人体及动物生理学实验
2003
1
本课程是《人体及动物生理学》理论课程相配套的,主要学习在人体及
动物体上进行实际实验的方法技术的。通过对动物或者人体实验研究方法的
学习,一方面加强对人体及动物生理学理论知识的掌握,另一方面也培养学
生从事人体及动物生理科学的研究的基本素质。
学习生理学中的一些经典实验和利用现代先进仪器所进行的新实验方法
技术,通过对本实验课程的学习,使学生学会使用电子刺激器、使用微机记
录电生理实验的技术、
记录
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生理学实验中有关张力和压力实验的方法;学会
分离神经和肌肉的方法;学会气管插管、动脉插管和膀胱插管的方法;学会
对动物静脉麻醉的基本方法;学会对家兔开颅的基本方法。培养学生最基本
的生理学研究技术、观察问
题
快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题
与解决问题的能力。要求学生从理论上能够解
释实验中出现的各种生理现象。
重点在于培养学生分析问题解决问题的能力、学会动物的麻醉技术方法、
电子刺激器和使用微机记录生理参数的方法。难点是各个生理实验技术的熟
练操作问题。
课程的内容体系与《人体及动物生理学》密切配合;学生在学习本课程
前必须先学习完《人体组织解剖学》;学生必须具备基本的电脑操作技术。
36个学时,2个学分。
(详见后文)
教材:解景田、赵静:生理学实验(第二版),高等教育出版社
参考书:解景田、谢申玲:生理学实验(第一版),高等教育出版社
全国医学院校使用的《生理学实验》教材
2
-1.5
学习蛙类动物双毁髓的方法;掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
1、 双毁髓的方法。
2、 剥制粗标本。
3、 分离后肢。
4、 分离坐骨神经。
5、 分离股骨。
6、 游离腓肠肌。
7、 检查标本的兴奋性。
整个操作过程中时刻注意保护好神经和腓肠肌,使其活性良好。
0.5
了解电刺激神经时,通电与断电时兴奋发生在哪一极;要求搞明白电刺
激为什么能够引起神经兴奋。
可使用实验一中做成的神经-肌肉标本进行,也可以在实验一中剥制的蛙
体粗制标本上进行。
1、 用细棉线结扎蛙的坐骨神经干。
2、 用锌铜弓的锌一极靠近肌肉刺激坐骨神经干。
3、 用锌铜弓的铜一极靠近肌肉刺激坐骨神经干。
注意结扎神经干的棉线要干燥、结扎紧。
1.5
学习神经肌肉实验的电刺激方法和肌肉收缩的记录方法;观察刺激强度
与肌肉收缩反应之间的关系。
3
1、 将肌肉标本固定,将肌肉上的连线与张力换能器连接。
2、 打开电子刺激器,使用手动刺激开关。
3、 打开微机,调整好记录参数。
4、 逐渐增加电刺激强度,分别记录不同电刺激强度下的肌肉收缩高度。
当刺激强度达到阈值以后,一定要缓慢地、小幅度地增加刺激强度。
1.5
了解骨骼肌收缩的总和现象;观察不同频率的阈上刺激引起肌肉收缩形
式的改变。
1、 调整好电子刺激器、和微机的记录参数。
2、 固定好肌肉标本。
3、 分别以1次/S、2次/S、4次/S、8次/S、16次/S、32次/S的连续刺激
刺激坐骨神经,分别记录不同刺激频率下的肌肉收缩曲线。
不同的刺激频率之间要注意分割开一定的距离。
1
学习使用微机做电生理实验的方法;观察蛙坐骨神经干动作电位的基本
波形,并了解其产生的基本原理。
1、 制备好蛙的坐骨神经干标本,并置于屏蔽盒内。
2、 调整好微机刺激器和记录装置的各种参数。
