化学发光法测定头孢拉定!

书书书 第!"卷!第#期 西 南 师 范 大 学 学 报 !自然科学版" !$$%年&!月 ’()*!"! +(*# ,(-./0)(12(-345673849/0+(.:0);/9<6.793=!+03-.0)2>96/>6?@939(/" A6>*!$$% 文章编号!&$$$ B%C&"!$$%#$# $""& $B 荧光素增敏高锰酸钾 化学发光法测定头孢拉定! 陈朝晖&!!!!黄玉明& &D西南师范大学 化学化工学院!重庆%$$C&B"!D西南农业大学 荣昌校区!重庆 荣昌%$!%#$ 摘要!基于荧光素可以增强高锰酸钾氧化头孢拉定产生的化学发光!结合流动注射技术!建立了一种快速#简单#灵 敏的测定头孢拉定的新方法*在优化的实验条件下!测定头孢拉定的线性范围为&D$E&$FG"!D$E&$FBH$:I!检出 限%J!&为JD$E&$F"H$:I*对浓度为%D$E&$F#H$:I的头孢拉定进行&&次平行测定!得到相对 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 偏差为 &D%K*将本法用于合成样品中头孢拉定的 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 !结果令人满意* 关!键!词!化学发光"头孢拉定"流动注射分析 中图分类号!!"#$ 文献标识码!% 头孢拉定%>6L4.0@9/68?M&为半合成广谱头孢菌素!对革兰氏阳性及阴性菌均有杀菌作用!是广泛用 于临床治疗的一种头孢类抗生素药物*目前其测定方法主要有高效液相色谱法’&(#分光光度法’!F#(#荧光 法’CF&J(等*上述方法或者操作繁琐’&!!!#!GF&$!&J(!或者线性范围不够宽’&&(!或者需要昂贵的仪器 ’CF&J(!或者 灵敏度不够高’JFB!&!(*用化学发光法测定头孢拉定已有报道!范顺利等人’&%(利用高价铈氧化头孢拉定的降 解产物发光的现象间接测定了头孢拉定"陈小利等人’&B(基于电生不稳定的 N/%#&直接氧化头孢拉定产 生化学发光!建立了流动注射电化学发光测定头孢拉定的方法*文献’&%(所述方法需要将头孢拉定在沸 水中加热!$:9/!耗时长!且该法测定头孢拉定的线性范围为&D$E&$FC"%D$E&$FBH$:I!检出限 %J!&为BD$E&$FGH$:I"文献’&B(所述方法测定头孢拉定的线性范围为BD$E&$FC"&D$E&$FBH$:I!检 出限%J!&为!D&E&$FGH$:I* 试验发现!高锰酸钾氧化头孢拉定#头孢哌酮钠产生化学发光!荧光素可以增强其发光强度!但对高锰酸 钾 头孢哌酮钠体系增敏作用不大’&#(*本文基于荧光素可以显著增强高锰酸钾氧化头孢拉定产生的化学发光! 建立了一种快速#简单#灵敏的直接测定头孢拉定的新方法*与文献’&%!&B(相比较!本法具有更宽的线性范 围和更低的检出限!而且操作更简单*将本法用于头孢拉定合成样品的分析!结果令人满意* &!实验部分 &’&!仪器与主要试剂 流动注射化学发光仪%西安瑞科电子设备有限公司&"光电倍增管工作电压)F"$$’!增益EG"蠕动 泵%J$.$:9/!上海仪表电机厂&"八通阀%温州市龙方仪器配件厂&"聚四氟乙烯管%内径$DG::!用于连接 阀与流路中的泵管&* ! 收稿日期)!$$% $& $G 作者简介)陈朝晖%&"C! &!女!四川资中人!讲师!主要从事发光分析的研究* 准确称取$D$B$$H头孢拉定!石家庄制药集团有限公司"#以二次水溶解#定容于&$$:I容量瓶中# 得到BE&$F%H$:I的储备液#置冰箱保存#使用时用水逐级稀释至所需浓度%高锰酸钾!重庆东方试剂 厂"&BE&$F!:()$I的储备液%浓盐酸!重庆无机化学试剂厂"%硫酸’硝酸’磷酸’核黄素’荧光素’溴代 十六烷基三甲铵’硫酸奎宁’盐酸奎宁’罗丹明O’罗丹明#P购自重庆化学试剂公司#以上试剂均为分析 纯%多聚磷酸’吐温G$#QM均为化学纯#购自重庆化学试剂公司%曲拉通RS&$$!