氟伐他汀对野百合碱所致的大鼠肺血管重塑和右心室肥厚的影响

氟伐他汀对野百合碱所致的大鼠肺血管重塑和右心室肥厚的影响 氟伐他汀对野百合碱所致的大鼠肺血管重 塑和右心室肥厚的影响 实用药物与I临床2008年第11卷第6期PracticalPharmacyAndClinicalRemedies,2008,vo1.1l,No.6?333? ? 论着? 氟伐他汀对野百合碱所致的大鼠肺血管重塑和右心室肥厚的影响 朱少平,毛志福,黄杰,王君钰 [摘要]目的观察氟伐他汀对野百合碱(McT)所致的大鼠肺血管重塑和右?e.2室肥厚的影响. 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 66只大鼠被随机分为3组:(1)M+F组(n=24):本组大鼠首先给予每日1次MCT(60mg/kg)皮下注射,连续2 周,第3周至第6周末给予氟伐他汀(1mg/kg)灌胃,每日1次.(2)MCT组(n=24):实验前2周给予每日1次 MCT(60mg/kg)皮下注射,第3周至第6周末给予与氟伐他汀等体积的0.9%盐水灌胃;(3)SMine组(,2=18):分 别于实验前2周及第2周末至第6周末给予等体积的0.9%盐水皮下注射和灌胃.MCT注射前记为第O周,实 验共观察6周.分别于不同时间点观察大鼠肺组织形态学变化,并对平均肺动脉压(mPAP),管壁厚度百分比 (PWT),右心室肥厚指数(RVHI)进行测定.结果MCT注射2周后,大鼠出现显着的肺血管重塑和右心室肥 厚.McT组大鼠在McT停止注射后mPAP,PwT及RVHI进一步增高.而M+F组大鼠在给予连续4周氟伐 他汀1mg/(kg?d)灌胃处理后,mPAP(23.3?3.2)mmHg及PwT(42.3?2.7)%均较MCT组减轻.RVHI (0.32?0.02)亦较MCT组(0.54?0.03)显着降低,且与正常对照组(Saline组)比较无显着差异.结论氟伐他 汀能有效减轻MCT诱导的大鼠肺血管重塑和右心室肥厚. [关键词]氟伐他汀;肺动脉高压;重塑 Effectsoffluvastatinonmonocrotaline-inducedpulmonaryvascularremodelingandrightventricularh ypertrophyin ratsZHUShao-ping,MAOZhi—fu,HUANGJie,eta1.(Depa~mentofThoracicSurgery,RenminHosp italofWuhan University.Wuhan430060,China) [Abstract]ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectsoffiuvastatinonmonocrotaline-inducedpul monary vascularremodelingandrightventricularhypertrophy.Methods66ratswererandomlydistributedinto3 groups.One group(M+F,n=24)receivedasinglesubcutaneousinjectionofMCT(60mg/kg)for2weeksandthenweregiven fluvastatin(1mg/kg)oncedailybygavagefrom3rdweekto6thweek.Anothergroup(MCT,”=24)receivedasingle subcutaneousinjectionofMCT(60mg/kg)for2weeksandthenweregivenanequivalentvolumeofsalinegaragefrom the3rdweekto6thweek.Thethirdgroup(Saline,=18)receivedonlyequivalentvolumeof0.9%salineinjectionor gavagefor42d.Morphometricchanges,pulmonaryarterialpressure(PAP),percentwallthickness(PwT),rightyen— tricularhypertrophyindex(RVHI)weredetectedatvarioustimesduringthe6, weekobservation.ResultsPulmonary vascularremodelingandrightventricularhypertrophywereresulted2weeksafterMCTadministration.PWT.mPAP andRVHIofratsinMCTgroupworsenedfurtherafterwithdrawalofMCT;however,mPAP(23.3?3.2)mmHg, PwT(42.3?2.7)%andRVHI(O.32?0.02)wassignificantlylowerthanthatofMCTgroup.Furthermore,nodif— ferencewasnotedbetweenM+FgroupandSalinegroupinRVHIvalue.ConclusionFluvastatiniseffectiveinattenu— atingMCT-inducedpulmonaryvascularremodelingandamelioratingrightventricularhypertrophyinrats. Keywords:Fluvastatin;Pulmonaryarterialhypertension;Remodeling 肺动脉高压(Pulmonaryarterialhypertension, PAH)是一种以进行性肺血管阻力和肺动脉压增高 为特征的疾病,患者最终往往死于右心室衰竭n]. 