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酵母双杂交相关溶液.

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酵母双杂交相关溶液.10xTEBuffer1MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1MTris-HCI配制量1L配制方法1•称量121.1gTris置于IL烧杯中。2•加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。按下表加入浓HCI量调节所需要的pH值。pH值浓HCI7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4•将溶液定容至1L。5.咼温咼压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异大,温度每升高I°C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。1.5MTris-H...

酵母双杂交相关溶液.
10xTEBuffer1MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1MTris-HCI配制量1L配制方法1•称量121.1gTris置于IL烧杯中。2•加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。按下表加入浓HCI量调节所需要的pH值。pH值浓HCI7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4•将溶液定容至1L。5.咼温咼压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异大,温度每升高I°C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。1.5MTris-HCI(pH8.8)组份浓度1.5MTris-HCI配制量1L配制方法1•称量181.7gTris置于1L烧杯中。2•加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.用浓HCI调节pH值至8.8。4•将溶液定容至1L。5.咼温咼压灭菌后,室温保存注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高IC,溶液的pH值大约降低0.03个单位。0.5MEDTA组份浓度0.5MEDTA(pH8.0)配制量1L配制方法1.称取186.1gNa2EDTA・2H20,置于1L烧杯中。意:pH值至&02.3.4.5.6.加入约800mL的去离水充分搅拌。用NaOH调节pH值值&0(约20gNaOH)。注时,EDTA才能完全溶解。加去离子水将溶液定容至1L。适量分成小份后,高温高压灭菌。室温保存。10xTEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100mMTris-HCI(PH7.5),10mMEDTA配制量1L配制方法1.量取下列溶液,置于IL烧杯中。1MTris-HCIBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100ml500mMEDTA(pH8.0)20ml2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。3•将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。室温保存。10xTE组份浓度100mMTris-HCl(PH7.5),10mMEDTA配制体积100ml配制方法Tris1.21g;EDTANa2・2H2O0.37g;ddH2O80m1;盐酸调pH7.5;ddH2O定容10xLiAc100mlLiAc・2H2O10.20g;ddH2O50ml,冰醋酸调pH7.5;ddH2O定容50%PEG100mlPEG335050.0g;ddH2O定容1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20°C。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液YPDA液体培养基:1LTOC\o"1-5"\h\zPeptone20g葡萄糖20gYeastextract10gAdeninehemisulfate15mloffilter-sterilized0.2%Adeninehemisulfate108C15min室温贮存固体:加入2%琼脂。108C15min铺板4C贮存SD液体培养基:1LYNB葡萄糖10xDO6.7g20g100ml108C15min,室温贮存SD固体:加入2%琼脂108C15min铺板4C贮存(若要加入3-AT须在培养基自然冷却至约55C加入所需量的3-AT贮存溶液或粉末,摇匀后铺板)质粒混合物:0.1ug待转化质粒+100ug鮭鱼精DNA1xTE/LiAc/ddH2O:1:1:850%PEG/LiAcTE:8:1:1
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