HPLC法测定不同地区制川乌中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱含量

HPLC法测定不同地区制川乌中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱含量 HPLC法测定不同地区制川乌中新乌头碱、 次乌头碱及乌头碱含量 摘要,目的测定制川乌不同炮制品中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的含量。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 采用HPLC法,色谱柱为Kromasil-C18柱,甲醇-水-氯仿-三乙胺,体积比70?30?2?0.1,为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长230 nm,柱温为常温。结果新乌头碱在0.025,0.3 mg/mL,乌头碱在0.01,0.117 mg/mL,次乌头碱在0.025,0.3 mg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.3 %,98.1 %,96.8 %。结论制川乌中酯型生物碱含量均不超过0.15%,符合中国药典规定。 关键词,制川乌,生物碱,含量测定 中图分类号,R282.71文献标识码,A文章编号,1672-979X(2008)09-0044-03 Determinations of Mesaconitine, Hypaconitine and Aconitine in Radix Aconiti preparata from Different Areas by HPLC ZHU Jun-fang, LI Zhuo-ya, SHEN Zhi-bin*, JIANG Yong-he, YUAN Ji-cheng 1 (Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China) Abstract,Objective To determine the contents of mesaconitine, hypaconitine and aconitine in different processed products of Radix Aconiti preparata. Methods A HPLC method was established on a Kromasil C18 column with the mobile phase consisting of methanol-water- chloroform- triethylamine(70?30?2?0.1) and flow rate of 1.0 mL/min at common temperature. The detection wavelength was 230 nm. Results The calibration curves showed good linearity in the range of 0.025,0.3 mg/mL of mesaconine, 0.01,0.117 mg/mL of aconitine and 0.025, 0.3 mg/mL of hypaconine, respectively. And the average recoveries for mesaconine, aconitine and hypaconine were 97.3 %, 98.1 % and 96.8 %, respectively. Conclusion The content of ester alkaloids does not surpass 0.15 % in Radix Aconiti preparata, which conforms to the requirement of Chinese Pharmacopoeia. Key words,Radix Aconiti preparata; alkaloid; assay 制川乌为川乌的炮制加工品,含有多种生物碱,其中主 要有新乌头碱、次乌头碱及乌头碱。现有文献多测定制川乌 中1种或2种生物碱含量,同时测定3种生物碱含量的文献 2 报道较少。我们研究了不同地区的制川乌,测定了新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的含量,以期为制川乌生产的 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 化、饮片生产的标准化提供依据。 1仪器与试药 Waters 515 型高效液相色谱仪,Waters 515泵,2487紫外检测器,EmPower色谱工作站) ,乌头碱,批号110720-200410,、次乌头碱,批号0798-9403,、新乌头碱,批号0799-9403,等对照品均购自中国药品生物制品检定所,甲醇、氯仿为色谱纯,余为分析纯,水为重蒸馏水。 制川乌饮片来源见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1,经广东药学院生药教研室李书渊副教授鉴定。 2方法和结果 2.1色谱条件[1] 色谱柱,Kromasil C18,250 mm×4.6 mm,5 μm),流 动相,甲醇-水-氯仿-三乙胺,70?30?2?0.1,,流速,1.0 mL/min,检测波长,230 nm,柱温,室温。 2.2溶液的制备及色谱检测 2.2.1对照品溶液的制备及色谱检测分别精密称取乌头碱、次乌头碱、新乌头碱适量,加二氯甲烷溶解配制成浓度分别为0.39,1.00,1.00 mg/mL的对照品溶液。精密吸取1 mL,置入10 mL尖底具塞试管中,精密加入0.01 mol/L H2SO4溶液1 mL,涡旋2 min,离心5 min,3 000 r/min,, 3 取水层20 μL进样[2]。色谱图见图1。 2.2.2供试品溶液的制备及色谱检测取制川乌粗粉约10 g,精密称定,加氨试液4 mL润湿[3],再加乙醚50 mL,浸泡14 h,过滤。药渣用乙醚洗涤3次,每次15 mL,合并乙醚液,60 ?以下蒸干乙醚,残渣用二氯甲烷溶解并定量转移至5 mL量瓶中,得供试品溶液。色谱检测前,按2.2.1处理此溶液并进样。色谱图见图2。 2.3方法学考察 2.3.1线性关系的考察精密吸取对照品溶液0.25,0.5,1,2,3 mL,分别置入10 mL尖底具塞试管中,按2.2.1的方法处理,并按2.1的色谱条件测定峰面积,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,求得新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的回归方程分别是Y=2×107X+4.4×107,r=0.999 3,、Y=4×107X,1.8×104,r=0.999 2,、Y=4×107X,5.5×104,r=0.999 1,,结果表明3者浓度分别在0.025~0.3 mg/mL、0.01~0.117 mg/mL、0.025~0.3 mg/mL线性关系良好。 2.3.2精密度实验取同一供试品溶液,在2.1的色谱条件下重复进样6次,由标准曲线求出质量浓度,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的RSD分别为1.8 %,2.8 %,2.5 %。 2.3.3重现性实验取同一供试品溶液6份,在2.1的色谱条件下测定,由标准曲线求出质量浓度,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的RSD分别为2.3 %,2.8 %,2.5 %。 4 2.3.4稳定性实验取同一供试品溶液,分别在0,2,4,8 h测定,结果表明供试品溶液在8 h内稳定,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱峰面积的RSD分别为2.0 %,1.5 %,2.1 %。 2.3.5加样回收率实验精密称取已知含量的样品6份,分别加入适量对照品溶液,按2.2项操作,在2.1的色谱条件下测定,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的平均回收率分别是97.3 %,98.1 %,96.8 %,RSD分别为1.47 %,1.20 %,1.54 %。 2.3.6样品含量测定分别取不同供试品溶液20 μL,按上述色谱条件进样,测得供试品中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱相应峰面积,计算其相应浓度,结果见表1。 3讨论 3种生物碱的含量以新乌头碱最高,其含量之和以取之舟山的最高。在不同产地的样品中,3种生物碱含量之和的差异也较大,最高0.076 2 mg/g,最低0.0035 mg/g,相差约20倍。表明饮片的内在质量参差不齐,应尽快制定并完善饮片的炮制规范及质量控制标准。 参考文献 [1]Li Y P,Tian S J,Wang G R.Chemical components and analysis methods of aconitum[J]. China J Chin Mater Med, 2001, 26(10): 659-661. 5 [2]郑杭生,冯年平.中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱的HPLC测定[J]. 药物分析杂志,2005,25,1,,34-36. [3]国家药典委员会. 中国药典2005年版,二部,[S]. 北京,化学工业出版社,2005,27. 6