胶体金组研发思路第一页，共18页。●明确对象●检测方法-胶体金法●胶体金的制备●标金过程●试纸条的组成●性能评估●投入市场目录第二页，共18页。1明确对象第三页，共18页。猪瘟犬细小犬瘟第四页，共18页。猪瘟病毒是猪瘟的病原,主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。临床
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现：最急性型：发病急，高热稽留，痉挛，抽搐，皮肤和可视粘膜发绀，有出血点，很快死亡。急性型和亚急性型：高热，精神沉郁，食欲减退，初便秘，后腹泻，公猪包皮积液，离心端有出血点或红斑不褪色，少数神经症状，死亡率高。慢性型：食欲时好时坏，体温时高时低，便秘与腹泻交替进行。耳尖、尾根和四肢皮肤经常发紫坏死，甚至干脱,消瘦，全身衰竭，后肢麻痹，行走不稳或不能立。繁殖障碍型（母猪带毒综合症）：早中期感染，母猪流产、死产、木乃伊胎等；孕后期感染，外表正常，仔猪也终身带毒，免疫耐受（不产生免答）。猪瘟第五页，共18页。2检测方法-胶体金法第六页，共18页。不同环境下的稳定性好、易保存、运输，在室温下可长期保存，不需冷藏。1操作简便、易于肉眼观察结果，不需经过特殊复杂培训，操作者安全，对环境无污染。2操作快速、短时间获得检测结果，一般10—15分钟即可得出结论，便于大批量筛查，取量少，检测成本均较低，无需特殊仪器。3适用范围广泛，检测标本种类多，可用于查血、尿液或粪便，因而适合各种检查。特异性较强、结果有可重复性。4第七页，共18页。3胶体金的制备第八页，共18页。胶体金的制备并不难，但要制好高质量的胶体金却也并非易事。因此对每次制好的胶体金应加以检定，主要检查指标有颗粒大小，粒径的均一程度及有无凝集颗粒等。采用化学还原法制备胶体金时，通过改变反应体系中氯金酸与还原剂的比例（增加或减少还原剂的量）可得到所需不同直径的金颗粒。要还原材料：氯金酸（HAuCl4）所用还原剂：柠檬酸钠还原制备金溶胶第九页，共18页。标金过程4第十页，共18页。复溶PH蛋白封闭液离心调试胶体金的标记第十一页，共18页。pH：在pH接近和稍高于蛋白质的等电点时,胶体金蛋白质的吸附力最强;pH过高过低都不利于两者的结合,因此标记时选择精密的酸碱度测定仪器或者试纸条,采用不同方法重复校正,并进行梯度试验找到最佳的标记pH。蛋白：过多蛋白质标记,造成浪费的同时引起试纸的拖带现象;过少蛋白质标记,导致胶体金标记不完全,从而降低试纸的灵敏度及假阳性现象的出现。也需要在试验中进行梯度试验,反复比较不同标记量的标记物在破坏试验中的稳定性,确定最佳的标记量。第十二页，共18页。5试纸条的组成第十三页，共18页。检测线质检线吸收垫样品垫硝酸纤维素膜连接垫（胶体金垫）背衬（底板）第十四页，共18页。6性能评估第十五页，共18页。性能评估从3个重复批次的试纸条中分别随机抽取一定数量试纸条，分别测试阴性检测液和阳性检测液，考察每一批次试纸条的线条是否均一、颜色深浅是否相当、检测结果是否一致。将制作好的试纸条放入密封袋内，内置干燥剂片，置于45"C烘箱内，分别于第7天、第14天、第21天、第28天、第35天、第42天取出，测试试纸条的稳定性。重复性测试稳定性测试(加速老化试验）特异性测试特异性检验是正确认识试剂盒对结构类似物抗干扰能力的指标。第十六页，共18页。7投入市场第十七页，共18页。谢谢聆听！THANKYOUVERYMUCH!第十八页，共18页。
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