美国进口分装"%水为二次 蒸馏水* 0*高锰酸钾载流%T*多聚磷酸溶液%>*荧光素溶液% 2*样品%M&#M!*蠕动泵%’*八通阀%U*流通池% V*废液%A*发光检测器%M8*计算机* 图&!实验装置示意图 U9HD&!W462>46:039>A90H.0:(1346U)(5 2=736:1(.346A636.:9/039(/(186L4.0@9/6 &’(!实验步骤 &D!D&!标准曲线的绘制 准确移取一定体积的头孢拉定标准溶液于一系列 !B:I具塞比色管中#加水稀释至标线#摇匀#配成不同 浓度标准试液*按图&所示装置装好流路#开启蠕动泵 !泵速J$.$:9/"#待基线稳定后进样&$$$I进行测定# 以发光强度定量* &D!D!!合成样的测定 合成样品&!取一定量头孢拉定#在其中加入不同 量及不同种类的共存物质#然后用本法分析* 合成样品!!取尿样&:I至&$$:I容量瓶中#加 入适量的头孢拉定#以二次水稀至刻度后用本法测定* (!结果与讨论 高锰酸钾浓度为$DB$::()$I#头孢拉定样品 浓度为BE&$F#H$:I#荧光素浓度&::()$I* 图!!酸浓度对化学发光强度的影响 U9HD!!?116>3(1X>9@8(/>6/3.039(/(/3468IY/36/793= (’&!反应介质的选择及其影响研究 分别以盐酸’硫酸’硝酸’磷酸’多聚磷酸为反应介 质测量化学发光强度#结果如图!所示*由此可见# 在多聚磷酸介质中化学发光强度最大*进一步研究了 多聚磷酸浓度对发光强度的影响#发现当多聚磷酸浓 度超过!:()$I后#随着酸浓度的增加#化学发光强 度变化并不大#同时考虑到由于酸浓度增大#将直接 影响泵管的寿命#故实验选择!:()$I多聚磷酸为反 应介质* (’(!流路选择 分别以水’!:()$I多聚磷酸及$DB$::()$I 高锰酸钾作载流进行试验*结果表明#以高锰酸钾 作载流时化学发光强度最大*因此#本实验选择高 锰酸钾作载流* (’)!高锰酸钾浓度的影响 在$D$B"BD$$::()$I范围内试验了高锰酸 钾浓度对发光强度的影响*结果表明#随着高锰酸钾浓度增大#化学发光强度也相应增大#当其浓度为 $DB$::()$I时#化学发光强度最大#超过上述浓度#发光强度反而减小#其原因可能是有色的高锰酸 钾溶液在高浓度时会产生自吸收#从而引起化学发光强度降低*根据上述实验结果#选择高锰酸钾的浓 度为$DB$::()$I* !"" 西南师范大学学报!自然科学版"!!!!!!!!!!!!第!"卷 多聚磷酸浓度为!:()!I"高锰酸钾浓度为$DB$::()!I" 样品浓度为BE&$F#H!:I* 图J!荧光素浓度对化学发光强度的影响 U9HDJ!?116>3(1U)-(.67>69/(/3468IY/36/793= (’*!能量转移剂的影响 化学发光分子可能会将其激发态的能量转移给荧 光试剂"受激荧光体再回到基态时发射其特征波长的 光"由于所用荧光体的量子效率高"故常常会增强发光 强度*由于考虑到可能存在的增敏作用"试验了盐酸奎 宁#硫酸奎宁#罗丹明#P#罗丹明O#荧光素#核黄素 等#种能量转移剂对该体系的影响"结果列于表&*从 表&可以看出"除罗丹明类染料外所选用的能量转移剂 均对该体系有增敏作用"其中以荧光素的增敏最为显 著"试验了浓度$::()!I%分别为$"$D$&"$D$B"$D&$" $DB$"&D$$"!D$$"%D$$的荧光素对该体系的影响"结果 如图J所示*由图J可知"化学发光强度随荧光素的浓度 增加而增强"当其浓度高于&::()!I时"化学发光强度 变化不大*故实验选择&::()!I荧光素作进一步试验* 表&!能量转移剂的影响 W0T)6&!?116>37(12(:626/7939Z6.7(/3468IY/36/793= 能量转移剂 实验浓度范围 优化浓度 相对发光强度 最佳信噪比 无 F F &$$ & 罗丹明O $"!