食品中有毒有害物质的分析

食品中有毒有害物质的 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 气相色谱/质谱联用技术和液相色谱的应用1，饲料中β-兴奋剂（盐酸克仑特罗）的分析2.NDMA（N-亚硝胺）的测定3.海产品中的药物残留的分析4.酱油中的氯丙醇的分析GC/MSD或HPLC-UV法饲料中盐酸克仑特罗(Clenbuterol)的测定盐酸克仑特罗(Clenbuterol)盐酸克仑特罗是一种肾上腺素兴奋剂，主要用于防治人，畜支气管哮喘和支气管痙挛，治疗剂量较低。在饲料中添加盐酸克仑特罗具有营养再分配作用，提高饲料报酬，提高瘦肉率的效果。盐酸克仑特罗在肌肉特别是在内脏中会有高浓度的残留，对人与动物的肝，肾及神经系统产生危害。欧盟最早颁布法规禁止其作为饲料添加剂使用，美国和加拿大也禁用，我国农业部亦发文作出同样 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 。盐酸克仑特罗CHOHCH2NHC(CH3)3HClNH2ClCl白色结晶粉末，可从SIGMA公司购买，可溶于水。GC/MSD方法样品中的盐酸克仑特罗经提取，净化，衍生化，采用AGILENT5973NGC/MSDSCAN方式进行测定，外标法定量。方法回收率为92%--99%，检出限为低于0.2ppm。样品处理提取：饲料样品10克加50ml0.01mol/LHCl溶液超声清洗器萃取30min,离心10min上清液如有必要，重复一次样品处理净化上清液加2.0ml5mol/LNaOH溶液，加入10ml氯仿,振荡萃取。60℃水浴中真空蒸发氮气吹干重复二次衍生化加1.0ml氯仿溶解，再加入0.1ml乙酸酐衍生试剂。氮气吹干，加0.5ml氯仿溶解色谱与质谱条件色谱条件：HP－5MS30mX0.25mmX0.25um进样口：250℃，不分流，进样量2ul，柱温：120℃（3min）20℃/min220℃（10min)质谱条件：EI源，接口温度280℃，质量扫描范围50－500AMU溶剂延迟：3min。Clenbuterol的标准质谱图HPLC法采用反相高效液相色谱法用水相和有机相二次提取饲料中的盐酸克仑特罗，可减少饲料中杂质的干扰。UV 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 器，C18柱回收率在85％－－95％，检出限<0.2ppm色谱条件C18柱，250mmX4mm；流动相：甲醇：水＝65：35检测波长，UV－243nm，流速：0.85ml/min进样量：20ul或者：流动相：甲醇：水＝55：45，流速0.80ml/min.样品处理饲料样品20g加盐酸70ml浸泡过夜，超声振荡20min，定容，静置,取上清液离心10min上清液10ml于分液漏斗滴NaOH碱化，振摇5min，用正己烷提取二次，每次20ml，合并正己烷层，定容至50ml。取5ml，水浴蒸干，加甲醇溶解。样品溶液动物毛发尿液及组织中的盐酸克仑特罗及舒喘宁（沙丁胺醇）的测定本方法适用于检验动物毛发、尿液及组织中克喘素及舒喘宁的测定。组织和尿液样品用盐酸葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶在Ph=5.2的缓冲溶液中消化。萃取的组织样液通过离心和过滤分离。尿液和毛发样品作用有机溶剂萃取。所有萃取液均用固相萃取净化，分离的药物残留经过双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用带有质量选择检测器的气相色谱仪测定。试剂-乙酸胺缓冲液（20mM,pH=5.2）、溶解1.45g乙酸胺于500~700mL水中，用乙酸调整pH值为5.2并稀释到1升。-盐酸葡萄糖甙酶/芳基硫酸酯酶溶液30U/mL或相当者-十二烷基磺酸钠（SDS）：1%-30mM盐酸：稀释30mL1M盐酸到1升蒸馏水中。-甲醇：分析纯。-氨化甲醇（amoniummethanol）：4%。用甲醇稀释4mL氨溶液（比重0.88）至100mL。-BSTFA。-甲苯：分析纯。-乙酸乙脂-异丙醇（6：4）：分析纯。-C18小柱：supelcleanLC-18SepPak小柱500mg，3ml。-SCX小柱：supelclean，LC-SCXSepPak小柱500mg，3ml。标准溶液标准溶液储备液：1000ppm（1mg/mL）克喘素（4氨基-t-丁基氨基-甲基-3，5二氯苯基乙醇盐酸盐。精确称取约100mg舒喘宁，溶解于100mL甲醇中。