色谱峰拖尾的原因

液相色谱峰有拖尾现象是什么原因时间：2021.03.01创作：欧阳语A、峰拖尾1、筛板阻塞（a、反冲色谱柱b、更换进口筛板c、更换色谱柱）2、色谱柱塌陷（填充色谱柱）3、干扰峰（a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱）4、流动相PH选择错误（调整PH值。对于碱性化合物，氐PH值更有利于得到对称峰）5、样品与填料表面的溶化点发生反应（a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、换柱子）B、峰前延1、柱温低（升高柱温）2、样品溶剂选择不恰当（使用流动相作为样品溶剂）3、样品过载（降低样品含量）4、色谱柱损坏（见Al、A2）C、峰分叉1、保护柱或 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 柱污染图（取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。）2、样品溶剂不溶于流动相（改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。）D、峰变形1、样品过载（减少样品载量）E、早出的峰变形1、样品溶剂选择不恰当（a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂）F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰1、柱外效应（a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流通池）G、K'增加时,脱尾更严重1、二级保留效应,反相模式（a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、更换一支柱子）2、二级保留效应,正相模式（a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入水（或多官能团化合物）d、试用另一种 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ）3、二级保留效应，离子对（加入三乙胺（或碱性样品））H、酸性或碱性化合物的峰拖尾I、缓冲不合适（a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液）I、额外的峰1、样品中有其他组份（正常）2、前一次进样的洗脱峰（a、增加运行时间或梯度斜率b、提咼流速）3、空位或鬼峰（a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积）J、保留时间波动1、温控不当（调好柱温）2、流动相组分变化（防止变化（蒸发、反应等））3、色谱柱没有平衡（在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱）K、保留时间不断变化1、流速变化（重新设定流速）2、泵中有气泡（从泵中除去气泡）3、流动相选择不恰当（a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相）L、基线漂移1、柱温波动，即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。（控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图）2、流动相不均匀,流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。（使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氮气。）3、流通池被污染或有气体（用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1M的硝酸。（不要用盐酸））4、检测器出口阻塞，高压造成流通池窗口破裂z产生噪音基线（取出阻塞物或更换管子。参考检测器 手册 华为质量管理手册 下载焊接手册下载团建手册下载团建手册下载ld手册下载 更换流通池窗）5、流动相配匕匕不当或流速变化（更改配比或流速，定期检奁流动相组成及流速）6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时（用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行;中洗）7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成（检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂）8、样品中有强保留的物质（高K值）以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。（使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子）9、使用循环溶剂，但检测器未调整（重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相）10、检测器没有设定在最大吸收波长处。（将波长调整至最大吸收波长处%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%HPLC分析中，在色谱柱正常，样品灵敏度足够,分析方法合适，色谱峰在出峰时间较短的条件下（不包括梯度）,峰型应对称而尖锐。但是,在对样品了解程度不够，方法不妥”样品处理方法及进样方式不合理下，会出现各种意想不到的问题，而对色谱峰难以作出合理的解释,尤其对于新手更是如此。色谱双峰指的是明明是同一种物质，但在色谱图中出现双峰，而表明含二种物质。这种情况分为四种原因。1色谱柱如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现（出峰越快,双峰的可能性会减少）,尤其采用单一纯物质时,可以肯定色谱柱出问题■保护柱污染或柱头固定相变脏或流失，或颗粒聚集在色谱柱的入口筛板上。如果进样量少，原来色谱柱正常,色谱峰的形状多为一大峰带一小峰,不一定拖尾,这一般应是柱头受堵,将色谱柱反过来接,用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉”再反过来，一般情况下就行了。当然不反冲，正冲有时也会正常的。如果峰拖尾，双峰强弱相差不大，柱头固定相变脏或流失可能性更大,这是可以将进样那头拧开”将微孔滤片超声,柱头刮去一^分填料，重新填上新填料拧紧,不过这种活，需要一定技术，同时不能老干那种事，否则用不了几次，色谱柱就会应柱效很低而报废。2溶剂极性及进样量许多HPLC分析者对此可能不以为然,一般的hplc的书籍和文献都不会提到这方面的内容,而这确是双峰产生的一个很重要的原因。目前hplc分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙膳、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂,如纯甲醇、纯乙猜，纯乙醇,而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul,此条件下完全可以肯定，单一的纯物质出双峰,第二峰比第一峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前（相对进样量少而言）,将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大,而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。这是上面提到进样量造成双峰的一个原因”另一个原因是，进样量不一定大”但绝对量很大,色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高,不拖尾（如果出峰很快,也可能是色谱柱问题X将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大,色谱柱过载造成的。如果样品溶剂与流动相不溶或互溶性不好‘当样品注入色谱分离体系中,会析出并接看再溶解的可能，这时相当于二次进样，也非常容易产生双峰。.3样品的特性及pH值有些样品由于其化学结构的特点,存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，而是以一个动态平衡存在。在色谱分析时,在一个特定的条件下,一种物质将出现双峰，甚至三峰•这时一般双峰靠的很近，基本齐高，不拖尾，条件稍一变化，尤其pH,双峰现象将消失，如红霉素等。有的样品紫外的色谱图上看不到双峰，但在LC-MS下，用质谱检测器，其质谱的总离子流图上较明显.pH对峰形的影响在缓冲液流动相平衡过程中非常明显,当连续进样时，受pH的连续变化影响会经常遇到这种双峰的情况。另外，在样品分析时,流动相的pH尽量远离被分析物的等电点，否则也容易弓I起双峰的产生。在用离子对试剂分析时”选择不好条件也会容易引起双峰的产生。4仪器参数记录的参数一般都内定的，不必修改，但GC和HPLC的参数是不完全一致的，例如C-R3A数据记录仪上的一般记录时间间隔GC为2ms,HPLC为5msz如果记录间隔时间缩短,一个峰将变为二个峰或更多。还有一种情况是，参比波长设置错误”例如设置分析波长254nmz参比波长400nm，这个对于大多数化合物可能没影响。但是如果被测化合物，在400nm处也有强的紫外吸收，比254nm更高。这样其出峰时,由于背景的抵扣作用，本来一个峰会变成对称的二个峰,而且如果将二峰之间的峰谷反转180度,恰好是一个完整的峰。这时要将参比波长设置更大，或者取消。时间：2021.03.01创作：欧阳语