第四章 中药制剂的含量测定2014

第四章中药制剂的含量测定含量测定的目的与意义目的：研究某种成分的含量高低是否符合 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 ，来判定药物的优劣，确保临床用药的安全、有效。意义：对于药品生产、研究、优化生产工艺、控制药品质量起着重要作用；确保药物的安全有效；第一节含量测定样品的处理处理目的：被测成分从样品中释放出来除杂纯化，提高分析方法的重现性和准确度富集浓缩或衍生化，便于测定低成分的含量使试样的形式及所用溶剂符合分析测定的要求。第二节含量测定样品的处理一、样品的粉碎目的：1.样品均匀有代表性，提高测定结果的精密度和准确度2.快速完全地提取待测成分注意：粉末不要过细防损失防止污染设备：粉碎机、铜冲、研钵匀浆机、玻璃匀浆器第二节含量测定样品的处理二、样品的提取1.过程：精密称定样品粉末溶剂提取分离残渣第二节含量测定样品的处理2.提取方法：萃取法浸渍法回流提取法连续回流提取法超声提取法水蒸气蒸馏法超临界流体提取法（SFE）（一）萃取法利用溶质在两种互不相溶的溶剂中分配系数不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，经过多次萃取，将待测组分提取出来的方法。（适宜于液体制剂）（3）仪器和提取次数（4）酒剂和酊剂——先挥去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鉴别——1次含量测定——3~4次样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法操作简单适宜遇热不稳定的样品提取杂质少缺点优点费溶剂（溶剂用量为样品重量的10倍～50倍）费时（12~24小时）1、冷浸法（二）浸渍法2、温浸法（室温15℃～25℃）（室温40℃～60℃）样品置有机溶剂中加热回流的提取方法加快溶出速度，省时（0.5～2h）适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分特点仪器普通回流装置（三）回流提取法样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法节省溶剂，提高提取效率适宜受热稳定的药物费时（5～10h）特点仪器索氏提取器（四）连续回流提取法A普通回流装置B索氏回流装置（1）原理：超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现“空化”现象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力，具有强烈的振动和击碎作用，可以把物体打成极为细小的微粒，起到助溶的作用，因此可以用于样品中测定组分的提取。（五）超声提取法（2）超声提取的优点①无需高温。在40℃～50℃水温下超声波强化萃取，无水煮高温，不破坏中药材中某些具有热不稳定，易水解或氧化特性的药效成份。②常压萃取，安全性好，操作简单易行，维护保养方便。③萃取效率高。超声波强化萃取20～40分钟即可获最佳提取率。④具有广谱性。适用性广，绝大多数的中药材各类成份均可超声萃取。⑤超声波萃取对溶剂和目标萃取物的性质（如极性）关系不大。因此，可供选择的萃取溶剂种类多、目标萃取物范围广泛。适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油（六）水蒸气蒸馏法（Microwaveassistedextraction,MAE）是指在样品的提取过程中（或提取的前处理）加入微波场，利用微波场的特点来强化有效成分浸出的新型提取技术。（七）微波辅助萃取法步骤：（1）挑选物料，然后进行预处理：清洗、切片或混合，以便充分的吸收微波能；（2）将物料和合适的萃取剂混合，放置于微波设备中，接受微波辐射；（3）从萃取相中分离滤去残渣；（4）获得目标产物。1、萃取时间短，效率高2、溶剂用量少，污染小3、可通过选择不同的溶剂，控制样品与溶剂间的热交换4、可实现多个样品的同时萃取特点（一）沉淀法基于某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液以得到精制的方法。三、样品的分离纯化如含益母草制剂总水苏碱的测定，可用雷氏盐（硫氰酸铬铵）在酸性介质中可与生物碱生成难溶于水的复合物，将此沉淀过滤而与其他杂质分离。利用某些被测成分具有挥发性，可采用蒸馏法，收集馏出液进行含量测定，或某些成分经蒸馏分解生成挥发性成分，利用分解产物（要求结构明确）进行测定。如水蒸气蒸馏法测定丹皮酚：蒸馏时，在样品的水溶液中加入氯化钠，使丹皮酚提取完全。（二）蒸馏法1、直接萃取法利用试样中被测成分与干扰成分在有机溶剂（萃取剂）中的溶解度不同，通过多次萃取达到分离净化的目的。