他汀类药物通过选择性作用于3一羟基3一甲基 戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶发挥降低血脂的 作用,现已成为高脂血症临床治疗的首选药物.近 年来有研究 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明_2I3J,他汀类药物除能有效降低血 脂外,还能发挥独立的血管保护效应.PAH以肺 小动脉收缩,血管平滑肌和内皮细胞增生及血栓形 成所致的肺血管阻力增加为特征[引.本研究旨在 观察氟伐他汀对野百合碱所致的大鼠肺血管重塑 和右心室肥厚的影响,以期为他汀类药物治疗 PAH提供新的实验基础. 1材料与方法 收稿日期:2008—09一O4 作者单位:1.武汉大学人民医院胸外科.武汉430060;2.湖北 省新华医院江北综合科.武汉430015. *通讯作者:毛志福 1.1实验材料Wistar大鼠(二级雄性,7周龄, 体重200,250g,武汉大学实验动物中心提供),氟 伐他汀(Fluvastatin,Sigma—Aldrich,上海),野百合 碱(MCT,Sigma,美国),戊巴比妥钠(上海科丰化 学试剂有限公司),多道生理记录仪(RM一6000,日 本),图像 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 系统(Nikon&Spot,美国). 1.2实验分组66只大鼠随机分为3组:(1)M +F组(,z=24):本组大鼠首先给予每日1次MCT (60mg/kg)皮下注射,连续2周,第3周至第6周 末给予氟伐他汀(1mg/kg)灌胃,每日1次.MCT 的配制方法参考文献【5;(2)MCT组(=24):实 验前2周给予每日1次MCT(60mg/kg)皮下注 射,第3周至第6周末给予同氟伐他汀等体积的 0.9%盐水灌胃;(3)Saline组(=18):分别于实验 前2周及第2周末至第6周末给予等体积的0.9% 盐水皮下注射和灌胃.MCT注射前记为第0周, 实验总共观察6周.各组大鼠实验期间均提供标 实用药物与i瞄床2008年第1I卷第6期PracticalPharmac~And!nj!es2Q:: 准鼠食,自由饮水,光照周期设为12h. 1.3平均肺动脉压(mPAP)及右心室肥厚指数 (RvHI)测定分别于实验第0,2,6周对各组大鼠 mPAP及RVHI进行测定.在该固定的时间点,大 鼠经1%戊巴比妥钠(50mg/kg)腹腔注射麻醉后 仰卧位固定,分离右颈外静脉,采用灌有肝素钠溶 液的聚乙烯导管(PE一50)经右颈外静脉行右心插 管,进行平均肺动脉压(mPAP)测定,导管另一端 经压力换能器与多道生理记录仪连接,并开始记录 mPAP.待记录mPAP完毕后,将大鼠放血法处 死,经左侧开胸,切除左肺叶后以10%中性甲醛溶 液固定,以备组织学观察.在切除出入心脏的大血 管和心房后,切开心室腔,用滤纸吸干残余血液,分 离右心室游离壁(RV),并将RV及左心室与室间 隔(Iv+s)分别进行称重,计算右心室肥厚指数 (Rightventricularhypertrophyindex,RVHI)[RV/ (LV+S)]. 1.4肺小动脉重塑观察大鼠左肺组织经10% 中性甲醛溶液固定,经常规石蜡包埋切片(厚度 51TI)后进行HE染色,随机选取直径100, 1501TI的肺腺泡内小动脉6支,采用图像分析系 统,分别测定横截面积(S),管腔面积(S1),并参考 文献【J计算管壁厚度百分数(Percentallthickness, PWT)(%)=(S一S1)Is×100%,用于评估血管肌 化程度. 1.5统计学处理实验结果以;?s表示.两组 问比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方 差分析,统计分析以SPSS13.0软件包完成,P< 0.05为差异有统计学意义. 2结果 2.1MCT诱导大鼠实验性肺动脉高压形成MCT 皮下注射2周后,大鼠肺小型动脉管壁出现了显着 的增生和肥厚改变,管腔变窄,肺泡间隔增厚(见图 1A,图lB).大鼠右心室肥厚指数(RVHI),肺小动 脉管壁厚度百分数(PWT)及平均肺动脉压(mPAP) 均较MCT注射前显着升高(见表1),提示MCT皮 下注射2周后成功诱导PAH及右心室肥厚(RVH). 图1与正常对照组(Saline组)(A)相比,在给予2周MCT60rag/(kg?d)皮下注射后,M+F组大鼠 肺小动脉出现显着肌化现象(上箭头), 同时伴有肺泡间隔增厚(下箭头)(B),在给予4周氟伐他汀Img/(kg?d)灌胃后,m管肌化明显 好转,且肺泡间隔增厚亦有所减轻(c). (HE染色.x400) 表1MCT对大鼠肺动脉高压和右心室肥厚的影响fx?,,l=6) 注:与Saline组第2周对应值比较,P<0.05,P<0.01. 2.2氟伐他汀对大鼠肺血管重塑和右心室肥厚的 影响实验第6周末分别对3组大鼠相关指标进 行测定,MCT组大鼠mPAP,PWT及RVHI进一 步增高(P<0.001),提示肺动脉高压在MCT停止 注射后仍进一步恶化.