3、 首先找出坐骨神经干的刺激阈值;然后逐渐增大刺激强度,观察双相
动作电位的波形幅度变化。测量动作电位的幅值。
4、 在两个引导电极之间结扎神经干,记录单相的动作电位,注意单相动
作电位与双相动作电位的图形区别。
要注意保持神经干标本兴奋性的良好。
4
1
学习用电生理的方法在微机上测定神经干动作电位传导速度的方法,进
一步熟悉微机的使用。
1、 备好蛙的坐骨神经干标本,并置于屏蔽盒内。
2、 调整好微机刺激器和记录装置的各种参数。
3、 首先在靠近刺激电极记录神经干的动作电位,注意动作电位的起始
点。
4、 然后再将记录电极远离刺激电极(测量出距离的毫米数),观察动作
电位产生的起始点后移的时间(ms)。由此计算出神经干动作电位的
传导速度。
将神经干一定要拉直,测量长度时一定要准确,这是测定传导速度准确
的关键。
1
学习测定神经干兴奋不应期的基本原理和方法,学习使用微机进行电生
理实验的方法。
1、 好蛙的坐骨神经干标本,并置于屏蔽盒内。
2、 调整好微机刺激器和记录装置的各种参数。
3、 首先记录出神经干的动作电位,然后使第二个动作电位逐渐向第一个
动作电位靠近,找出第二个动作电位幅度开始减小和完全消失时与第
一个动作电位之间的距离,则分别是神经干兴奋不应期的相对不应期
和绝对不应期。
4、 在绝对不应期内增大刺激强度,观察第二个动作电位是否还出现。
设定微机上的参数很重要,首间隔30ms,末间隔1ms,增量-1ms。
(0.5)
5
理解反射时的意义,学习测定反射时的方法。
1、 制备脊蛙。
2、 用1%的硫酸溶液刺激蛙下肢的趾尖,记录从刺激开始到蛙做出反射
活动之间的时间。连续三次求出平均时间。
每次刺激蛙的趾尖时,侵入硫酸溶液的深度要一致。
1
了解反射弧的组成及其各部分在完成反射活动中的作用。
1、 制备脊蛙,穿线并吊于实验架上。
2、 首先做搔爬反射。
3、 观察无感受器对反射活动的影响。
4、 观察阻断传入神经对反射活动的影响。
5、 观察损毁中枢神经后对完成反射活动的影响。
如果麻醉坐骨神经干,注意麻醉时间的掌握;如果采用剪断神经干的方
法,当蛙做出反射活动时,注意发生反射活动的具体部位。
1
具体观察脊蛙反射活动的特征,理解各种反射特征发生的原理。
1、 制备脊蛙,穿线并吊于实验架上。使用电刺激和硫酸刺激。
2、 观察反射的扩散现象。
3、 观察反射活动的时间总和与空间总和。
4、 观察反射活动的后放现象。
5、 观察反射活动的外周抑制现象。
做时间总和时注意找好阈下刺激强度;做空间总和时注意两对刺激电极
不要距离过远;做后放现象时电刺激的强度要大些、时间要长些。
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0.5
学习谢切诺夫的经典中枢抑制实验方法,理解中枢抑制的概念。
1、 制备间脑蛙,穿棉线吊于实验架上。
2、 首先测定动物的反射时。
3、 在间脑断面上放一小块食盐粒,每隔1分钟测定一次反射时,观察中
枢抑制现象。
4、 用任氏溶液洗去间脑的食盐,过一会儿,看反射时是否可以恢复。
恢复反射时可能需要时间长一些,不要着急。
2.5
学习家兔的麻醉方法;学习哺乳动物的开颅方法;观察大脑皮层运动区
的刺激效应和运动支配特点。
1、 讲清楚麻醉家兔使用的药物、剂量,耳缘静脉注射麻醉的方法。
2、 注意让学生学习使用骨钳开颅的技术。
3、 放松动物的四肢,电刺激家兔大脑皮层不同部位,观察电刺激所引起
的活动。要求观察到动物的咀嚼、扭头、上肢和下肢的活动。
4、 注意观察动物四肢和咀嚼区域的大小,是对侧支配还是双侧支配。
