实验13细菌的生理生化实验
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实验13细菌的生理生化实验
实验十二 细菌的生理生化反应
实验目的 巩固微生物无菌接种技术; 证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力
不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统;
掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。
微生物的生理生化反应
微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生
化反应
把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生
理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢
过程和代谢的特点 由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径 和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生
物分类鉴定的重要指标之一。
• 微生物的胞外酶(如淀粉酶、脂肪酶等) 将大分子物质的分解过程可以通过观察细 菌菌落周围的物质变化来证实。
器材
• 1(菌种:土壤分离菌株。 • 2. 培养基:固体淀粉培养基，明胶培养 基试管，石蕊牛奶试管 • 溶液或试剂:革兰氏染色用卢戈氏碘液 • 仪器或其他用具:无菌平板，无菌试管 ，接种环，接种针，试管架。
淀粉水解实验
淀粉培养基 淀粉培养基
接种
+
+
培养24h
变色圈，水解圈 加卢哥氏碘液 I-KI
+
结果: 有水解圈—淀粉水解实验阳性，用 + 表示; 无水解圈—淀粉水解实验阴性，用 - 表示;
明胶液化实验
明胶培养基
接种
明胶培养基
培养24h
结果观察
结果观察
• 培养1，3，5。在20?以下的室温观察生长情 况和明胶是否液化。如菌已生长，明胶表面无 凹陷且为稳定的凝块(则为明胶水解阴性。 • 如明胶凝块部分或全部在20?以下变为可流动 的液体，则为明胶水解阳性。如菌已生长，明 胶末液化，但明胶表面菌苔下出现凹陷小窝(须 与末接种的对照管比较，因培养过久的明胶因 水分失散也会凹陷)也是轻度水解，按阳性
记录
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。若细菌未生长(则或是不在明胶培养基上生 长，或是基础培养基不适宜。
牛奶分解
• 石蕊牛奶试验 • 接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于 石蕊牛奶培养基中，置于35?培养24, 48h后观察培养基颜色变化情况。石蕊在 酸性条件下为粉红色，碱性为紫色，而 被还原时为白色。
实验报告
• 将结果添入下表，“+”表示阳性，“-”表示阴性
菌名 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 普通变形杆菌 淀粉水解试 验 明胶液化试 验 石蕊牛奶试 验
思考题
• 1(你怎样解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶 , • 2(不利用碘液，你怎么证明淀粉水解的
存 在? • 3(接种后的明胶试管可以在35?培养，在 培养后你必须做什么才能证明水解的
存在 , • 4(解释在石蕊牛奶中的石蕊为什么能起到 氧化还原指示剂的作用,
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