染,但主要病原还是致病性大肠杆菌和葡萄球菌。由于送检的病死牛在死前没有发现神经症状,与该村自2003年4月以来发生的病牛症状不尽一致。经对其脑组织进行伪狂犬病病毒核酸的PCR检测后,结果亦未检出伪狂犬病病毒的特异性DNA片段,即可判定该病死牛不是牛伪狂犬病病毒感染所致。（3）根据该村居民讲述和三下乡的调查 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 ,该村耕牛死前大多表现出相同的神经症状,如极度兴奋、乱冲乱撞、肌肉震颤和后躯无力等，且病程较短（1〜5h）。能引起牛发生神经症状的病原较多,有病毒（如伪狂犬病病毒、乙型脑炎病毒、朊病毒等）、细菌（如A型产气荚膜梭菌、产单核细胞李氏杆菌、致病性大肠杆菌等）和寄生虫（如新孢子虫、旋毛虫、弓形虫等）。一般来说,新孢子虫、旋毛虫、弓形虫等寄生虫可寄生于牛脑组织内而引起神经症状,但一般不会发生急性死亡;朊病毒引起的牛海绵状脑病（疯牛病）在我国尚未见到报道,且该村耕牛来源和饲料种类等不具备朊病毒传播的可能性。因此,可以排除寄生虫病和牛海绵状脑病。建议综上分析,引起黔西县林泉镇韦寨村3组近年来猪牛发病死亡的主要病原,可能是伪狂犬病病毒、乙型脑炎病毒、A型产气荚膜梭菌、产单核细胞李氏杆菌、致病性大肠杆菌等。因此,建议:(1)定期对该村的猪牛实施伪狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗和A型产气荚膜梭菌菌苗的免疫接种，以预防伪狂犬病、乙型脑炎和A型产气荚膜梭菌病。定期采用敏感的抗生素如磺胺嘧啶钠、氨苄青霉素、头孢菌素等对该村猪牛进行注射,以预防产单核细胞李氏杆菌病和大肠杆菌病。加强饲养管理,严格消毒 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 ,适时驱鼠灭蚊和清除猪牛体内外寄生虫,科学处理病死猪牛,防止病原体在该村的存在与传播。