巨噬细胞吞噬现象的实验观察
一(实验目的:
1. 观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。
2. 掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。 二(实验原理
吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成,具有非特异性免疫功能。当病原微生物或其他异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又有趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动,主动向病原体或异物移动,在接触到病原体或异物时,即伸出伪足将之包围,并内吞入细胞,形成吞嗜体,继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合形成吞噬性溶酶体,通过其水解酶作用,将病原体杀死,消化分解,最后将不能消化的残渣排除细胞外。
三(实验用品
1.器材:显微镜 解剖盘 剪刀 镊子 载玻片 盖玻片 注射器 吸管 2.试剂:A.0.85%生理盐水
B.alsever溶液(葡萄糖2.05g 柠檬酸钠0.89g 柠檬酸0.05g 氯化钠0.42g 蒸馏水100ml)将alsever溶液ph调至7.2,高压灭菌10分钟,保存于4?冰箱中 。
C.0.4,台盼蓝染液
D.4.0,淀粉肉汤(牛肉膏0.3g 蛋白胨1.0g 氯化钠0.5g 蒸馏水100ml 含台盼蓝染液)加热后加入可溶性淀粉6.0g,促使溶解,再煮沸灭菌,置4?冰箱中保存,用时水浴融化,加入适量台盼
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蓝染液混匀,使其成蓝色。
3.材料:A.小白鼠
B(1,鸡红细胞悬液(从健康鸡翼静脉采血1ml,放入盛有4mlalsever溶液瓶中,混匀置4?冰箱中备用。用时加0.85,生理盐水离心,洗涤两次,再用生理盐水配成1,浓度悬液。) 四(实验方法
1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6,淀粉肉汤1ml。
2.试验时,将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1,鸡红细胞悬液1ml,轻按小鼠腹部,使悬液分散。
3.二十分钟后,用颈椎脱臼法处死小鼠。
4.将小鼠置于解剖盘中,剪开腹部,把内脏推向一侧,用不装针头的注射器或吸管取腹腔液。
5.取一干净载玻片,滴一滴腹腔液,盖上盖玻片,置显微镜下观察。
五(实验结果
2
10*100
图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞;较大的呈圆形或不规则细胞,内含蓝色颗粒的为巨噬细胞,仔细观察玻片,可见巨噬细胞吞噬红细胞的过程。
六(结果
分析
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1、通过观察,可发现巨噬细胞有伪足和细胞膜,伪足能够将外来异物包围,将外来物黏着在巨噬细胞的周围,细胞膜通过其流动性将外来异物吞噬并形成吞噬泡。
2、在显微镜下能观察到吞噬的动态过程,一个吞噬细胞可吞噬一到多个红细胞并将其分解。
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