开颅时注意不要伤及颅骨下方的静脉窦,注意及时止血;电刺激大脑皮
层时,强度不要过大,电极的尖端尽量圆滑些。
0.5
学习动物去大脑僵直的方法,观察动物去大脑僵直现象。
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利用实验十二做完的动物,使用手术刀在动物中脑的上、下丘之间横断
脑干,观察动物出现的去大脑僵直现象。
切断脑干时,不可过于后切,否则动物会死亡;当切到正确位置时,动
物有一定程度的挣扎。
学习记录人体脑电图的方法,观察脑电图的基本波形。
1、 使用针形电极从被试者头皮上引导。
2、 可以在二道记录仪上记录,也可以在电子示波器上记录。有条件的话
在PcLab上记录则更好。
3、 要求记录观察到α波,当大脑积极进行思维活动时观察到α波阻断。
被试者必须要安静耐心。
1
观察视觉调节反射和瞳孔对光反射。
1、 在较昏暗的光线条件下,首先观察到被试者眼内所成的三个蜡烛像,
搞清楚它们分别是在眼的哪个折光面上形成的,有什么特点。
2、 然后令被试者突然从视远处改为视近处,观察蜡烛像的大小及其位置
的相对变化。解释产生的原因。
3、 观察瞳孔对光反射和互感性的对光反射现象,试解释其原因。
实验的难点是观察蜡烛在眼内形成的三个像,尤其是晶状体的前缘形成
的最大的虚像。注意做好语言的描述和观察的角度。
1.5
8
学习视力、视野、色盲和盲点的测定方法及其意义。
1、 根据简约眼成像的基本原理,计算出中央凹据视神经乳盘的实际距
离、盲点的实际大小。
2、 搞清楚视力的测定方法及其原理。明白测定视力是测定的眼视网膜什
么部位的什么功能。
3、 测定出自己单眼的视野,
总结
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其图形特点;测定出白色、红色、绿色
和黄色的有色视野,比较它们的大小。
4、 利用色盲图册测定色盲。
注意测定盲点的准确性,重要的是眼睛要凝视,保证界定的准确性。测
定视野也要注意找出准确的视野临界点,这是测定准确的关键。
0.5
了解声波传入内耳的气导和骨导方式,总结两种传导方式的特点与区别。
叩响音叉,并置于外耳道口,当听不到声音时,将音叉柄置于颞骨乳突,
是否可听到声音?叩乡音叉,将音叉置于颞骨乳突,当听不到声音时立即将
音叉置于外耳道口,是否能够听到声音?
用棉球将双耳的外耳道塞住,将叩响的音叉置于额骨的正中央,比较双
耳听到的声音是否相同。
本实验注意室内一定要保持安静。
ABO1
学习ABO血型的鉴定方法。
1、采用玻片法。手指尖端采血。
2、将少许末梢血分别置入
标准
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的含抗A血清和含抗B血清之中,观察两侧血清中红细胞所发生的凝集现象。
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3、 根据两侧血清所发生的凝集情况,判定所测血液的血型。
注意不要造成采血后的感染;两侧的标准血清一定不要相混合。
-0.5
测定红细胞的渗透脆性,观察红细胞在低渗溶液中的溶血现象。
选取干净的小试管数支,编号,1号试管内装0.9%NacL2ml,2号试管内装0.88% NacL2ml……依次递减浓度,最低浓度到3.0% NacL。采取末梢血,每一小试管内都加入鲜血少许。一刻钟后观察各试管的血液颜色。找出开始
溶血的浓度和完全发生溶血的浓度。使用目测与显微镜镜检相结合来确定。
采血勿感染。各小试管内的盐浓度梯度尽量要小一些。
1
