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DNA连接酶与DNA聚合酶的比较

DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板需要DNA的一条链为模板游离的DNA片段单个的脱氧核苷酸形成完整的DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制相同点不同点模板作用对象作用结果用途第1页/共6页PCR技术与DNA复制的比较DNA复制PCR技术解旋酶催化DNA在高温作用下变性解旋细胞内（主要在细胞核内）细胞外（主要在PCR扩增仪内）DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶（Taq酶）细胞内温和条件需控制温度，在较高温度下进行区别解旋方式...

DNA连接酶与DNA聚合酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板需要DNA的一条链为模板游离的DNA片段单个的脱氧核苷酸形成完整的DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制相同点不同点模板作用对象作用结果用途第1页/共6页PCR技术与DNA复制的比较DNA复制PCR技术解旋酶催化DNA在高温作用下变性解旋细胞内（主要在细胞核内）细胞外（主要在PCR扩增仪内）DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶（Taq酶）细胞内温和条件需控制温度，在较高温度下进行区别解旋方式场所酶温度条件合成的对象DNA分子DNA片段或基因联系①模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成②原料：均为四种脱氧核苷酸③酶：均需要DNA聚合酶进行催化④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸第2页/共6页基因工程的概念基因工程的别名DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→ 表达结果人类需要的新的生物类型和生物产品第3页/共6页目的基因导入受体细胞微生物细胞农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射法常用方法生物种类体细胞或受精卵将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物以农杆菌转化法为例：将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达转化过程植物细胞动物细胞Ca2+处理法受体细胞受精卵原核细胞Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子第4页/共6页目的基因的检测与鉴定方法检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因,采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂交技术分子水平检测导入DNA分子转录翻译除了分子检测外，还需要进行个体生物学水平的鉴定，如做抗虫或抗病接种实验等检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原—抗体杂交技术个体水平鉴定第5页/共6页谢谢您的观看！第6页/共6页

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