车间环境卫生
检测
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规范
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1.目的：
根据GB 12693-2010《乳制品企业良好生产规范》及本公司《生产洁净区环境、卫生管理规定》中的相关规定及要求，特制定本规范。
2.范围
本规范规定了本公司实验室实施车间环境卫生检测的依据、方法及检测结果判定
标准
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。
本规范适用于本公司实验室实施车间环境卫生的各项检测。
3检测项目：
菌落总数、霉菌、酵母、阪崎肠杆菌、大肠菌群、沙门氏菌
4.检测频率及检测时间：
每日生产前进行生产设备、工器具、包装
材料
关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料
、员工个人卫生等部位的涂抹试验。
每日生产过程中对生产车间空气进行沉降试验。
5.职责
由检验人员负责车间环境卫生检测的具体操作。
6.检测方法
6.1空气沉降法
6.1.1 菌落总数：
1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。
2）生产车间空气检测采样部位： 混粉间、杀菌机、预封机、真封机、100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间等，每部位为一采样点。
3）将营养琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置36±1℃培养48h。
4）若为车间空气菌落总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位菌落总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。
6.1.2 霉菌、酵母：
1）、2）同6.1.1 菌落总数。
3）将虎红琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置25±1℃培养3d~5 d。
4）若为车间空气霉菌、酵母总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位霉菌、酵母总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。
6.1.3阪崎肠杆菌
1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。
2）将阪崎肠杆菌显色平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置36±1℃培养48h。
3）计数每个阪崎肠杆菌显色平板上蓝绿色菌落，并计算4个采样点蓝绿色菌落的平均数，以每皿阪崎肠杆菌菌落数（CFU/皿）报告结果。
6.2表面涂抹法
6.2.1物体表面涂抹：
6.2.1.1菌落总数、霉菌和酵母
6.2.1.1.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌生理盐水/乳糖胆盐发酵管的采样管内及时送检。
6.2.1.1.2将每支灭菌生理盐水采样管充分混匀后，取1mL样液，分别放入灭菌平皿内，加入冷至45℃左右的营养琼脂/虎红琼脂约15mL，每个样品平行接种2个平皿，将营养琼脂平板置36℃±1℃培养48h.；虎红琼脂平板置25℃~28℃培养3~5d.
6.2.1.1.3.计数平板上的细菌/霉菌、酵母菌落数，以每毫升检样中的菌落总数（CFU）的平均数报告结果。
6.2.1.2 阪崎肠杆菌
6.2.1.2.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌营养肉汤的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。
6.2.1.2.2 将每支灭菌营养肉汤的采样管充分混匀后，取1mL样液，以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 接种量分别加入三个阪崎肠杆菌显色平板，然后用无菌L 棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。使用前，如阪崎肠杆菌显色平板表面有水珠，可放在25 ℃～50 ℃的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消失方可使用。
6.2.1.2.3 反转平板，置36±1℃培养48h。
6.2.1.2.4 挑取蓝绿色可疑菌落，采用API 20E进行生化鉴定及进行氧化酶、产黄素试验。
6.2.1.2.4 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出阪崎肠杆菌。
6.2.1.3 沙门氏菌
6.2.1.3.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一灭菌的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。
6.2.1.3.2将灭菌营养肉汤的采样管于于36±1℃培养8~18h。
6.2.1.3.3轻轻摇匀采样管内的混合物，取1mL样液转种于10mL亚硒酸盐胱氨酸（SC）内，于36±1℃培养18~24h。
6.2.1.3.4 用接种环取增菌液1环，划线接种于一个科马嘉显色培养基平板，于36±1℃培养18~24h。
6.2.1.3.5 挑取紫红色可疑菌落，采用API 20E进行生化鉴定试验。
6.2.1.3.6 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出沙门氏菌。
6.2.1.4大肠菌群
6.2.1.3.1将每支乳糖胆盐发酵管置36±1℃培养24h±2 h。
6.2.1.3.2若产气，即初步判定为大肠菌群阳性。以大肠菌群阳性/阴性报告结果。
6.2.2员工手部涂抹：
6.2.2.1被检人五指并拢，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂抹10次，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌乳糖胆盐发酵管内及时送检。
6.2.2.2将每支乳糖胆盐发酵管置36±1℃培养24h±2 h。若产气，即初步判定为大肠菌群阳性。
6.2.2.3以员工手表面大肠菌群阳性或阴性/手报告结果。
6.2.3涂抹部位：
6.2.3.1生产设备、工器具的涂抹：预混机、混粉缸、混粉缸上/下料口、筛粉机下料口、下粉漏斗、填充器、筛网、受粉槽、钢管、软管、盆、勺等。
6.2.3.2包装材料的涂抹： 底盖、内袋等。
6.2.3.3员工卫生状况涂抹：连体服、手套、手。
涂抹及检测方法同6.2.1。
7判定依据
菌落总数：空气暴露30min ≤10 CFU/皿，
表面涂抹 ≤50 CFU/mL ；
霉菌、酵母：空气暴露30min ≤10 CFU/皿,
表面涂抹 ≤10 CFU/mL；
阪崎肠杆菌：空气暴露30min 0 CFU/皿，
表面涂抹 不得检出
大肠菌群：阴性。
8.检测报告
检验员应真实、准确填写《生产车间环境微生物检测报告》，经实验室主管审核后，报送品控部和生产部。
9.
说明
关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书
9.1 混粉间、杀菌机、预封机、真封机为每天必须检测的部位，100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间仅在使用时进行检测。
9.2 钢管、软管应每次拆卸清洗后进行检测。
9.3 一般情况下，仅进行车间空气中的阪崎肠杆菌检测，必要时可采用涂抹法对某些部位进行阪崎肠杆菌检测。
9.4员工手部涂抹样仅检测大肠菌群。
附录
车间空气采样位点图
代表空气采样点；
代表车间人员入口风淋室；
代表混粉间门口；
浙公网安备 33021202002483