运动训练对老年痴呆小鼠的改善作用概要

运动训练对老年痴呆小鼠的改良作用[10-09-0711:21:00]编写：studa20作者：赵燕燕刘新霞陈春生田芳露崔彦龙仇鹏【纲要】目的观察运动训练对老年痴呆小鼠学习记忆阻碍的影响，并商讨其作用体制。方法昆明种小鼠采纳被动转笼法训练4w后，采纳Morris水迷宫法测试小鼠学习记忆能力;比色法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量，HE染色察看海马组织形态学改变;BI2000图像剖析系统测定小鼠微循环;采纳耐缺氧实验察看小鼠耐缺氧能力。结果与空白比较组比较，模型组小鼠定向游泳实验潜藏期明显延伸(P<0.05)，SOD活力明显降低，MDA含量明显高升(P<0.05)，海马神经元变性、零落，耐缺氧存活时间明显延长;与模型组比较，运动训练对上述指标均有明显改良作用。与空白比较组比较，运动训练明显改良微循环、提升耐缺氧能力。结论运动训练能不一样程度地改良小鼠学习记忆阻碍，其作用体制可能与运动能提升小鼠消除自由基能力、改良微循环、提升耐缺氧能力相关。【重点词】运动训练;学习记忆;自由基;组织形态学;微循环;耐缺氧Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofexerciseonlearningandmemoryimpairmentofseniledementiamiceandexploreitsmechanism.MethodsAfter4weeksofexercisewiththerunningwheels,watermazetaskwasusedtoevaluatethelearningandmemoryfunctionofmice.Theactivityofsuperoxidedismutase(SOD)andthecontentofmalondialdehyde(MDA)weremeasuredwithcolorimetry.Thealterationsinhippocampusslicesmorphologywereassessedusingmicroscope.TheBI2000imagesystemwasusedtoevaluatethemicrocirculationinmice′salaauris.Thesurvivaltimeandpersistenttimeofgaspingwereobservedonacuteanoxiamice.ResultsComparedwithcontrolgroup,theescapelatencyindirectionalswimmingwasprolonged,SODactivitywasdecreasedandthecontentofMDAwasincreasedinmiceofmodelgroup.Comparedwithmodelgroup,exerciseprolongedtheescapelatency,increasedSODactivityanddecreasedthecontentofMDAandimprovedneurodegenerativechangesandreducedthedeathofneuroninhippocampusslicesandimprovedthemicrocirculationandenhancedtheeffectofantianoxiainmice.ConclusionsExercisecanimprovethelearningandmemoryimpairmentinvariousdegree.Themechanismmayberelatedtoimprovingthemicrocirculationandenhancingtheeffectofantianoxiaanddecreasingthefreeradicalinmice.【Keywords】Exercise;Learningandmemory;Freeradical;Morphology;Microcirculation;Antihypoxia跟着社会人口的老龄化，老年痴呆的发病率逐年上涨，老年痴呆的核心症状是记忆力、认知力等方面的阻碍，不单影响病人的生活质量，并且给家庭和社会带来深重的负担。因其发病体制还没有完整说明，临床尚缺少理想的防治药物。大批研究 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示，运动训练能加强机体免疫功能〔1〕、延缓衰老〔2〕，促使小鼠脑局灶缺血后功能恢复〔3〕。但运动训练对老年痴呆小鼠记忆能力的影响未见报导，本实验经过察看运动训练对学习记忆阻碍小鼠学习记忆能力、耐缺氧能力、微循环的影响及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及海马组织形态学改变，来观察运动训练对学习记忆阻碍小鼠学习记忆能力的影响，并商讨其作用体制，为进一步研究运动对老年痴呆的防治供给理论依照。资料与方法1.1试剂与仪器尼莫地平(天津市中央药业有限企业，批号：070506);亚硝酸钠(北京双环试剂厂，批号：20070406)。SOD/MDA测试盒(南京建成生物技术研究所，批号：20070111/20070112)。小鼠Morris水迷宫装置及追踪系统(成都泰盟企业产);X15R低温离心计(美国贝克曼有限企业);RM2135组织切片机(德国徕卡企业);BMJ1白腊包埋机(天津航空机电企业);UV2550PC可见紫外分光光度计(日本岛津企业);CKX41倒置生物显微镜(日本奥林巴斯);BS244S电子剖析天平(德国赛多利斯);转笼装置(河北大学医学实验中心自制)。