第六章 转基因微生物的安全性评价

崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全第六章崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全 植物用转基因微生物 动物用转基因微生物 其它转基因微生物崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全一、植物用转基因生物安全性评价崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全1.植物用转基因微生物的发展现状 定义：植物用转基因微生物主要是指通过重组DNA技术研制的、直接应用于植物上的微生物。 目前国内外已经生产应用或已显示出良好应用前景的植物用转基因微生物按其用途可以大体上分为防病杀虫微生物和固氮微生物2大类，通常称为微生物农药和微生物肥料。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（1）微生物肥料 定义：具有改善植物氮、磷、钾及微量元素营养，能够促进植物生长的生物制剂的总称，主要包括可自生或与植物共生，能增加氮素供应的根瘤菌与联合固氮菌，用于增加磷、钾营养的解磷、解钾细菌，以及促进植物生长作用的根际促生微生物(PGPR)等。 八十年代初至今，我国微生物肥料生产及应用由于其增产明显，改善品质、特别是对环保的特殊作用，呈上升趋势。 我国转基因联合固氮菌和共生固氮菌研究也获得了显著进展，据不完全统计，正在研究开发的固氮微生物有8种，涉及基因12种(不包括标记基因和报告基因)。我国转基因联合因氮菌和共生因氮菌研究也获得了显著进展，据不完全统计．正在研究开发的固氟微生物有8种，涉及基因12种(不包括标记基因和报告基因)。其中转基因水稻联合固氮菌和玉米联合固氮菌显示出提高禾本科作物固氮能力、节约氮肥的作用，已通过农业部基因工程安全性评审，分别获准进入商品化生产和环境释放试验(表5．1)。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全已批准环境释放的植物用转基因微生物项目崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）微生物农药微生物农药是指非化学合成、具有杀虫防病作用的微生物制剂，如微生物杀虫剂、杀菌剂、农用抗生素等。这一类微生物包括杀虫防病的细菌、真菌和病毒。引起昆虫致病的病原微生物主要有真菌、细菌、病毒、线虫（属多细胞动物）、立克次氏体和原生动物（微孢子虫）随着生物防治的推广应用，微生物农药的研究与生产逐渐成为生物防治的支柱产业。1992年，“世界环境与发展大会”的第21条决议指出“要在全球范围内控制化学农药的使用，到2000年生物农药的产量占农药总量的60%”。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全微生物农药种类及相关的微生物类群 微生物农药种类 微生物类群 细菌 真菌 病毒 原生动物 线虫 微生物杀虫剂微生物杀菌剂微生物除草剂微生物杀鼠剂微生物生长调节剂微生物植物杀虫剂 芽孢杆菌放线菌赛氏杆菌放线菌放线菌沙门氏菌芽孢杆菌Bt转基因植物 白僵菌绿僵菌拟青霉鲁保一号920生产菌 NPVCPVGV 微孢子虫 斯氏线虫异小杆线虫崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全①杀虫微生物 苏云金芽抱杆菌(Bt)是当今研究最多，用量最大的杀虫细菌。Bt杀虫活性成分主要是σ-内毒素(伴孢晶体)，称为cry基因。 美国科学家将Crylc基因导入库斯塔克亚种以形成产品和新制剂，它能够有效的杀死甜菜夜娥等灰翅夜娥属的害虫。 将Cry3A基因导入库斯塔克亚种既可以杀鳞翅目的害虫，也可杀鞘翅目的害虫，并以此形成新的杀虫转基因微生物产品。 把cry基因转入蓝细菌、极毛杆菌和根瘤茵中，成功地改善了杀虫晶体蛋白在水体和土壤中的活性，使苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白可以用于防治蚊子幼虫以及地下害虫。苏云金芽抱杆菌崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒也是一类重要的、较早应用的昆虫病原微生物。作为微生物杀虫剂，杆状病毒具有优异的性能。杆状病毒的宿主范围很窄，对其他非目标昆虫的影响很小，对人畜、天敌和环境安全。杆状病毒的杀虫效果较好，如在虫害发生前期使用，其防治效率可达99％以上。杆状病毒产生的包含体具有侵染性病毒颗粒，对环境的生物稳定性有一定作用。这种特点也便于利用传统技术来制造和应用病毒。 目前，国内外正式注册商品化的杆状病毒杀虫剂有近20种。 但是，野生型杆状病毒存在杀虫速度较慢，毒力较低，对高龄害虫需用量大等缺点。解决这一问题的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 是对其进行基因重组改造。 目前，已成功实现重组表达的外源基因蛋白有蝎子毒素、马(黄)蜂毒案、几丁质酶基因、利尿激素、保幼激素酯酶等。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全昆虫病原真菌 昆虫病原真菌对害虫具有广泛的寄生和致病性，但因其遗传背景复杂、杀虫分子机理和遗传改良的研究较昆虫病原细菌和病毒相对滞后。 从绿僵菌中分离了一类似枯草菌素的蛋白酶，该酶的编码基因prl在工程菌表达后使烟草天娥的食量减少40％，死亡时间加快一倍以上。 澳大利亚Grace等(2003)利用柄锈菌属真菌来防除胡萝卜地的欧洲千里光，并进行了田问试验，其防治效果可与人工除草相比。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全②防病微生物 许多微生物对植物病原菌具有抑制和拮抗作用。不少细菌、放线菌和真菌通过产生抗生素或争夺营养与生存空间而阻止病害的发生与蔓延，但防治病害的效果也受到复杂的环境条件的影响而不稳定或持久。 我国南方地区普遍应用井冈霉素防治水稻纹枯病，平均每年防治面积达到1000万公顷以上。 农用抗生素在农作物病害防治中占有重要地位。公主岭霉素、农抗120、武夷菌素、春雷霉素等农用抗生素品种相继研制和利用。