0.1M“PBS”缓冲液配制(10倍浓缩)一般所说PBS缓冲液为0.01M,故使用时需稀释溶液10倍1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。A液:称取NaH2PO4·2H2O3.12g,加双蒸水充分溶解定容至100ml;B液:称取Na2HPO4·12H2O7.16g,加双蒸水充分溶解定容至100ml;2、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)的配制:A液为碱性,B液为酸性;取A液和B液在pH计的监测下按一定比例进行混和,可得到所需的不同pH的0.2mol/L的PB。pH7.4所需A液和B液为1.9ml和8.1ml0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)(PB)pH 0.2mol/LNaH2PO4(ml) 0.2mol/LNa2HPO4(ml)7.3 2.3 6.77.4 1.9 8.17.5 1.6 8.43、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS):(1)、100ml试剂:0.2mol/LPB 50ml【(5×1.9)(5×8.1)=9.540.5】NaCl 0.85-0.9g(约0.15mol/L)双蒸水 加至100ml配制方法:取0.2mol/LPB50ml,加入30ml双蒸水及NaCl0.85-0.9g,充分搅拌溶解后加入双蒸水定容至100ml。一般情况下,0.2mol/LPB的pH值稍微高些,稀释成0.1mol/LPBS时,常可达到要求的pH;若需调整pH,通常是调PB的pH。(2)、20ml试剂:0.2mol/LPB 10ml【1.9(A)8.1(B)=10ml】NaCl 0.17-0.18g (约0.15mol/L)双蒸水 加至20ml配制方法:取0.2mol/LPB10ml,加入6ml双蒸水及NaCl0.17-0.18g,充分搅拌溶解后加入双蒸水定容至20ml。一般情况下,0.2mol/LPB的pH值稍微高些,稀释成0.1mol/LPBS时,常可达到要求的pH;若需调整pH,通常是调PB的pH。4、0.01M磷酸盐缓冲生理盐水(PBS):只需稀释0.1M的就可得到。
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