表1经修改的HGZ-145培养基配方Tab.1ThecomponentsoftheamendedHGZ-145culturemedium常量元素含量(g/L)微量元素含量(g/L)NaNO30.2(0.4*)HBO30.00286KNO30.051MnCl2·4H2O0.00181K2HPO40.049ZnSO4·7H2O0.000222MgSO4·7H2O0.075Na2Mo4·2H2O0.000391Na2CO30.02CuSO4·5H2O0.000079Ca(NO3)2·4H2O0.059Fe-EDTA 0.000932NH4Cl(NH4Cl-EDTA) 0.0391***:共培模拟条件下,NaNO3的密度。**:NH4Cl(NH4Cl-EDTA)与Fe-EDTA配置的方法参照文献叶居新等(1999)。根据上述培养基配方,配好每一种常量营养盐类1000倍的浓缩储备液。同时配制微量营养混合盐类1000倍的浓缩储备液TMS(TraceMetalSolution)。在900ml蒸留水中依次加入各储备液1ml,添加顺序为:NaNO3(10ml)→KNO3→K2HPO4→MgSO4·7H2O→Na2CO3→Ca(NO3)2·4H2O→NH4Cl(NH4Cl-EDTA)→Fe-EDTA →TMS。每加入一种营养盐必须充分摇动容量瓶,使混合均匀后再加入下一种。表2HGZ-145培养基母液配制方法常量元素母液(各100ml)用量微量元素母液(共1000ml)用量NaNO3200(400)/1L10mlHBO32.86g1mlKNO35.1g/100ml1mlMnCl2·4H2O1.81g1mlK2HPO44.9g/100ml1mlZnSO4·7H2O0.222g1mlMgSO4·7H2O7.5g/100ml1mlNa2Mo4·2H2O0.391g1mlNa2CO32g/100ml1mlCuSO4·5H2O0.079g1mlCa(NO3)2·4H2O5.9g/100ml1mlNH4Cl(NH4Cl-EDTA):取3.9gNH4Cl和0.51gEDTA-Na溶于90ml蒸馏水中,用浓NaOH调pH值至8.5,稀释至100ml。1mlFe-EDTA:0.932取FeC130.90lg,溶于50ml1mol/LHC1中。取该溶液1ml,加入1ml0.1mol/LEDTA-Na,稀释至100ml,其pH值为6.8。1ml根据上述培养基配方,配好每一种常量营养盐类100倍的浓缩储备液。同时配制微量营养混合盐类1000倍的浓缩储备液TMS(TraceMetalSolution)。在900ml蒸留水中依次加入各储备液1ml,添加顺序为:NaNO3(10ml)→KNO3→K2HPO4→MgSO4·7H2O→Na2CO3→Ca(NO3)2·4H2O→NH4Cl(NH4Cl-EDTA)→Fe-EDTA →TMS。每加入一种营养盐必须充分摇动容量瓶,使混合均匀后再加入下一种。
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