舒喘宁（t-丁基氨基-甲基-4-羟基-m-苯乙烯-，-二醇）精确称取约100mg舒喘宁，溶解于100mL甲醇中。中间溶液：30ppm（30ug/mL）分别移取3mL上述储备液（1mg/mL）定容至100mL甲醇中。工作溶液：0.3ppm(30ug/mL)移取1mL上述储备液（30ug/mL）用甲醇定容至100mL。离心瓶，50mL。Sep-Pak真空接头。具聚四氟乙烯拧盖的试管。食品绞碎机。机械真空泵触摸式震荡器。恒温箱：37+3oC恒温箱：80+3oC恒温箱：100+3oC气相色谱仪，配质谱检测器。仪器设备动物组织（肉、肾脏、肝脏、肺、心脏等）。绞碎组织样品1min。准确称取10+1.0g已绞碎的样品于50mL具拧盖的离心管中。加入20mL20mM的乙酸缓冲溶液，均质5min。加入50L-盐酸葡萄糖醛甙酶溶液。拧紧盖子，震荡、超声15min。于37oC培养18hr。于3000rmp离心5min，过滤上清液。收集滤液以备净化。动物组织的提取过程用移液管移取5mL尿样于50mL具拧盖的离心管中。用乙酸调整pH值至5.2。加入1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液。加入50L盐酸葡萄糖醛甙酶溶液。拧紧盖子，震荡、超声15min。于37oC培养18hr。加入10mL乙酸乙酯-异丙醇混合液，震荡15min。用滴管收集有机相。用10mL上述混合液重复提取一次。合并两次提取的溶液于一玻璃试管中。用氮气吹干。用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液溶解。尿样的提取取约1g毛发至——500mL烧杯中，用100mL1%SDS溶液冲洗。搅拌上述溶液30min，使之分散。再用100mL1%SDS溶液冲洗一次。用蒸馏水清洗毛发样品，去除SDS溶液。于40oC的烘箱中烘干样品。切碎毛发。准确称取500mg毛发样品于具拧盖的试管中。加入10mL甲醇，超声30min。拧紧盖子在60oC的烘箱中加热2hr，并不时震荡。离心甲醇提取液。再用10mL甲醇提取一次，在60oC的烘箱中加热1hr。合并两次甲醇提取液。用氮气吹干。用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液解。毛发样品的提取样品的净化装好真空泵和接管，将C18和SCX固相萃取柱按从上到下的顺序安装。依次用5mL甲醇、5mL水和5mL30mM盐酸活化。取5mL滤液（4.1.1.8）至C18柱中。对于尿和毛发样品，移取1mL所得到溶液（4.2.1.2或4.3.1.4）至C18柱中。用1mL20mM的乙酸胺缓冲溶液冲洗试管并一起转移至C18柱中。依次用5mL甲醇、5mL水淋洗柱子。在溶液渡过固相萃取柱后，保持抽气5min使柱中的液体逐渐枯竭。取下C18柱。用5mL4%氨化甲醇（2.6）淋洗SCX柱并收集流出液于具塞玻璃试管中。衍生化、检测用氮气吹干上述流出液。用100L甲苯溶解残渣。加入100LBSTFA，加盖并于触摸式震荡器上震荡。在80OC的烘箱中加热1hr。蒸干多余的溶剂。用0.5mL甲苯溶解。（HP6890配5973或相当者）。气相色谱仪参数（仅供参考）。色谱柱：HP-5MS5%苯基甲基聚硅氧烷，30mX0.25umX250um进样口：220OC进样方式：不分流进样体积：2L柱头压（70OC）：7.6psi柱温：70OC（保持0.6min）以25OC/min升温至200OC（保持6min）以25OC/min升温至280OC（保持5min）流速：0.9mL/min（恒流）气-质联用仪参数传输线温度：280OC溶剂延迟：8minEM电压：高于调谐电压（-15000）200分析杆温度：106OC。选择离子监测程序（仅供参考）时间目标物监测离子8：00克喘素86，243，262，27711：55舒喘宁86，147，207，369质谱仪参数（仅供参考)方法 小结 学校三防设施建设情况幼儿园教研工作小结高血压知识讲座小结防范电信网络诈骗宣传幼儿园师德小结 两个-兴奋剂的检测限为1.5g/kg。组织中克喘素和舒喘宁的平均回收分别为75.5%+12.8%和72.8%+18.3%N-亚硝胺残留分析N-亚硝胺(NDMA)是一类很强的化学致癌物,在自然界分布很广泛,如食品,药物,化妝品等.GC/MS结合大体积进样技术测定NDMA,准确可靠,灵敏度高,操作简单.