而M+F组大鼠在给予连 续4周氟伐他汀1rag/(?d)灌胃处理后,mPAP (23.3?3.2)mmHg及PWT(42.3?2.7)%均较 MCT组减轻(图2A,图2B,P<0.01),且RVHI (0.32?0.02)较MCT组(0.54?0.03)显着降低 (P<0.001),且与正常对照组(Saline组)相比较无 显着差异(见图2C).组织学上,肺小动脉肌化明 显减轻,肺泡间隔增厚亦有所减轻(见图lC). 3讨论 在过去的近20年里,PAH的治疗手段取得了 较大进展,磷酸二酯酶一5抑制剂,类前列腺素,磷内 皮素受体拮抗剂等联合辅助治疗(钙拮抗剂,抗凝治 实用药物与临床2008年第11卷第6期PracticalPharmacyAndClinicalRemedies~2008)I..?335? 5O 4O 一 曲 毛30 邑 山 20 矗 10 O SalineMCTM+F 组别 1OO 80 60 言4o 20 0 SalineMCTM+F 组别 O.7 0.6 0.5 0.4 > 0.3 0.2 O.1 O.O SalineMCTM+F 组别 图2肺血管重塑通过肺小动脉管壁厚度百分数(PWT)(A)及平均肺动脉压(mPAP)(B)进行评估,右心量肥厚以石心至肥厚捂散(RVHI) 即RV/(LV+s)比值(c)表示.(与Saline组比较:?P<0.05,一P<O.001;与MCT组比较:P<0.O1,P<O.ooi). 疗等),使PAH患者的预后和生活质量得到了明显总之,氟伐他汀能有效改善MCT诱导的大鼠 改善.此外,Rho激酶抑制剂,血管活性肠肽肺血管重塑和右心室肥厚,后期研究将着眼于氟伐 (VIP),基因治疗等在治疗PAH上也显现出各自他汀对PAH作用的分子机制,进一步评价氟伐他 的潜能,其中部分药物已经进入临床试验[.汀用于PAH的临床疗效. 近年来,他汀类药物对肺动脉高压的治疗作用参考文献: 日益受到关注,Takahisa等8认为,他汀类药物可[]PMH?Adancesi”iagnosi:and, tre . “patient , sw , i 通过保护eNOS的活性而对PAH发挥保护作用..u】.,二t.tio二,2o08,71(3):2053. MCT诱导的大鼠PAH以显着的肺小动脉重塑及[2]ShahDI,SinghM.Effectofbis(maltolato)oxovanadiumon 右心室肥厚为特征,该动物模型现已成为研究最:h..”yn 为广泛的PAH动物模型之一.本研究观察了[3]Taaseicien..StertL,ScebaiiusR,ChoKH,ta1.Si. HMG-CoA还原酶抑制剂一氟伐他汀对MCT诱导 vastatincausesendothelialcellapoptosisandattenuatessevere 的大鼠肺血管重塑和右心室肥厚的影响,结果表器嚣LungcMdPh 明,氟伐他汀能明显减轻实验性PAH大鼠的肺小 [4]McLauginw,McGoonMD.Pulmonaryarterialhypertension 动脉肌化程度,有效降低异常升高的肺动脉压[J]?CkcNation,2006,114(3):1417-143? (mPAP),表明氟伐他汀对MCT诱导的肺血管重Is 塑具有良好的改善作用.本研究还观察到,氟伐他 inducedfatalpulmonaryhypertensioninrats[J].CircRes,2004,94 汀对右心室肥厚的改善作用强于对肺血管肌化的[6]:?BS,chinBY,wlB.eta1.Cabon0nox|de 改善作用,右心室肥厚的改善可能为右心室后负荷...blishdplmoyhypertensi.[J].Joumd.fEx- 减轻及氟伐他汀对心肌独立的保护作用二者共同 perimentalMedicine,2006,203(9):2109-2119. 作用的结果.已有研究表明,他汀类药物能通过调[7?Badesc , DB,Abmail . „Simonn , eauG?al?Medicalt . herapy 节异常升高的基质金属蛋白酶和血管紧张素?水based.linialpratigidli.[J].Ch.t,2007,131(6): 平,抑制心肌细胞凋亡等途径对急性心肌梗死19171928? (AMI)后心室重塑发挥保护作用.他汀类药物盖 对PAH患者的适应证,临床疗效及不良反应等仍 ducedPulmonaryHypertension[J].ArteriosclerThrombVaseBid, 有待进一步探讨.他汀类药物用于临床血脂调节.0,():00-3? 治疗具有疗效肯定,不良反应相对少而轻的特点,To 拙 fovi . c . S h P,J eff ackso . n .f EK . , 三i2-m0Methoxyalesitr.a.indio1 其对PAH的临床疗效一旦得以肯定,将可望对ducedpulmonaryhypertension[J].VascularPharmacology, PAH患者,特别是合并血脂异常的PAH患者起到[1.]邢20 西 06迁,4 , 5 甘 (4 烨 ): , 3 吴 58 . 他汀类药物治疗肺动脉高压作用机 减少用药,降低医疗费用的作用.制的研究进展[J].国际呼吸杂志,200~7,27(10):794.797.