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全2.植物用转基因微生物的安全性评价①微生物在生物安全性上的特点 从生物安全的角度看，与高等动、植物相比，微生物的显著特点是个体小、繁殖快、数量大、易变异。 微生物的数量大：通常1克普通的土壤中约台有上亿个微生物。 微生物具有很强的遗传变异与适应能力。 微生物有分布广泛、生命力强、容易扩散等特点。 考虑到微生物的上述特点，转基因微生物成为有害微生物对地下水、土壤和食物链产生污染和广泛传播造成危害的可能性，就自然地成为社会公众担忧的安全隐患之一。 而生态学家更关心大量人工培养生产的转基因微生物在农田和生态系统长期应用后，会不会对作物生产力和可持续生态系统造成显著不利影响。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全②植物用转基因微生物的相对安全性 安全：大多数大规模生产应用的植物用微生物都是安全的，对人类健康和生态环境没有显著的不利影响 存在隐患：例如，1960年，澳大利亚引进myxoma病毒对成灾的野兔进行生物防治，结果使兔子大批死亡，引发了生态问题和经济混乱1980年，前苏联100多家工厂生产单细胞蛋白，一度造成大气中的蛋白雾污染，使人发生支气管哮喘、过敏反应和免疫力下降，还有数以千计的饲养动物因食用单细胞蛋白饲料而死亡。这样的事例，虽是极少，主要是因为没有进行科学的安全性评价造成的。 当前已经批准商品化生产和己知具有商品化生产应用前景的植物用转基因微生物产品主要为细菌和病毒制剂。对这些转基因微生物的应用具有多重安全保障。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全②植物用转基因微生物的相对安全性 首先，这些转基因的受体微生物(例如，防治害虫的苏云金芽泡杆菌、棉铃虫核型多角体病毒，在豆科植物上因氮的根瘤菌)通常都有深入系统的科学研究的基础以及在国内外农业生产上长时间安全使用的历史和经验。所转移的外源基因，不仅是来自安全的生物，对其遗传背景和生物学功能也都相当清楚，而且其基因操作方法往往还能进一步增加转移基因的安全性。 其次，转基因微生物从研究开发到生产应用的各个环节都要进行安全性试验，通过所在单位和农业部门有关生物安全委员会的分阶段评审把关。 最后，即使进入大规模生产应用之后，也还要继续进行长期应用的跟踪观察和监测。 通过这些程序，植物用转基因微生物环境应用的安全性应该是清楚的和可控制的。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全3.植物用转基因微生物安全性评价的主要内容 对植物用转基因微生物及其产品进行生物安全性评价的主要目的是，针对植物用转基因微生物及其产品在研究、开发、生产、使用、越境转运、废弃物处置等各个环节中的有关活动，从技术上分析其可能对人类健康和生态环境造成危害的潜在危险程度，确定其安全等级，为采取相应的安全管理措施、防范和控制有关活动的潜在危害提供科学依据。 生物安全性评价的主要内容可以划分为对人类健康的潜在危险和对生态环境的潜在危险两个方面。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（1）对人类健康的潜在危险致病性：植物用转基因微生物对人的致病性主要是指其感染并致人发病的能力。包括毒性、致癌、致畸、致突变、致过敏性等。抗药性：一方面，转基因微生物可能直接与人接触，另一方面，转基因微生物及其质粒上携带的抗药性基因有可能通过水平基因转移使人体内的细菌（如大肠杆菌）获得该基因，使人类健康面临新的问题。食品安全性：植物是人类和畜禽的主要食物来源。转基因微生物及其产品应用于植物之后，对植物作为食品、饲料和添加剂的安全性会不会有影响?崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）对生态环境的潜在危险致病性和毒性：转基因微生物的致病性需要结合受体微生物和基因操作两方面情况进行分析，在一定的阶段（如中间试验、产品登记）还应通过试验研究确定。生存竞争能力：植物用微生物的生存竞争能力包括存活力、繁殖力、持久生存力、定殖力、竞争力、适应性和抗逆能力等。一般地，这些能力越强，微生物的生存竞争力就越强，其对生态环境造成影响的可能性也就越大转基因根瘤菌的情况：1988-1994年在美国进行的12次导入抗药性基因和固氮基因的根瘤菌田间小区试验中，工程菌的定殖能力、适应性、竞争能力和一般土壤生态学特性都与自然菌株基本一致。传播扩散能力：指微生物通过土壤、空气、水、植物残体、昆虫或其他动物等进行近距离或远距离转移的能力。微生物传播扩散能力越强，其对环境影响的风险性越大崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）对生态环境的潜在危险（续）遗传变异能力：指转基因微生物及其基因（特别是转基因）在不同生理生态条件下遗传件的稳定性及其发生适应性变异或突变等的能力。多数微生物是以单细胞甚至非细胞的简单形态直接在自然界生活，容易随环境条件的改变发生变异。生长繁殖快，易产生变异。遗传转移能力：指转基因微生物（特别是转基因）向非转基因的本地微生物和动植物发生遗传物质转移的能力。对生态环境的不利影响：转基因微生物广泛传播扩散或通过遗传变异成为有害生物或与其他协同作用增强对生态环境的危害性；转基因微生物的基因向其他生物转移产生新的有害生物或使原有害生物加重其危害性；对非目标生物造成危害等。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全在生态环境评价时一般要重视以下几点：确定主要影响对象和危险类型；划定可能受影响的地域范围，预测受影响的严重程度；考查拟采取监控措施的有效性。 其中包括对未应用转基因微生物即生态环境未受影响之前，该地域内土著生物个体种群、群落、生态系统的自然状态，以及对土壤、空气、水体等有关信息 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 的考查，工作地点的生态环境条件中对转基因微生物存活、繁殖、传播扩散的有利和不利因素的分析，是否存在可能从转基因微生物中接受转基因的生物?是否存在需要重点保护的生物?崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4.安全性评价的方法和资料要求（1）安全性评价的方法 安全性的综合评价一般包括3个方面：遗传工程体及其产品本身的安全等级，工作地点和环境和监控措施的有效性。 安全性的评价是在对转基因微生物及其产品的安全等级、工作目的、地点和环境的安全性和拟采取的监控措施的有效性等相关资料进行综合考查的基础上完成的。 转基因微生物的安全等级根据受体微生物的安全等级和基因操作对受体微生物安全性的影响类型和影响程度来确定。 转基因微生物产品的安全等级一般根据转基因微生物的安全等级以及产品的加工和使用对其安全性的影响程度来确定。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）安全性评价的资料要求受体微生物的生物学特性和安全性包括受体微生物的名称，分类地位，自然习性，地理分布，应用情况，在环境中定殖、存活、传播扩散和发生遗传变异的能力、机制及其影响因素，对人畜的毒性、致病性和致敏性，对其他植物、动物和微生物等非目标生物的影响和潜在危险程度等。基因操作方法和安全性包括目的基因的来源、结构、功能和用途，载体的来源、特性和安全性，转基因方法、重组DNA的结构、复制特性和安全性，目的基因表达的稳定性等。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）安全性评价的资料要求遗传工程体及其产品的特点和安全性与受体微生物比较，遗传工程体及其产品在主要生物学特性和安全性方面有何改变和特点，包括在环境中定殖、存活、传播扩散、遗传变异和遗传转移的能力，对人畜的毒性、致病性和致敏性，对植物、农田动物和其他微生物等非目标生物的影响和潜在危险程度，特别是环境中的本地近缘微生物和其他生物从转基因微生物中获得目的基因的可能性等。工作地点和 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ：包括工作目的，工作地点，工作起止时间，应用植物种类和面积等。拟采取的安全控制措施。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全5.案例分析防治果树根箔病的放射土壤杆菌K1026工程苗商品化生产登记（1）背景简介这是世界上第一例商品化生产的转基因微生物杀茵剂。申请者：澳大利亚BioCare技术有限公司申请类型：以“NoGall”为产品名登记并在全国释放（1988年底）涉及生物及遗传操作方法：受体生物为放射土壤杆菌。将K84菌株的K84质粒上负责细菌接合转移的编码基因tra+及其相邻的EcoRI片段切除后经同源交换构建成工程茵K1026。用途：通过基因操作防止细菌间遗传物质的接合转移，从而提高生物防治菌剂对植物根癌病防治效果的稳定性。生产方法：在工厂进行发酵和商品化生产。试验或生产地点：新南威尔士州和全国.试验面积或生产规模：在全国范围内使用。应用植物：果树和其他植物。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）评审结果该菌对人类健康和环境没有危险，于1991年9月批准登记在全国作为杀菌剂使用。理由和依据1)受体菌放射土壤杆菌K84菌株为土壤微生物，作为防治植物根癌病的生物杀菌剂在该国新南威尔士州登记，由RootNodule有限公司生产，在澳大利亚和世界上许多国家都有15年以上长期安全使用的记录。2)所进行的基因操作是原有有害基因的切除(共5.9kb)，没有导入外源基因。基因操作的结果是有效地防止了生防菌的遗传物质向病菌的转移，从而提高了防病效果的稳定性。3)试验研究结果表明，工程菌K1026与自然菌株K84之间在生态适应性、防病效果、生长温度(不能在37℃生长)、抗菌谱等方而没有明显差异。问题、建议及其他在环境释放前已与农药兽药委员会、工业能源部等部门协商。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全二、动物用转基因微生物的安全性评价崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全动物用转基因微生物定义：利用基因工程技术构建或进行修饰的动物用微生物，如细菌、病毒及其它微生物主要有两类疫病预防和控制——基因工程疫苗诊断制品动物食用——饲料用转基因微生物崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全基因工程疫苗 基因工程亚单位疫苗：是指它只含有病原体的一种或几种抗原，而不含有病原体的其他遗传信息。原则上讲，用这些疫苗接种动物，都可使之获得抗性而免受病原体的感染。 基因工程重组活载体疫苗 基因缺失疫苗 DNA疫苗：又称核酸疫苗或基因疫苗。基因工程疫苗（engineeringvaccine）使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组，制成DNA重组乙型肝炎疫苗；把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。基因工程疫苗是将病原的保护性抗原编码的基因片段克隆入表达载体,用以转染细胞或真核细胞微生物及原核细胞微生物后得到的产物.或者将病原的毒力相关基因删除掉,使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗基因工程亚单位疫苗(subunitvaccine)又称生物合成亚单位疫苗或重组亚单位疫苗。是指它只含有病原体的一种或几种抗原。而不含有病原体的其他遗传信息。原则上讲，用这些疫苗接种动物，都可使之获得抗性而免受病原体的感染。亚单位疫苗不合有感染性组分，因而无须灭活，也无致病性。自l981年成功地将口蹄疫病毒的抗原性多肽基因VP3克隆到大肠埃希氏菌内并制成用于牛和猪的疫苗之后，这种方法又成功地应用于猫白血病疫苗以及预防仔猪腹泻病的K88疫苗等的研制。用于亚单位疫苗生产的表达系统主要有大肠埃希氏菌、枯草杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳类细胞、转基因植物、转基因动物。基因工程亚单位疫苗分以下3类。1.细菌性疾病亚单位疫苗；2.病毒性疾病亚单位疫苗；3.激素亚单位疫苗。