氨代亚硝基二甲胺(N-Nitrosodimethylamine,NDMA)Theproblem:NDMA被怀疑是一种强致癌物和致崎物NDMA,hasbeenregulatedindrinkingwatersourcesatthe0.7ng/L(ppt)levelbytheUS-EPAandat2ng/L(ppt)byCaliforniaDept.ofHealthServices.Existingmethodshavequantitationlimitsinthe7-100ng/Lrangeanddetectionlimitsatbest1-3ng/l;higherthantheregulatedlimits.LossesincreasewithsampleevaporationusingeitherSPEorLiq/Liqextraction.TheelectronimpactionizationspectrumforNDMAisnotveryfavorable.*样品处理200g食品切碎于蒸馏瓶加100ml水,120gNaCl,用装有40ml二氯甲烷的接收瓶收集溜出液400ml,加入80gNaCl合3ml1:3硫酸溶液120ml二氯甲烷分三次提取提取液无水硫酸钠脱水定容至1ml样品溶液IntroductionIntypicalGC/MSanalyses,onlyafractionoftheinjectedcomponentsisofanalyticalinterest;theremaindersareinterferencesoruninteresting(e.g.,samplesolvent,matrixrelated,etc..).Eliminatingtheseunnecessarycomponentsprovidessubstantialimprovements;Increasedanalyticalintegrity,lessfrequentmaintenance,etc..TheseconcernsbecomeamplifiedinLargeVolumeInjection(LVI).*大体积进样技术（LVI）GCColumnVentVentGCDetectorStep1:Injectsolvent,analyte,matrixsamplemixture.Step2:Separationofinjectedsampleoccursinphasecoatedand/orpackedpre-column.Solventissplittothevent.Step4:Splitventisreopenedandhighpre-columnflowrateisadded.Thematrixbandisdilutedbyhighsplitflowandvented.Step3:SplitventclosestotransfertargetanalytebandtotheGCcapillarycolumn.SolventAnalyteMatrixSAMSplitModeSplitlessModeHighSplitFlowModePre-columnTemperatureHoldsIsothermalPre-columnTemperatureRampProgramPre-columnTemperatureRampstoBakeGCColumnGCDetectorGCColumnGCDetectorGCColumnGCDetectorSplit/SplitlessConfigurationLVI（大体积进样）进样技术的原理*仪器配置6890GC-5973MassSelectiveDetectorwithAPEXProSep800XTPlusPre-separationInletandcontrollermodulesApexPrecolumnControlModules6890PlusGC5973MSDPre-separationColumnModule*LVI（大体积进样）的参数控制*ExperimentalTodemonstrateProSepFunctioninLargeVolumeInjectionusingasimple4componentmixture.目的TheProSeppreseparationcolumnwasphasecoatedwithHT-5,containedHT-5coatedfibersandaplugofsilicawoolintheupper4-7cmofthecolumn.6890PlusGCwithALSmadeallinjectionsonto30m,.25mmid,.25umfilmHP-5MScolumn….MSDwasoperatedinfullscan,….