附：饲料中中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定（附纤维素、木质素的测定）（一）原理饲料养分的常规测定法中存在的重要缺点之一，是测得饲料的粗纤维与无氮浸出物的数值不能反映饲料的真实情况。测定时粗纤维不是一种纯化合物，而是几种化合物的混合物，其中主要组成是纤维素、半纤维素与木质素。纤维素与半纤维素具有相似的营养价值，它们的营养价值对反刍家畜较单胃家畜为高。木质素对全部家畜均不能被消化，但用常规法测定饲料的粗纤维时，饲料中仅有一部分半纤维素和木质素量包括在粗纤维的数值内，其余部分都被计算在无氮浸出物的数值中，且都被认为与糖和淀粉具有同样的消化性能。由此可见，常规法测得粗纤维的数值不能全部反映饲料中大部分的不消化成分。由于上述原因，VanSoest氏与其伙伴提出测定饲料中中性洗涤纤维与酸性洗涤纤维的方法，原理为：植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。（二）试剂1．中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠） 准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠和6.8g四硼酸钠均放入1000mL刻度烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加30克十二烷基硫酸钠和l0mL乙二醇乙醚，称取4.56克无水磷酸氢二钠置于另一烧杯中，加少量蒸馏水微热溶解后倾入第一个烧杯中，再转入容量瓶中稀释至1000mL，此溶液PH值在6.9-7.1左右(PH值一般不需要调整)。2．酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）制备称取20g十六烷三甲基溴化铵溶于1000mL2.0mol·L-1硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤。3．2.0mol·L-1硫酸溶液配制（1N硫酸） 量取约27.87mL浓硫酸（
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纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500mL蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶定容，标定；4．无水亚硫酸钠5．丙酮6．十氢化萘（三）操作步骤1。中性洗涤纤维测定步骤 准确称取风干样（通过40目）1.0g，置于高型烧杯中，加入中性洗涤剂100mL和数滴十氢化萘（消泡剂）以及0.5g无水亚硫酸钠，套上冷凝装置，立即置于电炉上尽快渚沸（5～10min），溶液沸腾后调节电炉使其保持微沸状态（防止泡沫上升）。经常摇动烧杯，使样品与溶液充分混合回流1h。离火冷却10min，将已知恒重的玻璃坩锅安装在抽滤瓶上，将残渣全部移入，抽滤并用2倍于残渣的沸水冲洗抽滤，直至滤液呈中性反应为止（用蓝色石蕊试纸检查）；用20mL丙酮冲洗残渣两次，至流下的丙酮液呈无色为止，将玻璃坩锅移入100℃鼓风烘箱中烘3h，再移入干燥器中冷却30min后，称量，直至恒重。2．酸性洗涤纤维测定步骤 称风干样同上，加入酸性洗涤剂100mL和数滴十氢化萘，洗涤测定同“中性”，趁热用已知恒重玻璃坩锅在抽滤装置上过滤，将残渣团块用玻棒打碎，用20mL沸水浸泡15~30s后冲洗过滤，反复三次，直至滤液呈中性反应为止（用蓝色石蕊试纸检查）。用少量丙酮洗涤残渣，反复冲洗滤液至无色后，抽净全部丙酮。取下坩锅烘干、恒重。同中性洗涤纤维测定步骤。3。酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定 将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后（500℃马福炉中灼烧2h或至坩锅中无炭粒为止，取出玻璃坩锅，放入干燥器中冷却至恒重）即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。（四）结果计算1．NDF（%）的计算式NDF(%)≡mm1−m2×100%式中 m1-----玻璃坩锅和NDF的质量（g）m2-----玻璃坩锅的质量（g）m-------样品的质量（g）2．ADF（%）的计算式ADF(%)=mm1−m2×100%式中 m1------玻璃坩锅和ADF的质量（g）m2-----玻璃坩锅的质量（g）m-------样品的质量（g）3．半纤维素（%）的计算式半纤维素（%）=NDF（%）—ADF（%）4．酸性洗涤木质素（ADL）的计算式ADL（%）=残渣%—灰分（硅酸盐）%5．酸不溶性灰分（AIA）的计算式AIA（%）=残渣%—ADL%6． 纤维素（%）的计算式纤维素（%）=ADF（%）—（经27%硫酸处理后的残渣）%
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