循环伏安法
Cyclic Voltammetry
• 实验原理
• 实验步骤
• 数据处理
1.实验原理
• 循环伏安仪构造和基本电路图
1.实验原理
• 等腰电位扫描
• Oxidation
2CAC-SH CAC-S-S-CAC
• Reduction
CAC-S-S-CAC 2CAC-SH
对于可逆反应体系
1.实验原理
• 电流点位图
1. 扫描点位由-0.2 0.6 -0.2
2. 电位由正到负：氧化电流
3. 电位由负到正：还原电流
4. Ej与Ed分别为氧化和还原
反应完全时的电势
对于可逆反应体系
注：对于不可逆体系，只有一 个峰值
1.实验原理
• 图形解析:由CV图可以得到的信息
Ipa，Ipc，Epa，Epc
Ip=2.69*105n3/2D1/2C1/2 定量分析
Ep=Epc-Epa≈0.059/n
Ipa/Ipc ≈1
电极反应可逆性
Ip—V or Ip—V1/2 吸附/扩散
注：n为转移电子数，D为扩散系数，C为样品浓度
2.实验步骤
• 电极选择
1. 参比电极 （reference electrode）：保持恒定参考电位—饱和Hg
电极（Saturated Calomel electrode）
2. 辅助电极 （auxiliary electrode）：提供电流– Pt 电极
3. 工作电极 （working electrode）：确定被研究界面—Au 金电极
选择三电极的原因：由于点解过程中电极
表
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面的浓度差极化不可避免，外加电压要严格控制工作电极上电位的
大小，就要求另一电极为稳定的参比电极，实际上由于电解池的电流很大，一般不易找到这种参比电极，故加
一支辅助电极组成电极系统进行伏安分析
2.实验步骤
• 电极处理
1. 分别用5， 0.3， 0.05mM 的alumina slurries（水合氧化铝）打磨
工作电极，然后在去离子水中超声10min
2. 在1mol•dm-3H2SO4溶液中，将Pt电极与辅助电极以0.5A•cm-2
电流密度进行电解，每隔30s变换一次电极的极性，如此反复
10次，使电极表面活化，然后取出用蒸馏水冲洗干净，用滤纸
擦干。
2.实验步骤
• 样品准备
1. Buffer：0.025M phosphate （pH 7.0）
0.100M sodium chloride
2. Protein：0.1mM-1.0mM 根据电解池体积而定（一般有10ml，
30ml 等）
注：一般用来做CV的buffer需要充入N2，用以除去buffer中的氧气，
防止氧气对于氧化还原反应的影响，而我们的二硫键反应，溶
液中没有氧气，应该是反应不起来，从而这一步要去掉。
2.实验步骤
• 仪器操作
1. 将三电极分别插入电极夹的三个小孔中，使电极浸入电解质溶液
中。将CHI工作站的绿色夹头夹Au电极，红色夹头夹Pt丝电极，
白色夹头夹参比电极。
2. 点击“T”（Technique）选中对话框中“Cyclic Voltammetry”实验
技术，点击“OK”。点击“░”（parameters）选择参数，“Init
E”为0.6V，“High E”为0.6V，“Low E”为-0.2V，“Initial Scan”
为Negative，“Sensitivity”在扫描速度大于10mV时选5×10-5，点
击“OK”。点击“►”开始实验。
3. 改变蛋白浓度，重复上面的实验
3.数据处理
• 预想的结果 1. 需要的数据为Epa，通过将其与细胞
内外的电势差E=-80-90mV,相比较，从
而判断，在生理状态下HIV-1和HTLV的
CAC所处在的状态。
2. 猜想一下，如果HIV-1在生理状态下
为氧化态，还原态没有感染性或是感染
性较弱的话，那就意味着，HIV-1更容
易感染含氧量较高的细胞如血红细胞，
而对于含氧量少的细胞，感染性可能就
比较弱。
�循环伏安法��Cyclic Voltammetry��
实验原理
循环伏安仪构造和基本电路图
等腰电位扫描
电流点位图
图形解析:由CV图可以得到的信息
电极选择
电极处理
样品准备
仪器操作
预想的结果
浙公网安备 33021202002483