2、离子对萃取法原理：BH+(水相)+In-(水相)BH+.In-(水相)BH+.In-(有机相)（三）液-液萃取法（LLE）离子对萃取法在适当的pH介质中柱色谱、薄层色谱、纸色谱、经典微柱色谱等。（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上常用固定相硅胶、氧化铝键合相硅胶大孔树脂聚酰胺硅藻土、纤维素离子交换树脂（四）色谱法该方法采用的是一个类似于气相色谱微量进样器的萃取装置，由一根涂布多聚物固定相的熔融石英纤维从液/气态基质中萃取待测物，并直接与HPLC或GC仪联用，在进样口（气相色谱即为气化室）将萃取的组分解吸附后进行色谱分离检查。　（五）固相微萃取技术固相微萃取装置1、湿法消化（1）硝酸-高氯酸法（2）硝酸-硫酸法（3）硫酸-硫酸盐法2、干法消化（不适用于含易挥发性金属有机样品的破坏）注意：（1）加热灼烧温度控制在420℃以下，以免某些被测金属化合物挥发。（2）灰化完全与否，直接影响测定结果的准确度。（3）经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但切勿弃去。（六）消化法（需要测定无机元素）（五）范围指达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。（六）耐用性指测定条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下实验结果重现性的尺度。第三节常用定量分析方法一化学分析法重量分析法挥发法萃取法沉淀法滴定分析法酸碱沉淀配位氧化还原缺点:操作繁琐专属性不高微量成分准确度不够硼砂的含量测定取供试品1.5000g，加水50ml溶解后，加甲基红指示液3滴，用0.5002mol/L盐酸MATCH_ word word文档格式规范word作业纸小票打印word模板word简历模板免费word简历 _1714004486403_0溶液滴定至溶液由黄色转变为橙色，消耗盐酸标准溶液14.40ml，每1ml的0.5mol/L盐酸标准液相当于95.34mg的硼砂，求硼砂的含量。二可见紫外分光光度法常用于测定生物碱，丹皮酚,卢丁,总黄酮等(一)单波长光度法吸收系数法对照品法标准曲线法(二)计算分光光度法1.等吸收点法2.系数倍率法3.三波长法4.导数光谱法(三)对仪器和溶剂要求硫酸阿托品注射液的含量测定精密量取硫酸阿托品注射液2.50ml置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，得供试液；取供试液2.0ml、硫酸阿托品对照液（49.8µg/ml）2.0ml，按规定的酸性染料提取法提取后，以氯仿液为空白，在420nm处测得对照管和供试管吸光度分别为0.446和0.444，试计算本品含硫酸阿托品的量？取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL4mL，加水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸光度为0.463，已知该波长处的，求咖啡酸百分含量.三薄层扫描法一定波长的光扫描在薄层板上，薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描　　　薄层吸收扫描法　　　薄层荧光扫描法测定方式（1）吸收法适用于有紫外（可见）吸收的成分，较常用。该法又可采用反射法或透射法测定。实际工作中常用反射法，因为紫外光不能通过玻板。（2）荧光法适用于有荧光性质的成分，例如小檗碱等。该法仅采用反射法测定，其灵敏度比吸收法高。　定量方法　　　外标法　　　一点法　　　　　　　　　两点法　　　气相色谱的一般流程图系统适应性试验：色谱柱的理论塔板数分离度重复性拖尾因子塔板理论高度（H）和理论塔板数（n）都是柱效指标，建立方法时必测。n=16（tR/W）2或n=（tR/σ）2或n=5.54（tR/W1/2）2　分离方程式分离度（R）：是用于衡量分离效果的参数，其定义式如下：R=14σ分离95.4%R=1.56σ分离99.7%tR2－tR1w1重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。拖尾因子：为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子（T）是否符合各品种项下的规定，或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求　实验条件的选择固定相温度汽化室　　柱温　　检测室载气检测器　　ECDFIDTCDNPD（三）定量方法　定量校正因子定义：绝对定量校正因子：单位峰面积所代表的物质的量。相对校正因子：某物质i与所选定的基准物质S的绝对定量校正因子之比。