*LVI（大体积进样）的优势LVIallowsgreaterflexibilitybyprovidingthechoiceof–LowereddetectionlimitswithanexistingextractionmethodologyORLessSamplePrep/ExtractionwhilemaintainingrequireddetectionlimitsProSephasapplicationsdemonstratingbothapproachesandothers(e.g.,derivatization“duringinjection”,…)*LVI和化学电离质谱=>提高选择性和灵敏度20attograms/ulofOctafluoronaphthaleneacquiredusingLVIwithECNI–MSon5973(44,000molecules/ul)*PCI+SIM+LVI技术分析NDMA20fg/uL200fg/uLPCI-NH3-SIMchromatogramsof50uLinjectionsofNDMAstandardsinCH2Cl2.Applyingaconcentration&recoveryfactorof500,200fg/ul=>0.4ng/l(0.4ppt)20fg/ul=>0.04ng/l(40ppq)*NDMA分析的线性及重现性NDMAquantitationcurvefrom20fg/ulto4000fg/ulr2=0.999Reproducibilityin75/92m/zratioandresponse(n=5)forconcentrationsofNDMAfrom20to4000fg/ul*结论ApexProSepPreseparationInletBehavesasaChromatographicZoneInletSystemPerformsseparationsinLargeVolumeInletmodesIncreasedanalyticalintegrity,loweredcolumnanddetectormaintenance,etc..WorkwithauthenticsamplesandawidevarietyofmatriceshasshowntheProSeptobeveryreproducibleandrobust.Injection(1to125ul)israpidsosamplethroughputishigh.*水产品中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定方法本方法为HPLC方法，最低检出浓度为0.05mg/kg、0.05mg/kg、0.1mg/kg。原理：样品经提取，SPE纯化，微孔膜过滤，直接进样，用反相色谱分离，UV检测，外表法定量。出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。样品预处理，称取5.00g肉样于50ml离心管中加入5％高氯酸溶液20ml，匀浆10分钟，振荡提取10分钟，以4000r/min离心10分钟，取上清液用0.45um滤膜过滤,在离心管残渣中再加入5%高氯酸溶液10ml,重复操作一次,合并.上清液上清液过Sep-C8柱(10ml甲醇、10ml15％EDTA－2Na溶液、20ml蒸馏水活化）过30ml蒸馏水洗去杂质，10ml甲醇洗脱洗脱液40℃水浴中氮气吹，浓缩至1ml0.45um滤膜过滤样品溶液分析条件仪器条件：HP1100＋UV检测器色谱条件：柱ZOBRBAXSB－18，4.6mmX250mm,ODS-C18(HP)检测波长:355nm柱温:37℃流速:0.8ml/min进样量:30ul流动相:乙晴/0.01M/磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH2.5)26:74(V/V)酸水解植物蛋白调味液中三氯丙醇的测定1.三氯丙醇问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 的提出:-1988年Velisek等在酱油中发现一种有机成分--氯丙醇以来,引起了食品学界的高度重视.-1991年Collier等对氯丙醇的形成机理做了进一步的研究;-1993年世界卫生组织对氯丙醇的毒性提出了警告;-1995年欧共体委员会食品科学分(ECSCFF)对氯丙醇的毒理作了评价,并指出氯丙醇作为一种致癌物,其最低阀值应为不检出为宜.2.氯丙醇的来源一.