时间分辨技术的原理最新资料 时间分辨免疫荧光法检测乙型肝炎病毒标志物 &nbsh1; 欢迎阅读本文档，希望本文档能对您有所帮助! 时间分辨技术的原理 目前最先进的免疫检测技术： 1、 &n...
时间分辨技术的原理
目前最先进的免疫检测技术：
1、 时间分辨原理：
用三价稀土离子及其鳌合剂作为示踪物，代替荧光物质、同位素或酶，标记蛋白质、多胎、激素、抗体、核酸探针或生物流行性细胞，当反应体系发生后，用时间分辨仪器测定最后产物中荧光强度。根据荧光强度或相对荧光强度比值，来判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析之目的。
2、 时间分辨原子标记物的特点：
l 发射光和激发光有较大的STOKES位移——高特异性
l 长寿命荧光，降低其他物质的荧光干扰——高灵敏度
l 半衰期长达几十万年，试剂受干扰小——高稳定性
原子标记与大分子标记物的对比
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原 子 标 记 物 |
大 分 子 标 记 物 |
标记位点 |
多个,可达20个 |
只有1个 |
对被标记物蛋白活性的影响 |
影响小,基本无影响 |
影响大,经常影响蛋白活性 |
对被标记物空间结构的影响 |
无影响,保证稳定性 |
影响大,造成试剂的不稳定 |
受环境因素的影响 |
影响小 |
影响大,温度影响 |
3、波长分辨：
l 标记离子的荧光激发光波长范围较宽，发射光光谱范围较窄，是类线光谱，有利于降低本底荧光强度，提高分辨率。
l 激发与发射光之间有一个较大的STOKES位移，有利于排除非特异荧光的干扰，增强测量的特异性。
4、时间分辨：
l 标记离子螯合物产生的荧光强度高，寿命长，有利于消除样品及环境中荧光物质对检测结果的影响。
l 每一秒名检测样品1000次，取其中不受干扰的400次的均值作为测定值，有利于提高检测的准确性。
时间分辨技术取代酶免、放免是免疫检测技术发展的必然趋势！
RIA（放免）
l 放射性（125I），对环境和身体的危害，已经为重视环保的国家逐步取消，如整个欧洲仅尚存几个放免试验室。
l 125I半衰期短，导致试剂的有效期短，需每次定标，造成很大的浪费。
l 由于标记物（125I）的不断变化，带来药盒批间、批内较大的变异，标准曲线无法保存备用。
ELESA（酶免）
l 灵敏度、重复性不及放免，易造成漏检和假阳性。
l 酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响，导致稳定性、重复性不好。
与其它技术的相对优势：
（1）、是现有的免疫检测方法中灵敏度最高的
（2）、是现有的免疫检测方法中稳定性最好的
（3）、多标记检测是目前所有免疫检测技术中独一无二的
TRF技术与电化学发光的比较 |
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时间分辨荧光 |
电化学发光 |
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标记物 |
四种原子:Eu,Sm,Te,Dy |
一种原子:钌 |
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多标记技术 |
有 |
无 |
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科研项目 |
能(1000多种科研项目) |
无 |
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试剂种类 |
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浙公网安备 33021202002483