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几种常用的染色方法

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几种常用的染色方法---word.zl-几种常用的染色方法1.美蓝染色法   在已枯燥、固定好的抹片上,滴加适量的美蓝染色液,经1—2min,水洗,沥去多余的水分,吸干或烘干,镜检。2.革兰氏染色法  〔1〕在已枯燥、固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色液,经1—2min,水洗。〔2〕加革兰氏碘溶液于抹片上媒染,作用1—3min,水洗。〔3〕加95%酒精于抹片上脱色,约30s---1min,水洗。〔4〕加碱性复红液〔或沙黄或稀释石炭酸复红液〕复染10---30s,水洗。〔5〕吸干或烘干,镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色...

几种常用的染色方法
---word.zl-几种常用的染色方法1.美蓝染色法   在已枯燥、固定好的抹片上,滴加适量的美蓝染色液,经1—2min,水洗,沥去多余的水分,吸干或烘干,镜检。2.革兰氏染色法  〔1〕在已枯燥、固定好的抹片上,滴加草酸铵结晶紫染色液,经1—2min,水洗。〔2〕加革兰氏碘溶液于抹片上媒染,作用1—3min,水洗。〔3〕加95%酒精于抹片上脱色,约30s---1min,水洗。〔4〕加碱性复红液〔或沙黄或稀释石炭酸复红液〕复染10---30s,水洗。〔5〕吸干或烘干,镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。3.抗酸性染色法〔1〕在已枯燥、固定好的抹片上,滴加较多量的石炭酸复红染色液,在玻片下以酒精灯火焰缓缓加热,至发生蒸汽即止,维持微微发生蒸汽,经3—5min,水洗。〔2〕用3%盐酸酒精脱色,直至标本无色脱出为止,充分水洗。〔3〕用美蓝染色液复染约1min,水洗。〔4〕吸干或烘干,镜检。抗酸性细菌呈红色,非抗酸性细菌呈蓝色。以下方法也可:即在枯燥、固定好的抹片上,滴加石炭酸复红染色1min,水洗,用1%美蓝染色液复染约20s,水洗。对光观察,标本务必全呈蓝色,在火焰上烘干、镜检。抗酸性细菌呈红色,非抗酸性细菌和背景呈蓝色。4.瑞氏染色法〔1〕抹片自然枯燥后,滴加瑞氏染色液于其上,为了防止很快变干,染色液可稍多加些,或看情况补充滴加,经1—3min,加约与染液等量的中性蒸馏水或PBS液,轻轻晃动玻片,使与染液混匀,约3min左右,直接用水冲洗〔不可先将染液倾去〕,吸干或烘干、镜检。细菌染成蓝色,组织、细胞等物呈其它颜色。〔2〕另一方法 抹片自然枯燥后,按涂抹点大小,盖上一块略大的清洁滤纸片,在其上轻轻滴加染色液,至略浸过滤纸,并看情况进展补滴,维持不使变干;染色3--5min,直接用水冲洗,吸干或烘干、镜检。此法使染色液经滤纸过滤,可大大防止沉渣粘附于抹片上影响镜检观察。5.姬姆萨染色法〔1〕于5ml新煮过的中性蒸馏水中滴加5—10滴姬姆萨氏染色液原液,即稀释成为常用的姬姆萨氏染色液。〔2〕抹片经甲醇固定枯燥后,在其上滴加足量的染色液或将抹片浸入盛有染色液的染色缸中,染色30min,或者染色数小时至24h,取出水洗,吸干或烘干、镜检。细菌呈蓝青色,组织、细胞等呈其它颜色。视野常呈淡红色。6.克利特氏荚膜染色法〔1〕染色液配制①美蓝溶液 美蓝1g,95%酒精10ml,蒸馏水100ml。将美蓝溶于酒精内,再加蒸馏水混合。 ②碱性复红溶液 碱性复红0.03g,95%酒精1ml,蒸馏水99ml。将碱性复红溶于酒精内,再加蒸馏水混合。〔2〕染色法①涂片经火焰固定后,滴加美蓝溶液,将玻片至火焰上面加热至发生蒸汽为止。②水洗,以碱性复红溶液复染15—30s。 ③水洗后、吸干、镜检。④染色后,菌体呈蓝色,荚膜呈红色。 7.结晶紫福尔马林荚膜染色法 〔1〕染色配制 ①结晶紫福尔马林染色液 结晶紫10g,福尔马林溶液100ml。混合使其完全溶解,隔夜过滤。②碱性复红溶液 见前:克利特氏荚膜染色法〔2〕染色法①涂片用结晶紫福尔马林染色液染色0.5—1min。 ②水洗后,以碱性复红染色液复染15—30s。 ③水洗、吸干、镜检。④染色后,菌体呈深蓝色,荚膜呈淡红色。 8.番红染色液荚膜染色法 〔1〕染液配制 番红〔或沙黄〕0.7g,95%酒精20ml,蒸馏水15ml。 将番红溶解于酒精内,再加蒸馏水混合而成。〔2〕染色法①涂片滴加番红染色液,将玻片置火焰上加热至发生蒸气约5min。 ②水洗、吸干、镜检。③染色后,菌体呈暗红色,荚膜呈淡黄色。 9.