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免疫组化超详细步骤ThismanuscriptwasrevisedonNovember28,2020免疫组化超详细步骤免疫组化一实验目的:分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况二实验原理:应用基本原理——抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使的(、酶、、)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和),对其进行定位、定性及定量的研究,称为或.三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素...

免疫组化超详细步骤
ThismanuscriptwasrevisedonNovember28,2020免疫组化超详细步骤免疫组化一实验目的:分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达情况二实验原理:应用基本原理——抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使的(、酶、、)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和),对其进行定位、定性及定量的研究,称为或.三实验试剂及耗材:经病理医生确认的肺癌组织切片、KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体、DAB显色试剂盒、抗原修复液、PBS、苏木素染料、1%盐酸酒精溶液、0.05%氨水、二甲苯、等四实验设备:切片机、4℃冰箱、显微镜、烤片机五主要试剂配置:缓冲液应用液ANaH2PO438.4g配成1000毫升溶液应用液BNa2HPO4·12H2O114.8g配成1000毫升溶液配制1000毫升PBS需要14毫升应用A液,36毫升应用B液,加8.5gNaCl。枸橼酸钠抗原修复液应用液A枸橼酸10.55g配成1000毫升溶液应用液B柠檬酸三钠(三水合柠檬酸三钠)29.01g配成1000毫升溶液配制500毫升抗原修复液需要9毫升应用A液,41毫升应用B液。苏木素染液配方:苏木素2g,无水乙醇250毫升,硫酸铝17.6g蒸馏水750毫升,碘酸钠0.2g,冰醋酸20毫升。先将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝溶于蒸馏水水中。两液溶解后将其混合,加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。抗体说明 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 建议的抗体稀释度N-Ras1:50-1:500H-Ras1:50-1:500K-Ras1:20-1:200六实验步骤:1组织常规石蜡切片厚度3-5um,防脱片捞片后晾干,放入72℃烤箱烤片2小时。2切片脱蜡水化程序⑴二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各12分钟;⑵无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各3分钟;(洗二甲苯)⑶95%乙醇3分钟;⑷85%乙醇3分钟;3自来水漂洗3分钟,洗涤一定要充分。4组织修复采用高温高压法:压力锅中加入pH6.0,0.01M抗原修复液约1000ml,切片插入塑料架上,放入压力锅,盖上锅盖(此时不扣上压力阀)1600W预热至沸腾,扣上压力阀1300W,待高压锅阀门喷气开始计时,修复时间为2分钟。5停止加热并用流水冲洗高压锅以降温,室温冷却。6将抗原修复后切片置自来水中,浸泡2分钟。将样本置于内源性过氧化物酶阻断剂3%H2O2,室温放置4分钟。(需要盖盖子)自来水洗2分钟,PBS缓冲液洗涤2分钟。7取出切片,擦干组织周围液体后滴加10%BSA封闭液,37℃孵育40分钟。滴加一抗(浓度配比,PBS稀释1:20、1:50、1:100、1:200)60ul,注意保持组织湿润状态但表面不能有液体,用试管使抗体全部覆盖组织面且不能有气泡,以使抗体能全部与组织接触。8滴加一抗后放入专用孵育盒内,4℃冰箱过夜。9切片放入PBS缓冲液中清洗3分钟×3次,充分洗涤,防止因洗涤不净引起的非特异性染色。(前两次的PBS倒掉)10擦干组织周围液体后滴加70微升辣根酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物(根据实际情况 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 覆盖样本),37℃温箱内孵育40分钟。PBS缓冲液洗涤3分钟×3次.11显色,滴加现配适量DAB显色剂(在1ml试剂2(DAB底物液)中,加入1滴(约50ul)试剂1(DAB浓缩液),混合液,即配成DAB工作液),配置DAB显色剂的容器在冰冻切片机旁边的冰箱里,其它试剂在入门口冰箱。室温显色,5-20分钟。自来水终止显色。第一遍的自来水需集中处理,自来水洗涤3分钟。12复染,苏木素染液中染色40秒,水洗1分钟。131%盐酸酒精溶液分化3秒,流水漂洗。14蓝化10秒,流水漂洗。15脱水,切片依次置于85%乙醇,95%乙醇各1分钟,无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中各2分钟。16透明,切片依次置于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各2分钟17中性树胶封片。
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Duan050176
从事玻璃产品研发将近1年,对公司研发流程及玻璃产品工艺有一定的了解
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