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激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 作者 刘亦斌
摘要
目的:掌握血糖的测定原理及方法，掌握血糖的正常范围及意义，熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响及并解释其作用机制。
方法:采用邻甲苯胺法测血糖浓度
结果:
结论:胰岛素会使血糖浓度降低，肾上腺素会使血糖浓度升高。
关键字:胰岛素、肾上腺素、血糖浓度
正文
前言:正常情况下，血糖浓度在各种因素调解下，维持相对恒定，但是现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症，目前并无良药可医，对于此种病当以预防为主。因此身为医学生，掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。
原理:所谓“血糖”就是指血液中的葡萄糖。空腹(即吸收后的状态)的血糖处于动态平衡:正常人在3.89~6.11mmol/L之间。空腹血糖水平的相对恒定，是在神经激素调解下血糖的来源和去路达到动态平衡的结果。调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。
肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体，通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶，同时抑制糖原合成酶，导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平，从而抑制肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成，阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散，促进糖的利用。
血液中的葡萄糖，在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。后者在与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色，即可求得待测血液中葡萄糖的含量。
本实验在于测量家兔注射肾上腺素或胰岛素前后的血糖水平变化。
材料:试剂
1肾上腺素(1mg/1ml)
2胰岛素(5单位/ml)
3碘酒,消毒酒精
4饱和硼酸溶液:取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中，摇匀，放置过夜后过滤，即可应用。 5邻甲苯胺试剂 :取冰醋酸(AR)940ml,加入硫脲(AR)1.5g，溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀，置棕色瓶中，室温保存。新配试剂应放置24小时后(待老化)使用。此试剂腐蚀性极强，应避免与皮肤接触而造成灼伤。
6(12mmol/L苯甲酸溶液
称取苯甲酸1.4g，加入蒸馏水900ml,加热助溶，冷却后加蒸馏水至1000ml。 7(葡萄糖标准贮存液(100mmol/L)
准确称取无水葡萄糖(预先置80?烤箱中干燥至恒重，移置干燥器中保存)1.802g,用12mmol/L苯甲酸溶液溶解，移至100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，摇匀，移入棕色瓶中，冰箱内保存。
8(葡萄糖标准应用液(5mmol/L)
准确吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml，置于100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度。
方法:1、动物准备:取正常家兔两只，实验前预先饥饿16小时，称体重(—般为2-3kg)。 2、注射激素前取血:—般多从耳缘静脉取血:剪去耳毛，用二甲苯擦拭兔耳，使其血管充
血，再用干棉球擦干，于放血部位涂一薄层凡士林，再用粗针头或刀片刺破静脉放血。
采用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法时，则将静脉血收集于干净试管中,静置至血清析出。
取血完毕，用干棉球压迫血管止血.
3、注射激素:—只兔子注射胰岛素;皮下注射，剂量为0.75U/kg体重。另一只兔子注射肾
上腺素:皮下注射，剂量为0.4mg/kg体重。分别
记录
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注射时间。
4、注射激素后取血:方法同上;取血时间:肾上腺素注射后30分钟;胰岛素注射后1小时。
从注射胰岛素的兔子取血后，应立即用10ml 250g/L葡萄糖做腹腔内或皮下注射，以防
家兔发生胰岛素休克(低血糖休克)。
5、测定血糖:分别测定各血样的糖含量，比较讨论之。
测定
1.三氯醋酸无蛋白血滤液的制备。取抗凝血0.4ml，放入一洁净小试管中，加入5%三
氯醋酸3.6ml，边加边摇使其充分混匀。3000rpm离心5分钟，取上清夜。
2.取试管8支，编号两套1234，按下表操作，分两次进行。
试剂ml\编号 空白管标准管药前(3) 药后(4)
(1) (2)
蒸馏水 1.0 _ _ _
标准葡萄糖应_ 1.0 _ _
用液
无蛋白血滤液 _ _ 1.0 _
(药前)
结论:2.3kg家兔2号管0.D=0.410 3号管0.D=0.369 4号管0.D=0.294
2.5kg家兔2号管0.D=0.407 3号管0.D=0.378 4号管0.D=0.456 讨论:胰岛素是唯一降低血糖的激素，其降低血糖是多方面作用的结果:1>促进肌,脂肪组织等的细胞膜GLUT将葡萄糖转运入细胞;2>通过增强磷酸二酯酶活性,降低cAMP水平,从而使糖原合酶活性增强,磷酸化酶活性降低,加速糖原合成,抑制糖原分解;3>通过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活,加速丙酮酸氧化为已酰CoA,从而加快糖的有氧氧化;4>降低磷酸烯醇式丙酮酸激酶mRNA水平,抑制肝内糖异生;5>抑制脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶,减缓脂肪动员。肾上腺素主要作用于肝,肌细胞膜受体，激活腺苷酸环化酶，将ATP变为cAMP，cAMP可激活依赖cAMP的蛋白激酶(PKA),一方面PKA使磷酸化酶b激酶磷酸化激活，激活的磷酸化酶b激酶可使磷酸化酶激活，糖原分解加快。另一方面PKA使糖原合酶磷酸化失活，抑制糖原合成。葡萄糖作为机体最主要的供能物质，它能维持机体正常的新陈代谢，它的含量稳定与否关系着整个生命，所以其调节机制至关重要。本实验主要验证了胰岛素和肾上腺素的作用。
参考文献
李萍 《妊娠糖代谢异常的研究》 《实用医学杂志》2006年22卷03期
江明礼 《食物血糖生成指数与糖尿病饮食治疗》《实用医院临床杂志》2006年3卷06期
浙公网安备 33021202002483