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全诊断制品利用基因工程技术生产的重组抗原蛋白用于诊断技术的建立ELISA崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全饲料用转基因微生物转植酸酶酵母表达抗菌肽的微生物崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全一、国内外研发及安全管理情况国外研发情况国内研发情况国内外安全管理情况崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（一）国外研发情况 转基因动物用微生物的研究与开发起步于20世纪80年代初 口蹄疫病毒是最早研究的对象 国际上发达国家对基因工程疫苗的研究与开发十分重视 已相继研制成功一些用于动物疫病免疫预防用的基因工程亚单位疫苗、基因工程重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、DNA疫苗等崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全1.基因工程亚单位疫苗 利用体外表达系统（如大肠杆菌，酵母，动物细胞，杆状病毒-昆虫细胞等）表达病毒的主要保护性抗原蛋白作为亚单位疫苗 不仅具有优良的安全性，而且便于规模化生产 利用非疫苗用蛋白作为抗原建立的诊断方法将可以区分亚单位疫苗免疫的动物和自然感染的动物崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全涉及动物病原 大多数禽、猪、牛等动物的病原体 免疫原性蛋白（保护性抗原） 口蹄疫病毒（FMDV）VP1、狂犬病病毒的囊膜蛋白G，禽流感病毒亚型血凝素（AIVHA蛋白），伪狂犬病病毒的囊膜糖蛋白gP50，新城疫病毒F和HN蛋白，传染性法氏囊病毒VP2蛋白，传染性胃肠炎病毒的纤突蛋白，鸡传染性贫血病病毒的衣壳蛋白（VP1）……….崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全2.基因工程重组活载体疫苗应用无病原性或弱毒疫苗株病毒和细菌作为载体，插入外源性保护基因，构建重组活载体疫苗。常用的载体：痘病毒、疱疹病毒、腺病毒或细菌等具有常规弱毒疫苗的所有优点便于构建多价疫苗利用非疫苗用基因或其表达产物可以建立鉴别诊断方法应用无病原性或弱毒疫苗株病毒和细菌，例如痘病毒、鸡痘病毒、火鸡疱疹病毒、伪狂犬病毒、大哩腺病毒以及卡介苗分枝杆菌和沙门氏菌弱毒疫苗株等作为载体，插入外源性保护基因，构建重组活载体疫苗。由于外源基因已是载体病毒或载体细菌“本身”成分，其所引起的免疫应答，常不低于完整病毒或细菌相应成分引起免疫强度，而且各成分之间一般不发生相互干扰或排拆现象，又因可以同时插入几个外源基因，一苗防多病，故是当前认为最有开发和应用前景的动物疫苗。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全利用痘病毒作为载体痘苗病毒数十种病原的基因在痘苗病毒中进行了表达，都显示出不同程度的免疫保护性。比较成功的有表达狂犬病病毒G蛋白的重组痘苗病毒和表达牛瘟病毒F和HA蛋白的重组痘苗病毒疫苗禽痘病毒（鸡痘病毒、金丝雀痘病毒、鸽痘病毒）新城疫病毒F和HN蛋白禽流感病毒的HA和NP蛋白马立克氏病毒gB糖蛋白禽白血病囊膜蛋白传染性法氏囊病病毒VP2蛋白禽网状内皮增生症病毒囊膜蛋白火鸡出血性肠炎病毒Hexon蛋白痘病毒是一种DNA病毒，分布广，是一种常见的疾病。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全利用腺病毒作为载体目前已有许多外源基因被插入腺病毒并得到表达猿猴免疫缺陷病毒(SIV)水疱性口炎病毒狂犬病病毒牛副粘病毒3型牛疱疹病毒I型牛冠状病毒猪传染性胃肠炎病毒腺病毒是一种无外壳的双链DNA病毒，基因组长约36kb，衣壳（capsid）呈规则的20面体结构，直径约80-110nm。由多种病毒组成的一组病毒,其中一些病毒可引起以呼吸道粘膜和眼结膜炎症以及粘膜下组织和局部淋巴样组织增生为特征的急性发热性疾病.崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全利用疱疹病毒作为载体火鸡疱疹病毒、伪狂犬病病毒、牛疱疹病毒I型和鸡传染性喉气管炎病毒已完成动物试验并显示出良好前景的重组疱疹病毒疫苗：口蹄疫病毒VP1基因，猪瘟病毒E2基因，猪繁殖与呼吸综合症病毒GP5基因，猪流感病毒HA基因的重组伪狂犬病毒疫苗表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组马立克氏病毒疫苗表达禽流感病毒HA基因的重组传染性喉气管炎病毒疫苗疱疹病毒科是一种DNA病毒，可在人类和动物上造成疾病。目前已知在这科中有八种病毒可造成人类疾病，这类病毒被统称为人类疱疹病毒，简称为HHV。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全利用细菌作为载体大肠杆菌沙门氏菌李氏杆菌目前国际上基因工程疫苗研究与开发的热点之一崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全3.基因缺失疫苗利用基因工程手段，将病毒基因组中的毒力基因以及生长非必需基因删除若干个碱基，从而使该基因彻底失活，这样获取得的疫苗称为基因缺失疫苗。是一类发展前景很好的基因工程疫苗伪狂犬病基因缺失疫苗（双基因和三基因缺失疫苗，如TK-/gG-、TK-/gE-、TK-/gC-和TK-/gE-/gI-等），并已商品化生产牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）TK基因缺失疫苗于1984年首先在美国报道。利用酶切手段,将PRV基因组中的毒力基因以及生长非必需基因删除若干个碱基,从而使该基因彻底失活,这样获取得的疫苗称为基因缺失疫苗.