外周血细胞形态学检查PPT课件

外周血细胞形态学检查赤峰学院附属医院检验科张皓*血细胞分析是临床诊疗工作中常做的检验项目，血细胞分析仪广泛用于全血细胞计数，随着自动化血细胞分析仪的普及和仪器性能的提高，使检验结果更加准确，但是全自动血细胞分析仪也存在着内在缺陷，由于血细胞形态的多样化和复杂性，只能提供血细胞多少、大小、分布及相互间比例，得出正常或异常的提示，不能直接提供血细胞质量改变的确切信息，如过度依赖会出现漏诊和误诊。对于发热、贫血和血细胞异常的标本，在鉴别感染性疾病和非感染性疾病，病毒性感染和细菌性感染等必须做外周血的形态学检查。*血液涂片制备取末梢血1滴，置于载玻片的一端，以边缘平滑的推片（推片两端应平整光滑，比载片稍窄或磨去两角）的一端，放在血滴前方，逐渐后移接触血滴，血液立即沿推片散开。然后将推片与载玻片保持30-45度角，平稳地向前推动至载玻片的另一端，载玻片上便留下一薄层血膜。血涂片制成后，立即在空气中挥动，迅速干燥，以免血细胞形态改变。血膜干燥后，用铅笔在厚血膜处写明病人姓名或编号。血液涂片制备是血液学检查重要的基本技术之一。一张良好的血片，厚薄要适宜，头体尾要明显，细胞分布要均匀，血膜边缘要整齐，并留有一定的空隙。*试剂配制1、瑞氏染液将瑞氏染料0.1g粉放在清洁干燥的乳钵里，加少量甲醇，充分研磨使染料溶解。将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料全部溶解，60毫升甲醇全部用完为止。或将瑞氏粉和甲醇直接置于棕色瓶中，加适量碎玻璃，立即振荡混合5分钟（一般600ml甲醇加瑞氏粉1.2～1.5g），置37℃水浴中3天，每天振摇混合2～3次，促其溶解，待一周后方可使用。新配染料的染色效果较差，放置愈久天青愈多，染色效果愈好。染液中也可加中性甘油3.0ml，防止甲醇挥发，使细胞染色较清晰。2、磷酸盐缓冲液(pH6.4～6.8)磷酸二氢钾（KH2P04）0.3g，磷酸氢二钠(Na2HP04)0.2g，蒸馏水加至1000.0ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH,塞紧瓶口贮存。*染色方法1、将制备好血涂片平放在染色架上。2、先加瑞氏染液数滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.5～1min。3、按1：1或1：2加磷酸盐缓冲液，与染料混匀，染色10min左右。4、用接近中性的水冲去染液，待自然干燥或用滤纸吸干后，用油镜观察。5、染色结果在正常情况下，血膜外观为淡紫红色。在显微镜下红细胞染粉红色，在厚薄均匀处略有碟状感，白细胞胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩，细胞核染天青紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨。*一、外周血中白细胞形态检查1、正常白细胞形态中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。正常白细胞可自然退化变性，正常的血涂片上也可以见到变形或破裂的细胞，数量极少*******2、异常白细胞形态（中性粒细胞和淋巴细胞）（1）中性粒细胞1）中性粒细胞的毒性变化大小不均；中毒颗粒；空泡变性；Dohle小体；退行性变，2）棒状小体；3）中性粒细胞胞核的异常形态；常见多分叶核中性粒细胞4）其他异常形态粒细胞，多于遗传性疾病有关注意：中毒颗粒、嗜碱性粒细胞、染色偏碱的中性颗粒的鉴别*********************（2）淋巴细胞1）异形淋巴细胞在传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、流行性出血热等病毒性感染时或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。正常人外周血中偶见不超过2%，传染性单核细胞增多症、流行性出血热时，可高达10%。形态特征分为3型:①I型(空泡型)：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状，常偏位。染色质粗糙，呈粗网状或小块状，排列不规则。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状*②Ⅱ型(不规则型)：胞体较大，外形常不规则，可有多数伪足。