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血小板膜表面抗体测定

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血小板膜表面抗体测定血小板膜表面抗体测定方法流式细胞仪(BeckmanCoulter,贝克曼库尔特)原理:直接免疫荧光法。FITC标记的各型多克隆抗体,加到经离心富集的血小板中,与血小板膜上的相应的IgG-Fc片段结合,经过洗涤(和固定)等步骤后,在流式细胞仪上进行分析。标本采集与处理受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态,空腹采血。采集部位静脉采血抗凝剂EDTA或肝素抗凝血要求1.样本量至少1ml。.样本应在采集后6小时内完成,冷冻的标本或已固定的标本不能用。.样本血小板计数应在150-450×109/L之间。若>450×109/...

血小板膜表面抗体测定
血小板膜表面抗体测定方法流式细胞仪(BeckmanCoulter,贝克曼库尔特)原理:直接免疫荧光法。FITC标记的各型多克隆抗体,加到经离心富集的血小板中,与血小板膜上的相应的IgG-Fc片段结合,经过洗涤(和固定)等步骤后,在流式细胞仪上进行分析。标本采集与处理受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态,空腹采血。采集部位静脉采血抗凝剂EDTA或肝素抗凝血要求1.样本量至少1ml。.样本应在采集后6小时内完成,冷冻的标本或已固定的标本不能用。.样本血小板计数应在150-450×109/L之间。若>450×109/L,样本需要稀释,用PBS稀释;若<150×109/L,应多采集进行富集达到流式 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 的细胞数。.溶血样本不能用。试剂品牌剂型规格贮存联科成分1:单克隆抗体液体1ML2—8℃2:全血溶血试剂液体A:甲酸液体70ML室温B:碳酸钠等液体32ML室温C:多聚甲醛液体14ML室温3:鞘液液体20L室温4:清洗液液体5L室温5:荧光微球液体10ML2-8℃质控品BEKAMANCOULTER产品,未开瓶的试剂于2-8℃保存,可在有效期内保持稳定,稀释的试剂于2-8℃可稳定2周;每天校准一次:遇特殊情况随时进行校准。仪器BeckmanCoulterEPICSXL/FC500/Altra操作:富集血小板法:1)800r/min*15min,取上清,2)加4-5ml鞘液,2000r/min*3min,弃上清,重复一次。分别向已编好号的试管中加入10ul单克隆抗体和同型对照(IgG-FITC)分别向试管中加入准备好的10u1含血小板的PBS(血小板的量约为106)(血小板若在正常范围,稀释到原量直接取10u1。)。混匀,避光,室温孵育20-30分钟洗或不洗,上机测样全血法:1)加4-5ml鞘液,1500r/min*15min,弃上清,后同上3)-6)报告结果报告百分数操作性能精密度批内五次重复CV<2%灵敏度500—1000个荧光素分子参考值IgA<2.98%IgG<3.04%IgM<3.0%IgD<2.91%临床意义为免疫性血小板减少性紫癜(ITP)诊断、治疗、预后估计的重要指标,在ITP、胶原性疾病时升高。方案(Protocol)
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