赫斯氏荚膜染色法 〔1〕染色液配制  ①龙胆紫酒精溶液  龙胆紫酒精饱和液5ml,蒸馏水95ml。 ②硫酸铜水溶液  硫酸铜20g,蒸馏水100ml。 〔2〕染色法 ①涂片加热固定,将龙胆紫酒精溶液滴加于玻片。将玻片置火焰上微加热至见蒸气并保持蒸气约20min。 ②用硫酸铜液代替水冲洗染液,用吸水纸吸干、镜检。 ③染色后,菌体呈深紫色,荚膜呈浅蓝色。 10.安沙尼氏荚膜染色法 〔1〕染色液配制①1%结晶紫水溶液。②20%硫酸铜水溶液。 〔2〕染色法①将涂片在空气中自然枯燥。 ②以1%结晶紫水溶液染色2min〔不必加热〕,再以20%硫酸铜代水冲洗染液。③吸干、镜检。 ④染色后,菌体呈紫色,荚膜呈淡紫色。 11.苗列尔氏芽孢染色法 〔1〕染色液配制 ①媒染液 5%铬酸液〔铬酸5ml,加蒸馏水95ml〕 ②染色液 石炭酸复红液 ③脱色液 2%硫酸液〔纯硫酸2ml,加蒸馏水98ml〕④复染液碱性美蓝〔2〕染色法 涂片,枯燥,火焰固定,用媒染液染色10min,充分水洗,用炭酸酸复红液加温染色〔最好在标本上覆盖一X滤纸〕2min,水洗,用脱色剂脱色10s,水洗,用美蓝液复染1min,水洗,枯燥、镜检。  结果:芽孢呈红色,菌体呈蓝色。12.孔雀绿沙黄芽孢染色法〔1〕染色液 5%孔雀绿液,0.5%沙黄液。〔2〕染色法涂片火焰固定,加5%孔雀绿液微微加温染色30s—1min,至发生蒸气为止,待冷后水洗,再加沙黄液复染30s,水洗,枯燥后镜检。结果:芽孢呈绿色,菌体其它局部呈淡红色。13.李富逊氏鞭毛染色法〔1〕染色液配制  5%钾明矾水溶液10ml,20%鞣酸水溶液10ml,1%碱性复红酒杯精溶液10ml。将上述三种溶液按次混合配成,如发生沉淀,用其上清液,本染液保存1周,复染液可用以下染液:美蓝0.1g,硼砂0.5g,蒸馏水100ml。〔2〕染色法①所用的载玻片必须十分清洁无油脂、无划痕。可将玻片先浸于重铬酸钾清洁液数天,用镊子取出后以清水冲洗干净〔冲洗时切勿用手捏玻片〕,然后斜插于木架上,置37度温箱中任其枯燥后备用。 ②菌液最好用10—16h的幼年肉汤培养物。假设取自琼脂培养基上的菌落,那么用接种环挑取少许,置蒸馏水中制成轻度混浊的细菌悬液,切忌用接种环多作搅动,以免损伤鞭毛。 ③挑取肉汤培养物或细菌悬液一环,轻置于玻片一滴,玻片作倾斜放置,使菌液沿玻片面顺向下流,自成一薄菌膜,置37度恒温箱内枯燥。 ④将上述染液滴加于涂片上,染10—15min,染色时间的长短随室温的上下而不同,如在冬季,可置于37度温箱内染色。⑤轻轻地水洗1—2min。 ⑥在室温或37度温箱内任其枯燥后作镜检,细菌菌体及鞭毛呈红色。 ⑦如需复染色,那么用上述美蓝硼砂复染液在水洗后,染色10min,用水冲洗,枯燥后作镜检。菌体呈蓝色,鞭毛呈红色。 ⑧良好的鞭毛染色涂片,应在显微镜的视野中见到大局部细菌菌体均附有鞭毛。 14.过碘酸锡夫氏真菌染色法〔1〕染色液配制    甲液:1%过碘酸液    乙液:碱性复红0.1g,95%乙醇5ml,蒸馏水95ml    丙液:亚硫酸氢锌1g,酒石酸0.5g,蒸馏水100ml 丁液:1.22%饱和苦味酸液 〔2〕染色法 将标本在甲液中染10min,水洗后再用乙液染2—3min,置丙液中染30—40min,至玻片呈淡红色为适宜,水洗1min,再置于丁液中染3min。充分水洗至无黄色液体为止。脱水、透明,树胶封固后镜检。 结果:真菌组织染色鲜红色。 15.中国蓝真菌染色法〔1〕染色液  纯石炭酸20ml,乳酸20ml,甘油40ml,蒸馏水20ml。将上述成分混合,加温溶解后参加中国蓝0.05g,混合振荡即成。〔2〕染色法先将染色液加在载玻片上,将培养物被检样放在玻片上的染色液中,涂匀后覆盖盖玻片,微加温后镜检。16.黑色素螺旋体染色法〔1〕染色液配制 黑色素5g,蒸馏水50ml。混合加热使其溶解,在溶液中加1%福尔马林作防腐剂,临用前过滤。〔2〕染色法 取被检物一滴,墨汁一滴混合后涂片,室温下放枯燥后镜检。结果:螺旋体无色发亮,背景呈黑色。17.墨汁螺旋体染色法〔1〕染色液 印度墨汁5ml,蒸馏水20ml,震荡混合而成。〔2〕染色法 取被检物一滴,墨汁一滴混合后涂片,室温下放枯燥后镜检。结果:螺旋体无色发亮,背景呈黑色。 
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从事建筑施工管理与质量安全、方案设计、可行性研究报告
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分类:教育学
上传时间:2021-09-23
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