对TK基因进行缺失便成为第一代基因缺失疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4.DNA疫苗DNA疫苗可诱导机体同时产生体液免疫和细胞免疫已发现DNA接种对许多病毒、细菌、寄生虫感染以及肿瘤的预防均有一定的效果DNA疫苗又称基因疫苗，是将编码某种抗原蛋白的基因置于真核表达元件的控制之下，构成重组质粒DNA，将其直接导入动物机体内，通过宿主细胞的转录翻译系统合成抗原蛋白，从而诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全其他疫苗可食性疫苗（利用转基因植物）多表位疫苗T细胞疫苗RNA复制子疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全基因工程疫苗的产业化与应用是目前和今后的发展趋势含狂犬病毒gB基因的重组牛痘病毒疫苗，已在北美和欧洲广泛应用于预防野生动物的狂犬病TK和gE双基因缺失的伪狂犬病疫苗已在美国和大部分欧盟国家广泛应用于预防猪伪狂犬病和猪伪狂犬病根除 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 TK和gE双基因缺失的牛传染性鼻气管炎病毒疫苗也在许多国家使用，荷兰于1998年5月在全国范围内推广使用TK和gE双基因缺失的疫苗以便根除此病表达禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒疫苗和表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒疫苗也已获得美国农业部注册，开始产业化生产崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（二）国内研发情况 我国动物用基因工程疫苗的研究与发达国家之间没有实质性差距，而且取得了巨大进展 十五期间，国家863计划在动物用基因工程疫苗与诊断试剂的研究与开发方面的投入有所加强 近几年，我国动物用基因工程疫苗研究呈现出加速发展的态势，已有多种基因工程疫苗已经问世，并进入安全性评价的不同阶段崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全涉及的主要疫病禽流感病毒鸡新城疫病毒禽传染性喉气管炎病毒鸡传染性法氏囊病病毒鸡马立克氏病病毒猪伪狂犬病病毒猪瘟病毒口蹄疫病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌大肠杆菌猪囊虫第一个商品化的疫苗——仔猪腹泻大肠杆菌K88/K99二价基因工程疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全已通过农业转基因生物安全评价，并获得农业部新兽药证书，进入产业化生产和应用阶段的基因工程疫苗禽流感重组灭活疫苗禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗传染性喉气管炎重组鸡痘病毒活载体疫苗伪狂犬病基因缺失疫苗“O”型口蹄疫病毒基因工程疫苗以新城疫病毒为载体的重组禽流感疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全已通过农业部农业转基因生物安全评价的疫苗 猪生长抑素基因工程疫苗 马立克氏病基因工程活载体疫苗 猪囊虫核酸疫苗 幼畜腹泻双价基因工程苗 新城疫重组鸡痘病毒基因工程疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全进入安全性评价不同阶段的产品越来越多，数量不断上升 各类动物疫病的基因工程亚单位疫苗 以禽痘病毒、伪狂犬病病毒、腺病毒为载体的基因工程重组活载体疫苗 细菌的基因缺失疫苗 DNA疫苗崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全饲料用转基因微生物在我国也取得成功 转植酸酶酵母已通过农业部转基因生物安全评价，并已产业化生产和应用 近年来以转基因植物为表达系统的可食性疫苗也已成为我国的研究热点基因工程疫苗的产业化和商品化是我国在这一领域的发展方向崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全二、动物用转基因微生物的危害（一）对人类和动物健康的潜在危险（二）对生态环境的潜在危害崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（一）对人类和动物健康的潜在危险1.致病性动物用转基因微生物对人、动物的致病性主要是指其感染并致人和动物发病的能力，包括毒性、致癌、致突变、过敏性等。2.抗药性动物用转基因微生物的抗药性基因可能导致人和动物对抗生素等药物产生抗药性转基因微生物或质粒上携带的抗药性基因可能通过基因转移而使其他与人类和动物关系更密切的致病性微生物获得该基因3.食品安全性转基因微生物进入动物体后是否致癌、致突变，人类食用此种动物产品后是否对健康产生影响转基因及其表达产物等是否残留在动物产品中，人类食用后是否对健康产生影响崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（二）对生态环境的潜在危害动物用转基因微生物应用于动物后，微生物可以经消化、呼吸等系统释放到环境中，从而对环境质量或生态系统造成不利影响，主要表现在：1.致病性和毒性2.生存竞争能力：转基因微生物对动物肠道微生物群落的影响，等。3.传播扩散能力：向使用区外的环境中传播和扩散4.遗传变异能力：动物用转基因微生物及其基因在不同生理生态条件下遗传的稳定性及其发生适应性变异或突变等的能力。5.遗传转移能力崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全三、安全评价原则、技术指标要求安全评价原则安全评价内容及其技术指标要求崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全(一)安全评价原则1、是以促进兽医基因工程技术在动物疫病预防和治疗等方面的发展和应用，同时保障人类健康和生态环境的平衡为基本原则。