1.2动物及分组昆明种小鼠60只，体重31～35g，12月龄，雌雄参半，由河北省实验动物中心供给，合格证号：DK0704128。将小鼠按体重随机分为6组，即空白比较组、模型组、尼莫地平组、高、中、低运动量组，每组10只。1.3实验方法1.3.1运动训练过程〔4〕分别将高、中、低运动量组小鼠放进转速为9r/min，直径为17cm的带轴承转笼，让其被动跑笼。高运动量组小鼠第1天跑30min，每日增添20min，直至每日跑2h;中运动量组小鼠第1天跑20min，每日增添15min，直至每日跑80min，低运动量组小鼠第1天跑10min，每日增添10min，直至每日跑40min。共训练6w，每周跑5d，周四、周日歇息，每周日志录各组小鼠体重。空白比较组、模型组、尼莫地平组每次置于转笼中，但转笼不转动。第5周开始，尼莫地平组小鼠灌胃赐予尼莫地平30mg/kg，1次/d。全部运动训练均在动物暗周期6pm～10pm达成。小鼠亚硝酸钠致记忆稳固阻碍模型的制备按文件方法〔5〕，每日在小鼠游泳训练后立刻腹腔注射NaNO2125mg/kg，制作学习记忆稳固阻碍模型。小鼠水迷宫法〔5〕实验装置主要由一只圆形水池、一个可挪动位置的透明有机玻璃安全台和摄像机构成。圆池直径80cm，高44cm，安全台高20cm，顶端圆形，直径为8cm。水池分红均等的4个象限。按实验要求，可随意地将安全台设置于某一象限的中间。定向游泳实验的详细方法以下：安全台固定在4个象限中的随意一个地点不变。将小鼠头朝池壁轻轻地放入水中，让动物找寻安全台，小鼠爬上安全台后使其逗留15s，而后放入笼中。每日2次，共训练4d，摄像机拍摄实验全过程，记录动物游泳轨迹，经软件剖析计算动物总游泳时间和总轨迹长度。动物总游泳时间为躲避潜藏期，总轨迹长度为游泳行程。1.3.4小鼠脑组织中SOD、MDA的测定〔6〕Morris水迷宫测试结束后，断头取大脑，用预冷生理盐水冲刷表面血液，滤纸擦干，取一半脑组织，以重量/体积比1∶9加入4℃生理盐水，制成10%的匀浆，3000r/min低温离心15min，取上清液，按试剂盒说明，用可见紫外分光光度计测定大脑组织SOD活性及MDA含量，另一半脑组织留做白腊切片。小鼠脑组织白腊切片的制备及HE染色Morris水迷宫测试结束后，断头取大脑，用预冷生理盐水冲刷表面血液，滤纸擦干，取一半脑组织，10%甲醛溶液固定，惯例白腊切片，HE染色，显微镜下察看海马形态学改变。1.3.6小鼠耳廓微循环的测定〔7〕取昆明种小鼠50只，体重31～35g，12月龄，雌雄参半，按体重随机分为5组，即空白比较组、尼莫地平组、高运动量组、中运动量组、低运动量组，每组10只。训练方法同1.3.1。运动训练结束后，各组小鼠腹腔注射乌拉坦1200mg/kg麻醉后固定在小鼠察看台上。耳廓去毛(用透明胶带黏去)后，调理耳托高度，在耳廓表面滴加液体石蜡，使耳廓平坦在耳托上。将察看台置于显微镜载物台上，调理冷光源至适合亮度，在透射光下，用100倍镜察看小鼠耳廓微循环状况。分别记录各鼠耳廓微动脉、微静脉血管管径及血流速度,以判断微循环改良状况。1.3.7小鼠急性脑缺血性缺氧实验〔8〕取昆明种小鼠50只，体重31～35g，12月龄，雌雄参半，动物分组及训练方法同1.3.6。运动训练结束后，用剪刀在小鼠双耳连线处迅速断头，立刻按秒表记录小鼠断头后至张口喘息停止时间，即小鼠张口呼吸时间。小鼠亚硝酸钠模型常压耐缺氧实验〔8〕取昆明种小鼠60只，体重31～35g，12月龄，雌雄参半，动物分组及训练方法同1.3.1。运动训练结束后，除空白比较组外，其余各组小鼠均腹腔注射亚硝酸钠125mg/kg，制备缺氧模型，5min后，将小鼠逐只放进盛有10g钠石灰的250ml密闭广口瓶中，记录每只小鼠存活时间。1.4统计学办理实验数据用x±s表示。采纳SPSS11.0软件进行方差剖析和t查验。2结果2.1运动训练对记忆稳固阻碍小鼠潜藏期的影响与空白比较组比较，模型组小鼠，第3、4、5、7次训练躲避潜藏期均明显延伸(P<0.05)。与模型组比较，高运动量组小鼠第3、4、7次训练的躲避潜藏期均明显缩短(P<0.05)，中运动量组小鼠第4、5次训练的躲避潜藏期均明显缩短(P<0.05);低运动量组小鼠第4次训练的躲避潜藏期明显缩短(P<0.05);各组小鼠在其余次数训练时，躲避潜藏期均有缩短趋向，但差别无统计学意义(P﹥0.05)。实验结果表示，运动训练能明显缩短亚硝酸钠致记忆稳固阻碍模型小鼠Morris水迷宫定向游泳实验潜藏期，改良亚硝酸钠致记忆稳固阻碍模型小鼠空间学习记忆能力。见图1。与空白比较组比较：1)P<0.05,2)P<0.01;与模型比较组比较：3)P<0.05,4)P<0.01图1运动训练对亚硝酸钠致记忆稳固阻碍模型小鼠Morris水迷宫潜藏期的影响(x±s,n=10)2.2运动训练对记忆稳固阻碍小鼠脑组织SOD、MDA的影响与空白比较组比较，模型组小鼠脑组织中SOD活力明显降低(P<0.01)，MDA含量明显高升(P<0.01);与模型组比较，尼莫地平组、高、中、低运动量组小鼠脑组织中SOD活力均明显高升(P<0.05，P<0.01)，MDA含量明显降低(P<0.05，P<0.01)。表示运动训练能明显提升亚硝酸钠致记忆巩固阻碍模型小鼠脑组织中SOD活力，降低MDA含量，提升小鼠消除自由基的能力。见表1。表1运动训练对记忆稳固阻碍小鼠脑组织SOD和MDA的影响与空白比较组比较：1)P<0.01;与模型组比较：2)P<0.05，3)P<0.012.3运动训练对记忆稳固阻碍小鼠海马组织形态的影响与空白比较组比较，模型组海马CA3区神经细胞变性坏死，表现为轴突消逝、胞浆深染、空泡样变，核固缩、胞膜核膜界线不清。