懂得人体动脉血压测定的原理,测定自己或同学的动脉血压。
1、 被测者静坐,脱去一侧上肢的衣服,将血压计的袖带按照要求位置缠
于被测者的上臂。
2、 向血压计的袖带内充气,数值要高于预测血压30mmHg,然后逐渐
放气减压,分别准确找出被测者的收缩压和舒张压。
3、 反复测定几次,求得平均数值。
血压计的袖带位置要缠准,松紧适宜;初次测定放气要缓慢,有利于读
数准确;血压计的0位要与被测者的心室大致处于同一水平。
0.5
学习观察蛙微循环的方法和血流特点。
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破坏蛙的的脑脊髓,可选取蛙的趾蹼、肠系膜、肺泡、膀胱等透明部位,
对准蛙板的小孔在显微镜下观察。
在显微镜下识别动脉、静脉和毛细血管,并总结其血液流动的特点。
冬季实验时心脏活动较弱,注意室温不要过低;时间久了血流效果会减
弱,应注意抓紧观察。
2
学习蛙心脏机械活动的描记方法,掌握期前收缩和代偿间歇产生的原因。
1、 制作脊蛙,并将心室与机械换能器相连,在微机上记录心脏机械收缩
活动的曲线。
2、 观察蛙心的静脉窦、心房和心室的波动曲线。
3、 在蛙心室收缩期间或者收缩过后给蛙心一个阈上刺激,观察刺激是否
有效?观察刺激以后所产生的期前收缩和代偿间歇现象。
心室与换能器的连接松劲要适宜;电刺激蛙的心室时注意不要触动蛙的
心脏,否则会使得记录的曲线产生杂波。当进行期前刺激时,注意掌握好时
机。
1
观察家兔减压神经的放电现象,理解其在调节动脉血压的稳定上所起的
重要作用。
1、 从颈部首先分离出家兔的减压神经干。将引导电极引导的电活动输入
放大器。其电活动的一部分输入到监听器,监听减压神经的电活动,
另一部分输入到微机的显示系统,显示减压神经放电的情况。注意放
电的情况与心脏活动的情况在时间上的对应关系。
2、 向动物体内注射少量的肾上腺素或者去甲肾上腺素,观察动物血压升
高后减压神经的放电情况。
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减压神经非常纤细,分离时或者引导电活动时不要牵拉过重;记录时间
长了容易使神经干干燥;减压神经干的放电输入要注意输入参数的选择。
3
1、 学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。
2、 观察某些神经与体液因素对心血管活动的影响。
1、以1g/Kg体重的剂量耳缘静脉注射麻醉家兔,然后仰卧位固定。
2、分离出一侧的迷走神经干、减压神经干和交感神经干,穿线备用。
3、 将一侧的颈总动脉插管,并与血压换能器相连,输入到微机中记录动
脉血压。
4、 记录正常的动脉血压。观察动脉血压的一级波、二级波和三级波。
5、 观察项目:夹闭一侧颈总动脉;电刺激一侧减压神经、电刺激一侧迷
走神经的外周端、电刺激迷走神经的中枢端、电刺激交感神经、注射
肾上腺素、注射乙酰胆碱后动脉血压的变化,分析其发生变化的原因。
1、 动脉插管是关键。
2、 实验时间长了要注意防止血液凝固。
3、 在给予各种刺激因素时要注意时间间隔,一定要等动脉血压恢复到基
本正常以后再进行下一项目。
0.5
了解肺容量的组成,学习测定肺活量的方法。
1、 测定自己的潮气量,测定三次求得平均值。
2、 测定自己的肺活量,测定三次,取最大数值。
3、 测定自己的补呼气量。
4、 测定自己的补吸气量。
测定时同学之间要注意气嘴的消毒,防止互相感染疾病。
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2.5
