菌落总数的测定操作
规程
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文件标题 菌落总数的测定操作规程
一、适用范围:通常用于细菌菌群总数的检测。
二、操作内容:
1. 检验程序:
检样 ? 按
规定
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稀释倍数将样品稀释至无菌水中 ? 吸取1ml加入灭菌平皿内 ? 每皿内加入约15mL平板计数琼脂培养基 ? 36?1?培养 48?2h ? 菌落计数 ?
报告
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2. 操作
步骤
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:
2.1 以无菌操作,将检样10g(或ml)样液放于含有90ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶
内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
2.2 用1ml 灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml 灭菌生理盐水或其他稀释液的
试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1:100的稀释液。
2.4 根据质量
标准
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要求细菌总数?1000个/g(mL),按1:10稀释,标准细菌总数?10000个/g(mL),
按1:100稀释。
2.5 稀释液移入平皿后,应及时将凉至46?营养琼脂培养基(可放置于46?1?水浴保温)注入平皿
约15ml,并转动平皿使混合均匀。同时将平板计数琼脂培养基倾入空的灭菌平皿内作空白对照。
2.6 待琼脂凝固后,翻转平板,置36?1?温箱内培养48?2h。
2.7 菌落计数方法:做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。