$$:()!I F 抑制 F 罗丹明#P $"#$$:()!I F 抑制 F 核 黄 素 $"&$$$$H!:I C$$$H!:I &G! &D$% 硫酸奎宁 $"!$$$H!:I &$$$H!:I &&" &D&$ 盐酸奎宁 $"!$$$H!:I &$$$H!:I &C% &D&& 荧 光 素 $"%::()!I &::()!I &!$G &DJ# (’#!表面活性剂的影响 试验了%种表面活性剂即阳离子型的溴代十六烷基三甲铵$8WNXO%及J种非离子型的吐温G$"QM及 曲拉通RS&$$对该体系的影响"结果列于表!*从表!可以看出"除吐温G$外其余表面活性剂对该体系均 有增敏作用"但增敏作用并不明显"故本试验没有使用表面活性剂* 表(!表面活性剂的影响 W0T)6!!?116>37(12(:62-.10>30/37(/3468IY/36/793= 表面活性剂 实验浓度范围 优化浓度 相对发光强度 无 F F &$$ W566/G$ $"&$K F &$$ QM $"&K $DB &!C W.93(/RS&$$ $"CB::()!I &B &BJ 8WNXO $"!B::()!I B &!B (’"!体系对头孢拉定的响应特性 在选定的最佳实验条件下"头孢拉定在&D$E&$FG"!D$E&$FBH!:I范围内与发光强度呈良好的线性 关系*回归方程为"!"J"D#%#$&#D#$#为头孢拉定的浓度"单位为&$F#H!:I"%"$D""CC"&""%*对浓 度为%D$E&$F#H!:I的头孢拉定进行&&次平行测定"得到相对标准偏差为&D%K*根据Y;MX8的建议" 计算得到的检出限$J!%为JD$E&$F"H!:I* (’$!干扰实验 考察了可能存在的无机物与有机物对本法测定头孢拉定的干扰情况"当头孢拉定浓度为&E&$F#H!:I" J""第#期!!!!!! !陈朝晖!等"荧光素增敏高锰酸钾化学发光法测定头孢拉定 干扰水平为BK时!&$$$倍的 +0+QJ"G$$倍的80#+QJ$!![+QJ"B$$倍的8-2Q%%B\!Q"!$$倍的 +0!2Q%!]/2Q%%C\!Q!+0\!MQ%!NH2Q%"&$$倍的糊精&葡萄糖&淀粉&+0!8QJ"B倍的乙腈"B$倍的 ?AWX"%$倍的甲醇&!$倍的尿素&%倍的乙醇&$D!倍的+\%8)无干扰!但大于$D&倍的抗坏血酸及$D& 倍的+0+Q! 有干扰* (’+!合成样品的测定 合成样品&!按照&D!D!节中的方法!在头孢拉定中加入共存物质!然后用本法分析!结果列于表J* 回收率在"GK"&$JK之间!测定结果令人满意* 表)!合成样品中的头孢拉定含量测定 W0T)6J! 6^7-)37(1346A636.:9/039(/(186L4.0@9/69/3462=/34639>20:L)67 头孢拉定 ’E&$F#H%:IF& 共存物质 ’E&$F#H%:IF& 测得值 ’E&$F#H%:IF& 相对标准偏差 ’K 回收率 ’K & 葡萄糖B!淀粉B &D$$ JDJ#&_B$ &$$D$ B 葡萄糖!B!淀粉!B BD&J %D$#&_J$ &$!D# &$ 葡萄糖B$!淀粉B$ &$D& $DG#&_J$ &$&D$ & 淀粉&$!葡萄糖&$!尿素!!糊精&$ &D$& JD!#&_B$ &$&D$ & 淀粉&$!维生素8$D$&!?AWXB!+0\!MQ%!$ $D"G !D%#&_B$ "GD! & 808)!$DB!]/2Q%%C\!Q!$!8-2Q%%B\!QB$!+\%8)$D$! &D$& !DJ#&_B$ &$&D$ !!合成样品!!按照&D!D!节中的方法!将头孢拉定加入尿样中进行测定!结果列于表%*回收率在 &$&K"&$BK之间!测定结果令人满意* 表*!尿样中样品的测定 W0T)6%! 