2、采取个案分析，实事求是的原则3、从受体微生物的安全性、基因操作的安全性和转基因动物用微生物遗传工程体及其产品的安全性等三个方面内容和对动物、人类与环境的安全性三个角度进行评价（1）从动物安全的角度，着重评价转基因动物用微生物遗传工程体及其产品对靶动物和非靶动物的安全性（2）从人类健康角度，着重评价对人类、畜禽以及形成的食物链（食品）的影响（3）从生态环境角度，着重评价转基因动物用微生物遗传工程体及其产品对自然生态环境和畜牧业生态环境的影响崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全(一)安全评价原则4、涉及到危害人类、动物健康和生态环境平衡的转基因动物用微生物遗传工程体及其产品，应对其安全性进行严格评价5、从事转基因动物用微生物研究的机构或个人应逐级申报。国外公司在我国申请注册的转基因动物用微生物遗传工程体及其产品，应按阶段进行安全性评价6、农业部农业基因安全审评委员会仅负责对转基因动物用微生物遗传工程体及其产品的安全性进行评价，因此通过安全性评价（指获得生物安全证书）的转基因动物用微生物遗传工程体及其产品，需申报兽用新生物制品进行审批，获得兽用新生物制品证书后方能进行商品化生产和应用崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（二）安全评价内容及其技术指标要求 安全性评价的总体内容 安全性评价的阶段及其要求 试验方案 主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全1、安全性评价的总体内容（1）所用受体微生物(包括细菌、病毒)可接触到的环境（2）受体微生物的生物学背景与特性（3）受体微生物对人类、动物和其它微生物的影响和潜在的危险程度，受体微生物受人类和动物其它病原体的侵染情况（4）受体微生物对生态环境的影响和潜在的危险程度（5）受体微生物的质粒状况，发生遗传变异的可能性及其潜在危险程度（6）对受体微生物的监测方法和监控技术崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全基因操作的安全性评价内容与等级确定（1）目的基因的来源、结构、免疫学与生物学功能和用途（2）基因操作所用载体的名称、来源、特性与结构、安全性，载体所带的抗性标记基因及其特性（3）重组DNA分子的结构、构建方法、复制特性和安全性（4）转基因方法（5）目的基因在受体微生物及宿主体内的表达及其遗传稳定性安全性评价的总体内容崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全转基因动物用微生物遗传工程体及其产品的安全性评价（1）转基因动物用微生物遗传工程体的分子学与生物学特性（2）在自然界的存活能力（3）遗传物质转移到其他生物体的能力和可能后果（4）与其它病原微生物重组的能力和可能产生的后果（5）遗传工程体的应用目的和范围安全性评价的总体内容（6）对遗传工程体应有适当的监测方法和监控手段崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全遗传工程体及其产品对动物的安全性 在靶动物和非靶动物体内的生存前景 对靶动物和可能的非靶动物高剂量接种后的影响 与传统的产品相比较，其相对的安全性 宿主范围与载体的漂移度 免疫动物与靶动物以及非靶动物接触时的排毒和传播能力 遗传工程体回复传代时的毒力返强能力 对妊娠动物的安全性 对免疫动物子代的安全性崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全遗传工程体及其产品对人类的安全性 人类接触和感染的可能性及其危险性 广泛应用后对人类的潜在危险性崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全遗传工程体及其产品对生态环境的安全性 遗传工程体在环境中释放的范围 影响遗传工程体在外界环境中的存活、增殖和传播的理化因素 感染靶动物和非靶动物的可能性或潜在的危险性转基因动物用微生物遗传工程体及其产品安全等级按《农业转基因生物安全评价管理办法》（第二章）确定崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全2、安全性评价的阶段及其要求 中间试验 环境释放 生产性试验 安全证书申请崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（1）中间试验 项目名称应包括目的基因名称、动物用转基因微生物及产品名称、试验所在省（市、自治区）名称和试验阶段名称四个部分。如表达鸡新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒基因工程疫苗在江苏省的中间试验 一份申请书中菌株不超过20个，且是由同一种受体微生物、相同的目的基因、相同的基因操作所获得的，而且每个转基因菌株都应有明确的名称或编号崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（1）中间试验 试验地点不超过3个省（市、区），每省不超过2个点 试验动物总规模（上限）大动物（马、牛）20头中小动物（猪、羊等）40头禽类（鸡、鸭等）200羽鱼2000尾 试验地点应明确试验所在的省（市、自治区）、县（市）、乡、村 试验年限一般为1~2年崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全申报中间试验应提供以下相关附件资料 目的基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列 目的基因与载体构建的图谱 试验地点的位置图和试验隔离图 试验设计（包括进行安全性评价的主要指标和研究方法等，如转基因微生物的稳定性、竞争性、生存适应能力、外源基因在靶动物体内的表达和消长关系等）崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）环境释放 项目名称应包括目的基因名称、动物用转基因微生物及产品名称、试验所在省（市、自治区）名称和试验阶段名称四个部分。如表达鸡新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒基因工程疫苗NF16和YF9在江苏省的环境释放 一份申报书中菌株不超过5个，且是由同一种受体微生物、相同的目的基因、相同的基因操作所获得的，每个菌株都应有明确的名称或编号，并与中间试验阶段的相对应。