D2聚体胶体金法SOP
胶体法测定,,二聚体的
标准
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操作程序
1 目的:保证胶体金方法测定,,二聚体的正确操作,保证检验结果的准确可靠。 2 适用范围:临床血液实验室
3 项目名称:胶体金方法测定D-二聚体
4 项目方法:免疫渗滤法
5(原理: 基于免疫渗滤试验原理,•将血浆加入检测卡孔内,•样品中D-Dimer与膜上D-Dimer单抗结合,然后加入与胶体金偶联的D-Dimer单克隆抗体,形成抗体(胶体金标记),抗原,抗体复合物,过剩偶联单抗用洗涤液洗去。二分钟内检测膜出现不同红色。色泽强度可用比色卡进行
评价
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,也可用读数仪进行读数。
6(试剂:
6(1 来源:挪威AXIS-SHIELD产品
6(2 规格:48人份
6(3 代号:
6(4 试剂组成:检测卡、洗涤液R2、偶联抗体反应液R2、阳性质控品、判读比色卡(0.3-8 mg/L D-Dimer 5个浓度水平)
6(5 存和稳定性: 4?储存,在有效期内使用。
6(6 试剂的准备和稳定性:
6(6(1 试剂盒已配套包装,不能拆分,直接使用。
6(6(2 试剂使用前应人工开盖,使用结束后应将试剂盖盖紧,放于4?冰箱保存。 6(7 注意事项:试剂中含有0.1%叠氮钠作为防腐剂系毒性物质,操作时应加以小心。不同批号的产品不能混用。
6(8 废物处理:患者标本及阳性质控品应当作传染源处理,高压灭菌后交后勤保障部处理;所有试剂消毒浸泡后交后勤保障部处理。
6(9物安全级别:按?级执行。
7(其它辅助用品:移液器,枪头
8(分析前处理:
8(1 病人准备:要求患者在安静状态下;晨起的精神、体力、情绪等因素的影响较小,是标本采集的最佳时间;抽取肘部静脉血。
8(2 标本种类:枸橼酸钠抗凝血2ml。
8(3 标本稳定性: 注射器、采血管要干燥洁净,以避免溶血。
8(4 标本稀释:无需稀释。
8(5 标本容器:一般用真空采血管中的枸橼酸钠抗凝管(淡兰色头盖)。 8(6 标本最小用量:50μl。
8(7 标本运送:标本采集于真空采血管后应尽快送实验室分析,物流系统可加快标本传递速度。若标本不能及时转运到实验室或标本将送到上级部门或检测中心进行分析,应将真空采血管内的标本置冰瓶或冷藏箱内运输,运送过程中应避免剧烈震荡。 9(仪器:
10(质控:
10(1 阳性质控品: 主要是纤维蛋白的降解产物与小牛血清白蛋白的缓冲液及稳定剂。 10(2 每天应做质控,质控值为2.5?1.1 mg/L.
10(3 操作: 同
样本
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操作。
10(4 分析:质控结果应在质控品所附的允许范围内,不能超过质控范围,失控应在《失控
分析记录本》上进行失控分析。
10(5 记录:质控结果应记录在《免疫室室内质控原始记录本》上。
11(操作步骤:
11(1 先在检测卡的反应孔下写上标记号,患者或质控品各操作步骤应连续进行,不可延迟。 11(2 于试管内加入109 mmol/L枸橼酸钠溶液0.2 ml,•然后加入受检血液1.8 ml,混匀,高速离心15分钟,分离血浆。
11(3依如下次序将反应物逐一加入反应孔。(每一溶液加入需待前一溶液完全渗滤后进行) 洗涤液 50μl
血浆 50μl
偶联液 50μl
洗涤液 50μl
11(4检测结果须在洗涤液完全吸入检测卡之后2分钟内立即判读。
11(5 使用NycoCard读数仪(测量范围 0.1-20.1 mg/L):按