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届高三生物一轮复习 专题5 5DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离课件 新人教版选修自主学习·基础知识合作探究·重难疑点亲和力电荷形状和大小大小相对分子质量的分配色谱法项目蛋白质类型进入凝胶内部的程度路程移动速度相对分子质量较小容易较长.相对分子质量较大无法进入.较快贯穿的通道多糖类化合物多孔球体较慢较短在不同pH范围内使用使用比例外界的酸和碱度迁移速形状大小带电性质的差异反的电极与其所带电荷相的基团可解离迁移电场电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶琼脂糖凝胶电泳电泳聚丙烯酰胺凝胶去除杂蛋白黄色血浆五倍生理盐水暗红色10红色透明脂溶性沉淀层滤纸红色血红蛋白甲苯层相对分子质量较小大分子小分子磷酸缓冲液透析袋血...

届高三生物一轮复习 专题5 5DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离课件 新人教版选修
自主学习·基础知识合作探究·重难疑点亲和力电荷形状和大小大小相对分子质量的分配色谱法项目蛋白质类型进入凝胶内部的程度路程移动速度相对分子质量较小容易较长.相对分子质量较大无法进入.较快贯穿的通道多糖类化合物多孔球体较慢较短在不同pH范围内使用使用比例外界的酸和碱度迁移速形状大小带电性质的差异反的电极与其所带电荷相的基团可解离迁移电场电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶琼脂糖凝胶电泳电泳聚丙烯酰胺凝胶去除杂蛋白黄色血浆五倍生理盐水暗红色10红色透明脂溶性沉淀层滤纸红色血红蛋白甲苯层相对分子质量较小大分子小分子磷酸缓冲液透析袋血红蛋白样品的加入和洗脱气泡缓冲液平衡好凝胶色谱柱凝胶色谱柱SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质纯度相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动无规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱顺序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳由于琼脂糖本身不带电荷,各种分子在电场中迁移速率决定于所带电荷性质的差异及分子的大小、形状的不同在凝胶中加入SDS,使蛋白质解聚成单链,与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,使其迁移速率完全取决于分子的大小目的红细胞洗涤去除杂质,如血浆蛋白血红蛋白释放使红细胞破裂,释放血红蛋白分离血红蛋白溶液经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开透析除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化除去相对分子质量较大的蛋白质 学生合作绘制知识网络师生归纳必记答题术语1.凝胶色谱法分离蛋白质取决于相对分子质量的大小,相对分子质量大的路程较短,移动速度快;相对分子质量较小的,路程较长,移动速度慢。2.缓冲液能在一定范围内抵制外界酸、碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。3.电泳时,带电分子会向其所带电荷相反的电极移动。师生归纳必记答题术语4.蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。5.血红蛋白溶液离心后分为四层,从上到下依次为:无色透明的甲苯层、白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白的水溶液)和其他杂质的暗红色沉淀物。6.在电泳中,待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小,形状都会影响分子的迁移速度。7.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。
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