51DNA的粗提取与鉴定教案新人教版选修1

PAGEPAGE1山西省太原市十六中2014年 高三生物 高三生物二轮备考计划高三生物备考计划人体内环境的稳态课件高三生物一轮教学计划高三生物二轮备考计划 5.1DNA的粗提取与鉴定 教案 中职数学基础模块教案 下载北师大版¥1.2次方程的根与系数的关系的教案关于坚持的教案初中数学教案下载电子教案下载 新人教版选修1【教学目标】理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理；理解相关溶液的作用机理。【重点难点】重点：提取DNA的相关原理和步骤难点：提取DNA的相关原理和步骤读书指导法、启发式教学【教学流程】一、基础知识：自主预习 一、实验目的：初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。二、实验原理：1．DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。思考题1：DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？对此有什么应用？[思考题2：利用什么原理来将DNA与蛋白质分离开？2．DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解，但对没有影响。大多数蛋白质不能忍受℃的高温，而DNA在℃以上才会变性。能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3．细胞在中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂，据此可得到含有核DNA的溶液。4．DNA的鉴定：在条件下，DNA遇会被染成色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。三、实验材料：鸡血细胞液思考题：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，他们能否选用牛、羊、马血做实验材料？为什么？四、方法步骤1．制备鸡血细胞液在鸡血中加入质量浓度为0．1g/mL的溶液，与新鲜的鸡血混合并搅拌，然后静置一天或离心机离心约2～3min，除去上清液；（防止血液凝固，使血细胞与血浆分离）2．提取鸡血细胞的细胞核物质：取20mL蒸馏水与约5～10mL的鸡血细胞液混合并充分搅拌，然后用单层纱布过滤，取滤液于烧杯中；思考题：加入蒸馏水的目的是什么？为什么能达到此目的？3．溶解细胞核内的DNA：加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态；DNA在高浓度氯化钠溶液中溶解度最4．析出含DNA的黏稠物：沿烧杯内壁慢慢加入蒸馏水并轻轻搅拌，至白色丝状粘稠物不再增加时停止加水，然后用多层纱布过滤，取纱布上的粘稠物；DNA的溶解度随氯化钠溶液浓度的降低而思考题：此时加入蒸馏水的目的是什么？这次过滤与上次过滤的目的一样吗？为什么？5．将DNA的黏稠物再溶解：用镊子夹取纱布上的粘稠物放入20mL浓度为氯化钠溶液中，搅拌至完全溶解，然后用两层纱布过滤，取其滤液放入小烧杯中，因为DNA在高浓度氯化钠溶液中溶解度最大思考题：过滤的目的是什么？为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？6．提取含杂质较少的DNA：DNA不溶于酒精，出现沉淀。方法：处理后的过滤液加入等体积、冷却的95%的酒精混合搅拌，待出现丝状物时用玻璃棒将其卷起；思考题：这一步骤的目的是什么？为什么加入的酒精需要冷却的？7．DNA的鉴定：取两支试管，各加入0．015mol/L的氯化钠溶液5mL，一支加入提取的DNA，然后两支各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后置于沸水中加热5min，等试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。思考题：为什么要设置对照组？实验中能观察到什么现象？【典例解析】例1在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是（）A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂，降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂，增大DNA溶解度D.使血细胞破裂，提取含杂质较少的DNA例2在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是（）A.防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加速凝血例3DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性，随着NaCl溶液的变化而变化。（1）请在下列NaCl溶液中选出溶解度能使DNA析出最彻底的一种（）和溶解度最高的一种（）A.0.14mol/lB.2mol/lC.0.15mol/lD.0.3mol/l（2）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以____________，可以推测溶于酒精中的物质可能有____________。（3）利用DNA与_____变蓝色的特性，将该物质作为鉴定______的试剂。其实验过程要点是向放有_____的试管中加热4ml的____。混合均匀后，将试管置于___5min，待试管______，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA耐___温。【达标反馈】1.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（）A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯2．洗涤剂能够瓦解（），但对DNA没有影响。A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质3．在沸水浴的条件下，DNA遇（）会被染成蓝色。A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺4．在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（）A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷5．下列操作中，对DNA的提取量影响最小的是（）A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B.搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出DNA粘稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却6．DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（），静置2—3min，溶液中会出现白色丝状物。A.0．9%的NaClB.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液7.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（），防止血液凝固。A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红8.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（）A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出9.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（）分解蛋白质。A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶【 反思 小班合家欢主题反思小班合家欢主题审议反思小班合家欢反思恩怨历尽后的反思下载恩怨历尽后的反思下载 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf 】【典例解析】 答案 八年级地理上册填图题岩土工程勘察试题省略号的作用及举例应急救援安全知识车间5s试题及答案 ：例1解析：在该实验过程中，第一次加入蒸馏水的目的是使血细胞过度吸水而破裂，以便核物质溶解。第二次加入蒸馏水是为了降低NaCl浓度至0.14mol/l，因为此时的DNA溶解度最小，可使DNA析出。例2解析：柠檬酸钠的作用是利用柠檬酸根离子与血浆中Ca2+离子结合成柠檬酸钠，降低Ca2+离子浓度，使有关凝血酶活性降低。因此柠檬酸钠是抗凝血物质，防止凝血，有利于鸡血细胞液的制备。例3解析：根据实验原理可知DNA在0.14mol/l的NaCl溶液中溶解度最低，在高浓度2mol/l中，溶解度最高。DNA存在于染色体上，为了把DNA和其他物质分开，采取DNA不溶于酒精的方法，目的是除去杂质；利用DNA与二苯胺（沸水浴）成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。答案：（1）A；B（2）除去杂质；某些脂类、蛋白质、糖类或其他大分子物质（3）二苯胺；DNA；DNA；二苯胺试剂；沸水中水浴加热；冷却后；高【达标反馈】参考答案：答案：DBDBBDCCC解释：1、蛋白水解酶简称蛋白酶，能够催化多肽或蛋白质水解，所以这种酶可以分解血细胞中的所有蛋白质，有利于DNA的释放。所以选：D2、洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放。所以选：B3、DNA与二苯胺沸水浴呈现蓝色，所以选：D4、鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少。再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样就可以减少提取过程中DNA的损失。所以选：B5、DNA存在于细胞核中，只有使细胞在蒸馏水中充分破裂，才能释放出DNA等核物质。B选项中的操作对DNA几乎没有影响，而其他3项的操作对象直接是DNA，自然相比起来B的影响最小，所以选B.6、DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精，所以选D。7、柠檬酸钠被称为抗凝血剂，能起到防止血液凝固的作用,所以选C。8、当Nacl浓度在0.14mol/L时，DNA溶解度最小。向浓的NaCl溶液中，缓慢加入蒸馏水会降低DNA的溶解度，DNA会析出，所以选C。9、嫩肉粉中的蛋白酶制剂是用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或米曲霉蛋白酶制成的，而蛋白酶可以分解蛋白质，所以选C。教学随想