精品：sanger测序法--可编辑

精品：sanger测序法--可编辑精品：sanger测序法--可编辑 N-末端氨基酸分析 Sanger对末端肽端的分析方法: A:N-末端衍生物、sanger试剂(DNFB) B:二硝基苯基肽段的全部水解酸测定哪个氨基酸组成肽链N端是有用的，有两个原因:一是使个别的多肽碎片序列进入整条链有序化;二是因为第一次埃德曼降解经常会被杂质污染，所以不能给出精确的N端氨基酸序列。一个常用的N端氨基酸分析方法如下: 1、用肽段和能选择性标记末端氨基酸的试剂反应 2、水解蛋白质 3、用层析法和与标准对比的方法测定氨基酸序列有许多试剂可...

精品：sanger测序法--可编辑 N-末端氨基酸分析 Sanger对末端肽端的分析方法: A:N-末端衍生物、sanger试剂(DNFB) B:二硝基苯基肽段的全部水解酸测定哪个氨基酸组成肽链N端是有用的，有两个原因:一是使个别的多肽碎片序列进入整条链有序化;二是因为第一次埃德曼降解经常会被杂质污染，所以不能给出精确的N端氨基酸序列。一个常用的N端氨基酸分析方法如下: 1、用肽段和能选择性标记末端氨基酸的试剂反应 2、水解蛋白质 3、用层析法和与标准对比的方法测定氨基酸序列有许多试剂可以用来标记末端氨基酸。它们都能和氨基反应，所以也能和氨基酸侧链上的氨基结合，比如赖氨酸-----因为这个原因在解释色谱图时有必要小心，确保选择了正确的点。两种更常用的试剂是Sanger试剂(1-氟-2,4-二硝基苯)和丹酰衍生物如丹磺酰氯。异硫氰酸苯酯，埃德曼降解的试剂，也能用在此法中。同样的问题出现了，就像测定氨基酸混合物时一样。无需染色是一种例外，因为反应物产生了有颜色的衍生物，只需定性分析。所以氨基酸无需从层析柱上洗脱下来，仅仅和标准比较一下就行。另外一个要考虑的问题是，因为任何氨基都会和标记物反应，所以不能用离子交换色谱法，而应该用薄层色谱法或是高效液相色谱法。 (附:埃德曼降解:瑞典科学家埃德曼(P. Edman)创立的连续测定蛋白质或肽链N端氨基酸残基序列的经典方法。用异硫氰酸苯酯(PTH)等与多肽反应，逐个水解N端氨基酸残基，依次生成各种PTH-氨基酸，层析鉴定PTH-氨基酸就可从N端逐个确定被测肽段的氨基酸残基排列顺序。)

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