定量方法内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品中，以待测组分和对照物质的响应信号对比，测定待测组分的含量。内标的要求：样品中不含有；保留时间与待测组分接近但完全分离；纯度合乎要求。内标对比法定量方法外标法用待测物质的纯品作对照物质。以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量。工作曲线法；外标一点法不需重量校正因子，样品中其它峰或成分不需出尽。定量方法分为归一化法使用条件：所有组分都能产生信号；组分的量与其峰面积成正比。标准溶液加入法：Ais/Ax=(Cx+Cs)/Cx高效液相色谱法（1）反相键合相色谱法：典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相：常用十八烷基（octadecylsily，缩写ODS或C18）键合相；流动相：常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色谱系统，用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。　（2）正相键合相色谱法固定相——氰基与氨基化学键合相氰基化学键合相的分离选择性与硅胶相似，但极性小于硅胶，即用相同的流动相及其它条件相同时，同一组分的保留时间将小于硅胶。氨基键合相与硅胶的性质有较大差异，前者为碱性；后者为酸性。氨基键合相色谱柱是分析糖类最重要的色谱柱也称为碳水化合物柱。流动相为非极性或弱极性溶剂。(3)离子对色谱法：直接将离子对实际加入到流动相中，用以分离离子型或可离子化化合物的方法称为离子对色谱法（PIC或IPC）该法可分为正相离子对色谱法和反相离子对色谱法（4）离子抑制色谱法2、胶束色谱法3、手性色谱法定量法：内标法外标法同GC荧光分析法激发光谱发射光谱（荧光光谱）nm荧光强度影响荧光强度的外部因素1、温度温度升高，荧光效率和荧光强度降低。2、溶剂极性增大，波长长移，强度增强；粘度减小，强度减小。3、pH值pH<2pH7~12pH>13定量方法标准曲线比例法F-F0=KC原子吸收分光光度法A=KC含量测定方法的验证（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用加样回收试验法。加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M数据要求规定的范围内，取同一浓度的供试品，用6次测定结果进行 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 ；或至少如制备三个不同浓度样品各测三次，用9次测定结果评价，。中药分析的准确度一般用加样回收试验衡量。中药回收率一般要求在95-105%范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在90-110%范围内。RSD一般在3%以内。（二）精密度（precision）精密度是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）1.重复性规定的范围内，取同一浓度的供试品，用6次测定结果进行评价；或至少如制备三个不同浓度样品各测三次，用9次测定结果评价。2.中间精密度同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备3.重现性不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。（三）专属性（specificity）指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。（阴性对照）（四）线性在 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。习题99x：76．精密度是指该法（）A.测得的测量值与真值接近的程度B.测得的测量值与回收率接近的程度C.测量的正确性D.测得的一组测量值彼此符合的程度E.对供试物准确而专属的测定能力D96：138．在药物分析中，精密度是表示该法的（）A.测量值与真值接近程度B.一组测量值彼此符合程度C.正确性D.重现性E.专属性BD97：126．药物杂质检查所要求的效能指标为（）A.准确度B.精密度C．选择性D.检测限E.耐用性CDE98：138．评价药物分析所用的测定方法的效能指标有（）A.含量均匀度B.精密度C.准确度D.粗放度E.溶出度BCD例6.相对标准差表示（）A.准确度B.回收率C.精密度D.纯净度E.限度C例7.精密度的一般表示方法有()A.相对标准差B.相对平均偏差C.相对误差D.绝对误差E.标准差AE例8.检测限的表示方法有（）A.百分数B.ppmC.ppbD.µgE.ngABC