脂质:蛋白质水解可用酸水解和碱水解,但是碱水解会引起精氨酸、胱氨酸及部分赖氨酸被破坏，因此工业上是采取浓盐酸水解植物蛋白质或动物蛋白质的方法来生产的。在原料植物/动物蛋白质中有脂质,主要有三酰甘油酯类和甘油磷酯类,而这些脂质在浓盐酸中会发生水解反应,产生氯丙醇.二.某些环氧树脂:以表氯丙醇为单体制成的环氧树脂已广泛地应用在涂料,粘结剂及乙烯树脂的稳定剂,环氧树脂是目前食品工业中的主要包装材料之一,而表氯丙醇可水解为3-氯丙醇.三.其他来源:袋泡茶的包装袋;以含氯的凝聚剂作为水的净化剂;以3-氯-1,2-环丙烷来加工的变性淀粉.酸水解植物蛋白调味液中三氯丙醇的测定国别资料来源1,3-二氯-2-丙醇2,3-二氯-1-丙醇2-氯-1,3-丙醇3-氯1,2丙醇德国标准SKS0.05ppm0.1ppm未提及0.05ppm美国食品FCC0.05ppm未提及未提及1ppm用化学品法规(FCC)英国食品FAC0.05ppm未提及未提及0.01ppm顾问委员会FAC瑞士0.05ppm未提及未提及10ppm中国未提及未提及未提及1ppm**部分国家对3-氯丙醇的限量酱油中3-氯丙醇的分析方法酱油是微生物发酵产物，成分很复杂，国外普遍采用毛细管色谱法进行测定，即使这样也会因为分离效果不好而影响分析结果的可靠性。通过研究发现，将样品用苯基硼酸衍生化处理，转化为易挥发的物质，正己烷抽提后，用气相色谱-质谱联用仪的选择离子监测方法测定，提高了分辨率，且干扰少，灵敏度高，操作简单，结果准确可靠。实验部分1.试剂衍生化试剂配制：称取10g苯基硼酸，溶于38ml丙酮和2ml蒸馏水的混合液中。标准试剂配制：称取25mg3-氯-1，2-丙二醇，用200g/LNaCl溶液定容至250ml，得到100mg/L的标准溶液。然后分别移取0.1ml，1ml，10ml至100ml容量瓶中，用200g/LNaCl溶液定容至刻度，即得0.1，1，10mg/L标准溶液。苯基硼酸，丙酮，正己烷，氯化钠均为分析纯。取样品或标准溶液5.0ml置于10ml带塞试管中，加入1.0ml衍生化试剂，摇匀后，置于90℃恒温箱中反应20min，停止加热，冷却后加入3.0ml正己烷，强力振荡1min，离心，取上层清夜进行GC/MS分析。2样品衍生化处理气相色谱：HP6890气相色谱，HP-1的30m×250μm×0.1μm石英毛细管柱，载气为高纯氦气，柱温100℃，升温速率15℃/min升至250℃，进样口温度250℃，柱前压50Kpa。质谱：HP5973GC/MS气相色谱-质谱联用仪，EI离子源，电子能量70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，接口温度280℃，电子倍增器电压2100V，检测方式SIM监测离子m/z147。气相色谱-质谱测定条件3-CPD产生机理：在酸水解法生产酱油的过程中，植物蛋白酸水解时伴随发生脂肪水解而产生丙三醇，丙三醇在盐酸作用下继续反应形成3-氯-1，2-丙二醇植物蛋白3.结果与讨论按上述实验条件分别进行标准溶液及样品溶液分析，以外标法计算3-CPD含量。3-氯-1，2-丙二醇苯基硼酸衍生物的质谱图见图1。其基峰为m/z147。我们选择m/z147进行SIM法，可获得满意的分离效果，其色谱总离子流图见图，保留时间为3.31min的峰即为3-氯-1，2-丙二醇苯基硼酸衍生物。我们分析了几种市面上的国产酱油，测定结果见表。可以看出，大部分酱油的3-CPD含量大大高于1.0×10-6，严重影响人体健康。样品名称3-CPD含量(ω/10-6)样品名称3-CPD含量(ω/10-6)生抽A0.4老抽A0.5生抽B82.5老抽B125.8生抽C220.7老抽C158.53-氯-1，2-丙二醇苯基硼酸衍生物质谱图色谱总离子流图1.PesselmanRL,FeitMJ.Determinationofresidualepichlorohydrinand3-chloropropanediolinwaterbygaschromatographywithelectron-capturedetection.JChromatogr,1988,439(1-2):4482.PlantingaWJ,VanToonWG,VanDerStegenGHD.Determinationof3-chloropropane-1,2-diolinliquidhydrolysedvegetableproteinbycapillarygaschromatographywithflameionizationdetection.JChromatogr,1991,555(1-2):311参考文献