6^7-)37(1346A636.:9/039(/(186L4.0@9/69/3462L9‘6@\-:0/;.9/6 加入量’E&$F#H%:IF& 测定值’E&$F#H%:IF& 回收率’K 相对标准标偏差#&_J$’K & &D$& &$&D$ JDC B BD$G &$&DC JD% &$ &$D%G &$%DG &D% &B &BDBG &$JDG %DC 参考文献! (&) ,(4/7(/’N!X))0/7(/,M!80-7(/^8*A636.:9/039(/(134686L40)(7L(.9/X/39T9(39>86L4.0@9/69/\-:0/M)07:0 T=\9H4SM6.1(.:0/>6I9a-9@84.(:03(H.0L4=5934;)3.0<9()63A636>39(/(,)*,84.(:03(H.!OO9(:6@2>9XLL)!!$$$! C%$#&$*C& G$* (!)!O6T05=IY![6)0/9[40@9H0!XT@6)U03304I09)0*230T9)93=SY/@9>039/HN634(@1(.346A636.:9/039(/(12(:686L40)(7L(S .9/679/346M.676/>6(1A6H.0@039(/M.(@->37(,)*2L6>3.(7>I633!&""C!J$#!$*JJ& J%J* (J)! (^@6/07’!P0.>90N2!20/>46ZSM6@.6/(8!’()**2L6>3.(L4(3(:63.9>N634(@71(.346A636.:9/039(/(186L4.0@9/6(. 86130Z9@9:69/\-:0/;.9/6;79/HO03>40/@U)(5SY/b6>39(/M.(>6@-.67(,)*,M40.:O9(:6@X/0)!&""C!&B#&&$*&#GC &#"J* (%)!?)746.961!\(7/=*2L6>3.(L4(3(:63.9>A636.:9/039(/(12(:686L40)(7L(.9/7;79/H!!!cSA9L46/=)S&SM9>.=)4=@.0Z=)(,)* O-))M40.:2>9X779-3;/946ZSM6@.6/(8!X)T6.(NY!P0.>90N2!’()**A636.:9/039(/(186L4.0@9/6(.86U30Z9@9:65934M0))0@9-:#%$9/ M40.:0>6-39>0)7T=U)(5Y/b6>39(/(,)*d-9:X/0)#O0.>6)(/0$!&""#!&B#%$*J!& J!B* (#)!肖!松!李常洲*头孢拉定胶囊的一阶导数分光光度测定 (,)*中国医药工业杂志!!$$$!J&#!$*CG!"%* (C)!YZa-96.@(M!P-396..6ZN8!P(:6ZS\6/7X!’()**29:-)30/6(-7A636.:9/039(/(186L4.0@9/60/@86L40)6e9/9/26.-: T=A6.9<039<62=/>4.(/(-7U)-(.67>6/>62L6>3.(7>(L=(,)*X/0)I633!&""$!!#J$*%GC B$B* (G)!f0/H,9/H46!]4(-P-0/Hb-/!]40/HP-9)9/H!’()**A636.:9/039(/(12(:686L40)(7L(.9/79/M40.:0>6-39>0)U(.:-)0S 39(/7T=0U)-(.67>6/>6d-6/>49/HN634(@(,)*X/0)8(::-/!&""#!J#B$*&#C &#"* %"" 西南师范大学学报!自然科学版"!!!!!!!!!!!!第!"卷 !""!f0/H,9/H46#]4(-P-0/Hb-/#80(R94-9#’()**A636.:9/039(/(18610@.(e9)86L4.0@9/6861(30e9:-:X:(e9>9))9/T= U)-(.67>6/>62L6>3.(7>(L=;79/HX)‘*A6H.@/!,"*X/0)I633#&""G#J&$#%&&$%C &$#$* !&$"X)=UX#\61/05=N N#O6)0)U*X26)6>39<62L6>3.