核形状圆形或不规则，染色质较粗糙致密。胞质丰富，染淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深，一般无空泡，可有少数嗜天青颗粒。③Ⅲ型(幼稚型)：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见1～2个核仁。胞质深蓝色，可有少数空泡。*2）放射线损伤后淋巴细胞形态变化3）淋巴细胞性白血病时形态学变化（3）浆细胞：见于多发性骨髓瘤细胞、反应性浆细胞增多症、疟疾、黑热病、伤寒等。莫氏细胞；火焰状浆细胞；拉塞尔小体*********二、外周血中红细胞形态检查各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段，引起红细胞相应的病理变化，导致红细胞产生特殊的形态改变，与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。*1、正常红细胞形态：6～9μm2、异常红细胞形态（1）红细胞大小不一1）小红细胞：直径﹤6μm2）大红细胞：直径﹥10μm3）巨红细胞：直径﹥15μm4）红细胞大小不均：同一患者的红细胞之间直径相差一倍以上。大红细胞直径可达12μm，小红细胞直径仅2.5μm。见于巨幼红细胞性贫血，严重的增生性贫血等***（2）红细胞形态异常1）球形红细胞：遗传性球形红细胞增多症2）靶形细胞：缺铁贫，其他溶血性贫血等3）椭圆形红细胞：杆状，长度大于宽度3～4倍，遗传性椭圆形红细胞增多症，缺铁贫，巨幼贫等4）镰形细胞：镰形红细胞性贫血5）口形细胞：遗传性口形细胞增多症，溶贫等6）棘状红细胞：酒精性肝病，脾切除7）新月形红细胞：红细胞残缺不全，体积大。见于溶血性贫血*8）红细胞缗钱状形成：多发性骨髓瘤，原发性巨球蛋白血症等9）泪滴形红细胞：贫血、骨髓纤维化10）裂红细胞：红细胞碎片，DIC、严重烧伤11）红细胞形态不整：某些感染或严重贫血。如巨幼红细胞性贫血12）有核红细胞：病理情况有溶血性贫血；造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤；慢性骨髓增生性疾病；脾切除后************（3）红细胞染色反应异常1）正常色素性：急性失血、再生障碍性贫血、白血病。2）低色素性：见于缺铁贫，珠蛋白生成障碍性贫血等3）高色素性：见于巨幼贫，球形红细胞4）嗜多色性：红细胞呈淡灰蓝或紫灰色，正常人外周血中约占1%，其增多反应骨髓造血功能活跃，红细胞系增生旺盛。见于增生性贫血，尤见于溶血性贫血、急性失血性贫血5）细胞着色不一：双形性贫血，多见于铁粒幼红细胞性贫血****（4）红细胞内出现异常结构1）嗜碱性点彩红细胞：变性的核糖体凝集而成，多见于铅中毒2）染色质小体：一个或多个紫红色圆形小体，是核的残余物质，多见于溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血、脾切除术后3）卡-波环：淡紫红色线状体呈环形或8字形，提示溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血、脾切除术后、白血病4）寄生虫：疟原虫、微丝蚴等*******三、外周血血小板形态检查（一）正常血小板形态两面微凸圆盘状无核细胞，直径2～3μm，约为红细胞的1/3～1/2。年轻的血小板体积大，成熟的体积小。（二）异常血小板形态1、大小异常（1）大血小板：直径4～7μm，巨型血小板﹥7μm，大小不均和大血小板增多是血小板生成活跃的证据。主要见于特发性血小板减少症、粒细胞白血病、血小板无力症、MDS和脾切除后等。*（2）小血小板：直径﹤1.5μm，骨髓受抑制，如再障、缺铁性贫血时，血小板常偏小。2、形态异常影响因素多，不规则血小板和畸形血小板比值﹥10%，才有临床意义。3、聚集性和分布异常间接反应血小板功能*****外周血细胞形态学检查在临床的应用是非常广泛的，当造血系统出现各种疾病，造血功能出现紊乱时，外周血细胞形态学的质和量均会出现变化，产生幼稚细胞、有核红细胞、细胞内部出现异常结构等，因此外周血细胞形态学检查可提供许多疾病的诊断和治疗效果，预后状况，从中发现许多线索或证据，对于常见的贫血、白血病、不明原因的出血、感染等疾病得到及时明确的诊断和治疗有极其重要的应用价值。**