ELISA实验通用规则
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
12、底物是光敏感的,要在临用前现配。
13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
酶联免疫吸附试验(ELISA)因其方法灵敏、特异、操作简便等优点,自上世纪80年代中期
以来,一直是我国医学实验室检测感染性疾病特异抗原、抗体最为常用的方法,并且其今后仍然会是我国基层实验室的主流免疫检测技术。常规ELISA检测操作通常涉及到试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果分析判断及报告等方面,这些关键环节相互关联,任一关键环节的操作不当都会直接影响到测定结果,尤以加样、温育和洗板等步骤为甚,这其中还涉及到实验室质量管理如实验室温湿度控制、仪器设备日常有效的维护等。
在我国的医学实验室,ELISA测定通常为手工操作,由于不同操作者对上述关键环节的把握有差异,因而不同的操作者之间结果有时差异较大,
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
现为测定的批间变异在不同的操作者及不同的实验室间差异明显,这种差异对于临床强阳性或阴性样本影响不大,但弱阳性样本则极易发生漏检。
自动化检测系统的应用始终是医学实验室所追求的,显然其会避免手工操作带来的重复性和准确性差的问题,自从上世纪90年中后期以来,全自动加样系统和全自动酶免分析系统在医学实验室得到了推广应用,尤以采供血机构实验室最为普遍。但在实际应用中,仍然存在超时温育、洗液污染、仪器设备维护不到位、编程不合理等而导致检测结果失准的问题。
医学实验室管理经历了经验管理、质量检验管理、统计质量管理、全面质量管理等阶段,全面质量管理以ISO15189标准为标志,但现在已经发展到“标准化+全面质量管理”的时代,因为仅有质量管理,没有标准化仍然难以避免检验结果在准确性和重复性上存在的问题,也难以实现卫生部要求的实验室之间结果互认的要求。
医学实验室常规检验的标准化不仅是一个测定系统或试剂的量值溯源,其还涉及到临床标本的采集运送和保存、检测系统或试剂的性能验证、检测程序、仪器设备的维护和校准、结果的
分析报告
成本分析报告下载顾客满意度调查结果及分析报告员工思想动态分析报告期中考试质量分析报告高一期中考试质量分析报告
和解释等的标准化,对ELISA这种“价廉物美”的测定在医学实验室的应用,在借助必要的自动化分析仪器设备的基础上,进行标准化,将极大地提高其对临床疾病诊疗的有效性,并大大降低患者的医疗费用,为建设和谐社会贡献力量。