(1)-(.9:63.9>N634(@1(.346A63/*(12(:6&SX:9/(>6L40)(7L(.9/7 9/U(.:-)039(/70/@O(9)*U)-9@7!,"*X/0)I633#&""##!"$&%&&&C J$* !&&"809V69SM9/H#Q-=0/Hf0(SP-(#I9/R-6Sf-0/#’()**M4(3(>46:9>0)U)-(.9:63.9>A636.:9/039(/(186L4.0@9/6!,"*XS /0)I633#&""G#J&$J%&%J" %B$* !&!"杨!梅#张文伟#周丹红#等*荧光法快速分析胶囊中的头孢拉定含量 !,"*分析试验室#!$$$#&"$&%&## #C* !&J"f0/H,9/H46#N0d-0/)9#V-R90#’()**X/65I-:9/67>6/>62L6>3.(:63.=1(.346A636.:9/039(/(12(:6’SI0>30:9> X/39T9(39>7!,"*X/0)I633#&"""#J!$J%&%C& %G$* !&%"范顺利#吕!超#周庆祥#等*流动注射化学发光法测定头孢拉定 !,"*分析化学#!$$&#!"$J%&J#C J#"* !&B"陈小利#张成孝*流动注射电化学发光法测定头孢拉定的研究 !,"*陕西师范大学学报$自然科学版%#!$$J#J&$&%&C# CG* !&#"陈朝晖#蔡富春#黄玉明#等*胶束增敏流动注射化学发光法测定头孢哌酮钠 !,"*西南师范大学学报$自然科学版%# !$$!#!C$B%&G$# G&$* ,-./00123,453/67/6/.489/04:;<-=8>6?4@.1-6AB431<231640@46@4 C4.45316/.1-6-DA4EB5/:164F4601.1G4:HI;<2-540@416 8\?+]40(S4-9&#!#!\;X+Pf-S:9/H& &D!"#$$%$&’#()*+,-./01’#()*"/%203*0((-*03#!$4,#5(+,’#*0/6$-)/%70*8(-+*,.#’#$039*03%$$C&B#’#*0/’ !D:$03"#/03;-/0"##!$4,#5(+,’#*0/<3-*"4%,4-/%70*8(-+*,.#:$03"#/03’#$039*03%$!%#$#’#*0/ %H0.5/@.&X79:L)6#1073>46:9)-:9/67>6/>6:634(@-79/H1)(59/b6>39(/97@67>.9T6@1(.346@636.:9/039(/ (1>6L4.0@9/6*W46:634(@97T076@(/346>46:9)-:9/67>6/>6.60>39(/(134673-@96@@.-H5934L(30779-: L6.:0/H0/0369/L()=L4(7L4(.9>0>9@:6@90#76/7939Z6@T=1)-(.67>69/*;/@6.346(L39:0)>(/@939(/7#346 >46:9)-:9/67>6/>69/36/793=507)9/60.3(346>6L4.0@9/6>(/>6/3.039(/9/346.0/H6(1&D$E&$FG"!D$E &$FBH(:I59340@636>39(/)9:93(1JD$E&$F"H(:I*W46.6)039<6730/@0.@@6<9039(/97&D%K1(.%D$E &$F#H(:I>6L4.0@9/6$&_&&%*W46:634(@5077->>6771-))=0LL)96@3(346@636.:9/039(/(1>6L4.0@9/69/ 7L9‘6@4-:0/-.9/60/@7=/34639>70:L)67* J4I=-5:0&>46:9)-:9/67>6/>6’>6L4.0@9/6’1)(5S9/b6>39(/0/0)=797 责任编辑!潘春燕!!!! B""第#期!!!!!! !陈朝晖!等"荧光素增敏高锰酸钾化学发光法测定头孢拉定