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（2）环境释放 试验地点不超过3个省（市、区），每省不超过3个点 试验动物总规模（上限）大动物（马、牛）100头中小动物（猪、羊等）500头禽类（鸡、鸭等）5000羽鱼10000尾 试验地点应明确试验所在的省（市、自治区）、县（市）、乡、村 一次申请环境释放的期限一般为1~2年崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全申请环境释放应提供以下相关附件资料 目的基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列 目的基因与载体构建的图谱 中间试验阶段的安全性评价试验总结报告 毒理学试验报告（如果必要的话） 试验地点的位置图和试验隔离图 试验设计（包括进行安全性评价的主要指标和研究方法等，如转基因微生物的稳定性、竞争性、生存适应能力、外源基因在靶动物体内的表达和消长关系等）崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（3）生产性试验 项目名称应包括目的基因名称、动物用转基因微生物及产品名称、试验所在省（市、自治区）名称和试验阶段名称四个部分。如表达鸡新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒基因工程疫苗NF16在江苏省的生产性试验 一份申报书只能申请1种动物用转基因微生物，且名称应与前期试验阶段的名称和编号相对应崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（3）生产性试验 试验地点应在批准过环境释放的省（市、自治区）进行，但不能超过2个省（市、区），每省不超过3个点 试验动物总规模（上限）大动物（马、牛）1000头中小动物（猪、羊等）10000头（只）禽类（鸡、鸭等）20000羽鱼100000尾 试验地点应明确试验所在的省（市、自治区）、县（市）、乡、村 一次申请生产性试验的期限一般为1~2年崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全申请生产性试验应提供以下相关附件资料 目的基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列 目的基因与载体构建的图谱 环境释放阶段审批书的复印件 中间试验和环境释放安全性评价试验的总结报告 食品安全性检测报告（如果必要的话） 目的基因或动物用转基因微生物向环境中的转移情况报告 试验地点的位置图和试验隔离图 试验设计（包括进行安全性评价的主要指标和研究方法等，如转基因微生物的稳定性、竞争性、生存适应能力、外源基因在靶动物体内的表达和消长关系等）崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（4）安全证书的申请 安全证书的申请项目应包括目的基因名称、转基因微生物名称。如表达鸡新城疫病毒F基因的重且鸡痘病毒基因工程疫苗NF16的安全证书 一份申报书只能申请1种动物用转基因微生物，其名称应当与前期试验阶段的名称或编号相对应。 一次申请安全证书的使用期限一般不超过5年。崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全申请安全证书应提供以下相关附件资料 目的基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列 目的基因与载体构建的图谱 目的基因的分子检测或鉴定技术方案 重组DNA分子的结构、构建方法；各试验阶段审批书的复印件 各试验阶段安全性评价试验的总结报告 目的基因或转基因微生物向环境中转移情况的报告 稳定性、生存竞争性、适应能力等的综合评价报告 对非靶生物影响的报告 食品安全性检测报告（如果必要的话） 该类动物用转基因微生物在国内外生产应用的概况 其它相关资料崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全3、试验方案 试验方案应明确：试验所在地区及畜禽场的名称及其周围的环境资料试验所在区域的生态类型与动物种类试验所在区域的动物疫病流行情况试验所在区域生态环境对遗传工程体存活、繁殖、扩散和传播的有利或不利因素，特别是环境中其它生物从遗传工程体获得目的基因的可能性 有明确的试验起止时间 确定试验动物、动物数量和试验区域大小 参加试验的人员情况 相应的隔离和环境监控措施提出用于监测试验区域和周围环境中遗传工程体的适当的方法和程序，监测方法应当敏感性高和特异性强详细记录监测结果，提出遗传工程体及其产品的稳定的生产 工艺 钢结构制作工艺流程车尿素生产工艺流程自动玻璃钢生产工艺2工艺纪律检查制度q345焊接工艺规程 ，包装规格和贮存条件，明确遗传工程体及其产品的接种剂量和途径，使用产品总量，剩余产品的处理方法，提出试验动物的饲养和试验后的处理方法，应提出试验所在区域的消毒措施，提出试验实施过程中出现意外事故的应急措施，明确试验结束后的监控措施和年限崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4、主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料 基因工程亚单位疫苗和基因工程灭活疫苗重点评价受体微生物、基因操作、重组微生物的安全性，其产品本身的安全性不存在问题利用重组微生物、基因缺失微生物制备的基因工程灭活疫苗应重点评价受体微生物、基因操作和转基因微生物的安全性，基因重组和基因缺失对受体微生物的致病性及其表型可能造成的影响、转基因微生物的安全性（亚单位疫苗或灭活疫苗可通过中间试验后，直接申报安全证书）崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4、主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料 基因工程重组活载体疫苗应重点评价受体微生物、基因操作和重组微生物及其产品的安全性评价试验内容：重组微生物的稳定性、重组微生物中外源基因的稳定性、外源基因在免疫动物体内的表达和消长情况、重组微生物对免疫动物的安全性及对环境的安全性等（利用已知的载体研制的基因工程重组活载体疫苗或者可跨越环境释放或生产性试验，而申请安全证书）崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4、主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料 