电化学发光原理
诊断科学的进步使可以检测的项目与确认疾病的标志物的范围都扩大了。为了使实验室的服
务具有竞争力，必须使用耗费合理、结果准确的诊断产品。
电化学发光免疫测定（Electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA）是继放免、酶免、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术，是电化学发光（ECL）和免疫测定相结合的产物。
以TSH为例：
第一步：
结合了活化的三联吡啶钌衍生物即[Ru(bpy)3]2+ + N羟基琥珀酰胺酯（NHS）的TSH抗体和结合了生物素的TSH抗体与待测血清同时加入一个反应杯中，孵育9分钟。
第二步：
将被链霉亲和素包被的磁珠加入反应杯中，再次孵育9分钟，使生物素通过与亲和素的结合
将磁珠、TSH抗体连接为一体，形成双抗体夹心法。
下一步，蠕动泵将形成的[Ru(bpy)3]2+－抗体－抗原－抗体－磁珠复合体吸入流动测量
室，此时，磁珠被工作电极下面的磁铁吸附于电极
表
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面。同时，游离的TSH抗体（与生物素结合的和与[Ru(bpy)3]2+结合的抗体）也被吸出测量室。紧接着，蠕动泵加入含三丙胺（TPA）的缓冲液，同时电极加电压，启动ECL反应过程。发光剂[Ru(bpy)3]2+和电子供体TPA在阳极表面可同时各失去一个电子而发生氧化反应，使二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价，后者是一种强氧化剂；另一方面，TPA 被氧化成阳离子自由基TPA+?，后者很不稳定，可自发失
去一个质子（H+），形成自由基TPA?，这是一种很强的还原剂，可将一个电子给三价的
[Ru(bpy)3]3+，使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+，而TPA自身被氧化成二丙胺和丙醛。激发
态的[Ru(bpy)3]2+通过荧光机制衰减，发射出一个波长620nm的光子，重新生成基态的
[Ru(bpy)3]2+。该过程在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，光电倍增管检测光强度，
光强度与[Ru(bpy)3]2+的浓度呈线性关系，故可测出待测抗原的含量。
最后，终止电压，移开磁珠，加入清洗液冲洗流动测量室，准备下一个样品测定。
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