学习记录家兔呼吸运动的基本方法,观察各种因素对家兔呼吸运动的影
响。
1、 1g/Kg体重的剂量耳缘静脉注射麻醉家兔,然后仰卧位固定。
2、 进行气管插管。将气管三通的一支管与血压换能器相连,通过记录在
呼吸周期中动物气管内压的变化记录呼吸频率和呼吸深度的变化。
3、 观察项目:记录正常的呼吸运动曲线;记录长管效应对动物呼吸运动
的影响;增大呼吸阻力对动物呼吸运动的影响;剪断一侧迷走神经对
动物呼吸运动的影响;剪断两侧迷走神经对动物呼吸运动的影响;电
刺激一侧迷走神经中枢端对动物呼吸运动的影响;注射3%乳酸对呼
运动的影响。
注射乳酸时动物容易发生挣扎,可能会影响记录曲线的美观;当记录曲
线幅度太小时,可将气管三通的另一支管口用胶布沾封一点儿。
观察胸膜腔内负压以及在整个呼吸周期内的升降变化。
利用实验二十六实验结束后的家兔进行,将水检压计的一端胶皮插管顺
家兔的胸肋骨插入胸膜腔内,即可见胸膜腔内为负压,并随着呼吸周期发生
周期性的升降变化。
一要注意插力不要过猛,二要注意胶管针头勿堵塞,三不要反复插。
学习膀胱插管技术、观察影响尿量的几种因素。
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1、以1g/Kg体重的剂量耳缘静脉注射麻醉家兔,然后仰卧位固定。 2、沿腹白线打开腹腔,绕两侧输尿管后方穿一面线,将膀胱颈结扎。 3、 在膀胱底部血管少的部位剪开一开口,将膀胱插观察入膀胱内部并结
扎。使肾脏新形成的尿液经膀胱插管流出。
4、 观察项目:
正常的尿量情况;
耳缘静脉一次注射生理盐水15ml,观察尿量的变化;
耳缘静脉一次注射20%葡萄糖溶液15ml,观察尿量的变化; 耳缘静脉一次注射1/万去甲肾上腺素溶液0.5ml,观察尿量的变化; 耳缘静脉一次注射生理盐水15ml,观察尿量的变化;
电刺激迷走神经外周端30S,观察尿量的变化;
耳缘静脉注射垂体后叶激素2单位,观察尿量的变化。
1、 在插管以前如果动物的膀胱内尿液过少,可向膀胱内注射一些生理压
水,使膀胱充盈,这样更好插管。
2、 每次注射药物因素以后,必须要等到动物的尿量基本上恢复正常以后
才能注射下一种因素。
3、 本实验多次使用耳缘静脉,所以要注意保护好耳缘静脉的注射部位。
2.5
观察某些神经体液因素对家兔胃肠运动的影响。
1、 以1g/Kg体重的剂量耳缘静脉注射25%氨基甲酸乙酯麻醉。然后仰
卧位固定。
2、 从动物的颈部分离出一侧的迷走神经干穿线备用。 3、 经腹白线打开腹腔,分离出左侧的内脏大神经穿线备用。 4、 实验观察:
观察正常的胃肠活动情况;
电刺激迷走神经外周端,观察动物的胃肠运动情况;
电刺激动物的内脏大神经,观察动物的胃肠运动情况; 在小肠的某一段落滴加1/万乙酰胆碱,观察该段小肠的运动变化; 在小肠的某一段落滴加1/万去甲肾上腺素,观察动物小肠的运动变化; 耳缘静脉注射新斯的明少许,观察动物胃肠运动的变化。
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注射新斯的明不要过多。
0.5
观察小白鼠胰岛素休克现象,理解胰岛素对动物血糖浓度的调节。
1、 取健康小白鼠两只,一只在腹腔内注射胰岛素2单位;一只在腹腔
内注射生理盐水等量。
2、 等到注射胰岛素的小白鼠出现惊厥休克现象以后,马上在腹腔内注
射10%的葡萄糖溶液2ml,观察数分钟以后惊厥休克现象的解除消
失。
实验结束以后要将小白鼠处死。
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