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粪链球菌概述
粪链球菌(streptococcus faecium)是目前专用的微生物青贮接种剂主要菌种之一, ，属兼性厌氧革兰氏阳性菌。它经过系列工艺制成的微生物制剂直接投喂养殖动物后, 有利于改善肠道内微生态平衡, 防治动物肠道菌丛区系紊乱, 有分解蛋白质为水肽、合成B 族维生素等功效。它能促进养殖动物的免疫反应, 提高抗体水平, 增强巨嗜细胞的活性。
一、粪链球菌的生物学性状
粪链球菌又叫粪肠球菌，其菌体形态为链球或球状，菌体直径大小0.3µm-0.7µm之间，无芽孢，稀释后在肉汤琼脂平板上形成的菌落圆形，乳白色，表面凸起湿润，有光泽，边缘整齐，大多数成双或短链状排列，通常不运动。
为D族链球菌中肠球菌的代表种。通常所谓的粪链球菌(fecal streptococcus)包括粪链球菌、粪链球菌液化亚种、粪链球菌产酶亚种、尿链球菌、牛链球菌、马肠链球菌、鸟链球菌等。其中前四种主要存在于人肠道，称肠球菌(enterococcus);后三种主要存在于家畜及家禽的粪便内。
?或45? pH 9.6或含其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10
6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65? 30分钟。它可利用精氨酸为能源，
发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。
二、粪链球菌的生理特性。
1、粪链球菌分泌的乳酸为L型乳酸, 又称为自然乳酸或生理乳酸, 可完全被动物吸收利用。乳酸杆菌分泌的乳酸L 型和D 型都有, 但D 型不能被动物吸收利用, 双岐杆菌分泌的乳酸也是L 型乳酸。在动物的肠道里, pH 值可显著影响微生物的数量与类型, 大部分来自食物和唾液里的微生物在肠道的酸性环境中存活很少,仅剩下大约103/mL 细菌, 主要是粪链球菌和乳酸菌、耐酸和不耐酸的细菌在肠道中还会受到不同的抗生因子如酸、蠕动、抗体等的影响, 但主要是pH 影响最大。而粪链球菌可在肠内形成生物薄膜附着在肠道粘膜上, 可以在肠道内发育、生长、繁殖,繁殖时间很短,19分钟分裂一次。
粪链球菌还可把部分蛋白质分解成酰胺和氨基酸, 把大部分的碳水化合物的无氮浸出物转化为乳酸, 而且能使饲料里的纤维变软,所以饲料的转化吸收率就比较高.粪链球菌分解的这些特殊营养成分弥补了常规饵料的营养缺陷, 对各种养殖动物幼体起到了十分重要的营养强化和促生长作用。
2、粪链球菌产生的抗菌物质大多是肽或蛋白质,被称为细菌素。粪链球菌可分泌两类细菌素, 一类仅只是对相关的菌有抑制作用, 抗菌谱较窄, 可阻碍病原微生物接触肠粘膜细胞; 另一类具有广谱抗菌活性, 它们对致病菌如: 沙门氏菌、致辞贺氏病和假单孢菌都有很好的抑制作用。所以, 长期在饲料中添加粪链球菌可以减少养殖动物肠炎等疾病的发生。粪链球菌在生长和代谢过程中产生对养殖动物有益的营养物质,如乳酸、氨基酸、维生素、酶及抑菌物质。在饲料添加中, 既有防腐作用, 又增加饲料的风味, 促进养殖动物的食欲。
3、饲料中添加粪链球菌可减少养殖中有机物质排泄量,有较地减少水质污染。在水产养殖水体中,添加了粪链球菌不仅有利于提高饲料的消化率,同时又相应降低了排泄物中的氨态氨的浓度,减少了排泄物的不消化物, 改善了饲料环境, 减少了污染。粪链球菌除了具有一般微生物所产生的有关酶外, 它还有一些特色的酶系, 正因为有了这些酶系, 才赋予它重要的生理功能。由于饲料中饼粕、麦麸等
农副产品中的植酸磷含量较高, 对钙等矿物质元素利用造成影响, 而在粪链球菌的生理作用下通过催化、水解等反应分泌出L- 乳酸, 它可以对钙质合成L-乳酸钙, 促进养殖动物对钙质的吸收。
三、在饲料添加剂的研究过程中, 粪链球菌添加剂是近年来发展起来的新生事物,在研究进展中还存在一些问题, 主要原因是:菌种失活、菌种选育、
1、菌种失活
菌种失活导致功效降低是目前应用微生物饲料添加剂的问题之一, 除微生物制剂生产中的因素外, 饲料加工中的高温、机械、制粒等操作以及养殖动物的肠道环境、抗生素的使用等因素都与菌种失活有关。国外的一些研究机构已取得了很好的发展, 国内的一些公司和高校科研中心也在研究, 也取得了初步成功。
2、菌种的选育
粪链球菌的菌种不同, 它对不同养殖物和不同饲粮类型的作用效果也不同, 因此在发展微生物饲料添加剂中, 根据养殖对象、饲粮的特异性来选育菌种, 才能达到最佳的使用效果, 另外, 现有一些实验结果表明, 在低水平的日粮中使用粪链球菌饲料添加剂的效果比在营养较为全面的全价配合日粮中使用效果更为显著。因此, 选育在高日粮水平条件下应用的菌种, 也是菌种选育的方向之一。
3、质量监督的制定和管理
四、影响粪链球菌生长的因素(培养基成分)
1、碳氮比
2、氨基酸
、微量元素 3
4、维生素
微生物饲料添加剂不仅具有与抗生素饲料添加剂相似的有益作用, 而且无毒、无副作用、无残留、无抗药性, 同时也不污染环境, 所以, 微生物饲料添加剂必将逐步发展, 并取得广泛的应用。
链球菌选择性琼脂培养基
1. 成分
胰化多价蛋白胨Tryptose 10.0g
眎蛋白胨 10.0g
葡萄糖 1.0g
蔗糖 50.0g
磷酸氢二钾 4.0g
锥虫蓝(Trypan blue) 0.075g
结晶紫 0.0008g
琼脂 15.0g
水 1000ml
2. 制法:除色素外，将各成分加热溶于1L水中，调至pH7.0,加入色素(配成适当溶液)、分装玻瓶，于121?灭菌15min，倾注灭菌平皿。
KF链球菌琼脂培养基
1. 成分
眎蛋白胨 10.0g
酵母浸膏 10.0g
氯化钠 5.0g
甘油磷酸钠 10.0g
麦芽糖 20.0g
乳糖 1.0g
叠氮钠 0.4g
琼脂 20.0g
溴甲酚紫 0.015g
水 1000.0ml
2. 制法:除指示剂外，将各成分加热溶于1L水中，调至pH7.2加入溴甲酚紫和1%TTC水溶
液10ml，混匀，煮沸5min，不需高压灭菌。过度加热将降低pH值，影响培养基效能。
若减去琼脂和TTC，则制成KF链球菌肉汤培养基
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