基因缺失活疫苗应重点评价祖代微生物、基因操作和缺失微生物及其的安全性安全性评价试验内容：缺失微生物的稳定性、缺失微生物的致病性和对免疫动物的安全性、缺失微生物与野生型微生物重组的可能性、基因缺失微生物排毒和传播能力及其对环境的安全性崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4、主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料 DNA疫苗应评价质粒DNA的安全性重组质粒DNA在免疫动物体内的存留时间与对宿主染色体或基因的影响与宿主染色体整合的潜在可能性DNA疫苗免疫接种时的局部反应性和全身性毒性DNA疫苗潜在的致肿瘤性崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全四、案例分析以基因工程活载体疫苗——（表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒基因工程疫苗）为例崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（一）安全性评价及其依据 受体微生物的安全性评价 基因操作的安全性评价 动物用转基因微生物的安全性评价 动物用转基因微生物产品的安全性评价参照《农业转基因生物安全评价管理办法》附录“动物用转基因微生物安全性评价”，逐条进行评价和表述，并提出安全性评价的依据崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全关于受体微生物——鸡痘病毒 鸡痘病毒S-FPV-017疫苗株，广泛应用，有长期应用的安全记录 对人类健康或生态环境没有危害崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全关于基因操作 所涉及的载体、启动子、目的基因已在国内外实验室广泛使用，均具有科学试验数据和良好的长期安全应用记录。 所构建的转移载体不带危险性的标记基因和报告基因，导入受体微生物后，不带标记基因而仅带报告基因，使受体微生物获得了表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因抗原的新特性，这种遗传性状的改变对人类健康和生态环境没有不利的影响崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全关于重组鸡痘病毒 S-FPV-017株病毒和重组病毒免疫鸡，表现相同的安全性，致病性没有增加 重组鸡痘病毒在鸡胚连续传10代，对鸡的毒力及免疫力没发生变异崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全（二）各阶段的安全性评价内容 申报中间试验、环境释放和生产性试验，申报单位需要提出进行安全性评价的试验内容，作为基因工程活载体疫苗，重点应对以下内容进行评价，并设计相关的试验方案崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全1、重组鸡痘病毒的稳定性（中间试验） 重组鸡痘病毒增殖的稳定性 重组鸡痘病毒外源基因（传染性喉气管炎病毒gB基因）的稳定性 外源基因在免疫鸡体内的表达和消长规律 应将重组鸡痘病毒在鸡胚成纤维细胞上进行传代，至少5代以上，检测重组鸡痘病毒的滴度 利用PCR技术检测经传代的重组鸡痘病毒的外源基因，同时用免疫荧光抗体技术或其它技术分析外源基因的表达情况 用重组鸡痘病毒免疫鸡，检测免疫鸡体内gB蛋白抗体水平，分析外源基因在免疫鸡体内的表达与消长情况崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全2、重组鸡痘病毒免疫鸡的安全性（中间试验）用重组鸡痘病毒免疫鸡：通过观察免疫鸡的临床反应情况分析免疫剂量接种对鸡的安全性；分析对不同日龄鸡（特别是雏鸡）免疫的安全性；观察高剂量接种对鸡的安全性崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全3、重组禽痘病毒在免疫鸡体内的存留时间（中间试验） 通过检测免疫鸡的病毒血症和组织中的重组鸡痘病毒，分析重组鸡痘病毒在免疫鸡体内的存留时间崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全4、重组禽痘病毒的毒力返强能力（中间试验） 将重组鸡痘病毒在鸡（SPF）连续传5代，观察每代重组禽痘病毒对鸡的致病性，分析重组鸡痘病毒的毒力返强能力崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全5、重组禽痘病毒在免疫鸡和非免疫鸡间的排毒和传播能力（中间试验、环境释放） 检测免疫鸡的排毒情况和与非免疫鸡同居感染情况，分析重组鸡痘病毒免疫鸡的排毒和传播能力崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全6、重组禽痘病毒在免疫鸡群环境中的存活能力（环境释放、生产性试验） 对免疫鸡在不同时间进行取样，检测免疫鸡群环境（水、土、垫料）中的重组鸡痘病毒，分析其在环境中的存活能力崔海峰博士格北508E-mail:hfcui@cjlu.edu.cn课程名称：生物安全谢谢！我国转基因联合因氮菌和共生因氮菌研究也获得了显著进展，据不完全统计．正在研究开发的固氟微生物有8种，涉及基因12种(不包括标记基因和报告基因)。其中转基因水稻联合固氮菌和玉米联合固氮菌显示出提高禾本科作物固氮能力、节约氮肥的作用，已通过农业部基因工程安全性评审，分别获准进入商品化生产和环境释放试验(表5．1)。基因工程疫苗（engineeringvaccine）使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组，制成DNA重组乙型肝炎疫苗；把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。基因工程