HBD3、Hst5抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究

HBD3、Hst5抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 广西医科大学 硕士学位论文HBD3、Hst5抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 姓名:林小洁 申请学位级别:硕士 专业:口腔内科学 指导教师:陶人川 20100501,,,,、,,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘 附作用实验研究 摘要目的:体外培养人牙龈角化上皮细胞，在此基础上进一步探讨人类,,防御素,(,,,,)、富组蛋白,(,,,,)对白色念珠菌的抗菌活性与作用机制，及其抑制白色念珠菌对口腔上皮细胞的粘附作用。方法:通过体外培养人牙龈上皮细胞的模型，利用抗菌活性试验，透射电镜观察,,,,与,,,,对白色念珠菌的抗菌作用及抑制白色念珠菌对口腔上皮细胞的粘附。结果: 人工合成,,,,、,,,,分别在相对较低浓度范围可杀死大部分白色念珠菌，,,,,,分别为(,(,,,,,,,(,,,,,,,,;,(,,，,(,,,,,,,,)及,,,,, (,,(,,?,(,,,,,,,,;,,(,,,,,,,,,,(,,,,,,,,)。且本实验显示，在相同浓度下，,,,,比,,,,对白色念珠菌具有更强大的抗菌活性(,,,(,,,);透射电镜观察到,,,,、,,,,作用下的白色念珠菌菌体胞壁、胞膜不完整，断裂缺损，胞质内容物外流;均能在一定程度上抑制白色念珠菌粘附于人牙龈上皮细胞。结论:在体外培养的牙龈上皮细胞的模型中，,,,,、,,,,均对白色念珠菌 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 现出相对较强的抗菌活性，能引起菌体胞壁胞膜的破坏，诱导胞质内,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文容物外溢，从而导致菌体死亡，对白色念珠菌在牙龈上皮细胞的粘附具有抑制作用。关键词人类,,防御素,，人类富组蛋白,，白色念珠菌，抗菌活性，牙龈上皮细胞，粘附,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 ,,,,, ,, ,,,,, ,,,,—,,,,,,，,一,、,，,,町，,, ,,,，,,, ,么?,皿)爿彳三口五洌?, ,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,, ,,呵,，,,, ,,，,,,,，,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,:,,,, ,,,,, ,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,;,,,,,, ,,,,,;,,,,,,, ,, ,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,一,(,,,,);,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,(,,,,),,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;,,,，,,, ,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,;,,, ,,,,,,,;, ,, ;,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,;,,,, ,, ,,,,,(,,,,,,:,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,, ;,,,,,,, ,, ,,,,,(,,, ,,,,,,,,,,,;,,,,,, ,, ,,, ,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;,,, ,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,，,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,;,,, ,,,,,,,;, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,,,, ;,,,, ,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,,;,,,, ,,;,,,;,,, ,,,,,,,(,,,,,,: ,,,,,,,,; ,,,, ,,, ,,,, ; ,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,,, ,,,,;,,,,,,, ,, , ,,,,,,, ,,,,, ,,,,,(,(,,,土,(,,,,,,,,; ,(,,，,(,,,,,,,,，,,,,,;,,,,,,)，,,,,,(, ,(,,，,(,,,,,,,,;,,(,,士,(,, , ,,,,,，,,,,,;,,,,,,)(,,,, ,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,;,,,, ,;,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;,,, ,,,, ,,,,,, ,,, ,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,,,,(,,,(, , ,)(,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,,;,,,,,,;,,,;,,, ,,,,,,, ,,,,;,,, ,,,,, ,,;,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕十研究生论文,,,,,,,, ,, ;,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,,,,，,,,, ,,,,,,, ,, ;,,,,,,,, ,,,,,,,,(，,,,,,,,,,，,,,, ,,,, ,,, ,,,, ;,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,;,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,(,,,;,,,,,,:，, ,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,，,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,;,,,, ,;,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;,,,，,,,,,,, ,,;,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,,,,，,,, ,,,,,, ,, ;,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,，,,,;, ,,,,, ,,,, ,, ;,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,(，, ,,,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,,,,;,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,;,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,,(,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,一,，,,,,, ,,,,,,,,,,，,,,,,,, ,,,,;,,,，,,,,,;,,,, ,;,,,,,,，,,,,,,,, ,,,,,,,,,,，,,,,,,,;, ,,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 英文缩略词表缩略词 英文全称 中文名称,,,, ,,, ,,,;,,,,,, ,,,, , ,,, 抗微生物多肽,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, 人类,防御素,,,——, ,,,,, ,—,,,,,,,,,, 人类,防御素一,,,,, ,,,,, ,,,,,,,, , 人类富组蛋白,,—,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,;,,, ,,,,,, 角化细胞无血清培养基,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,;, 牛垂体提取物,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,;,,, 表皮生长因子,,,,,,, ,,,,,,, 中性蛋白酶,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,, ,; ,;,, 乙二胺四乙酸,(, ,,,,,,, ,,,,;,,, 白色念珠菌,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,,, 集落形成单位,，, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, 最小抑菌浓度,,, ,,,,,,, ,, ,,,;,,,, ;,,;,,,,,,,,, 最小杀真菌浓度,, ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, 致死浓度,,, ,,,,,,,,,—‘,,,,,,,, ,,, ,,, 磷酸盐缓冲盐水,, ,,,,,,,, , ,,,,,, 磷酸盐缓冲液,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,;,,,, ,,;,,,;,,, 迈射电镜 透?涞缇?广西医科大学研究生学位论文独创性声明 秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:卞归、、屯 签字日期汕,,年,月，阳 学位论文版权使用授权 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 本学位论文作者完全了解广西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权广西医科大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) ,学位论文作者签名:幸扣、,茏 导师签字:,,纱沁‘,签字日期:沙,哞,月，?日 签字日期:跏，,年,’月,?日,,,,、,,,,抑制臼色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 (?上—,一 月，,吾 哺乳动物在预防致病微生物感染的全过程中，除了与体表皮肤、黏膜的机械屏障和宿主后天产生的适应性免疫系统有关外，还与机体产生的抗微生物多肽和蛋白(,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,，,,,)密切相关，,,,包括防御素、过氧化物酶、乳铁蛋白、溶菌酶、富组蛋白类等,’,,。其中防御素是一类富含有半胱氨酸的阳离子抗微生物多肽，具有广谱的抗微生物活性，能有效杀死真菌、革兰阳性和阴性菌，并能灭活某些病毒等。富组蛋白是人类腮腺和颌下腺分泌的一组富含组氨酸的阳离子多肽，具有广谱抗菌及抗真菌作用。 防御素(,,,,,,,,,)是一类在生物界广泛的小分子抗菌肽。它的特点是由,,,,,个氨基酸，包括,,,个保守的半胱氨酸，并通过半胱氨酸分子间二硫键使肽环形成反向平行的,一片状结构。防御素的根据分子结构特征和来源的不同，可分成,种:,防御素、,防御素、,一防御素、昆虫防御素和植物防御素，其中前两种存在于哺乳动物的组织和器官中。至今发现,种人,的防御素(,,,,, , ,,,,,,,,)，,种人,防御素(,,,,, , ,,,,,,,,)。人,的防御素主要参与全身和小肠的防御功能，人,防御素则在保护上皮细胞和粘膜免疫感染方面起重要的作用。成熟的,一防御素是由,,—,,个氨基酸残基组成，其分子内包含在特定位置的,个保守半胱氨酸残基形成,个二硫键稳定其结构，连接方式为,,,一,与,,,一,，,,,,，与,,,一,和,,,,,与,,,,,相配对连接口,。分子中均富古有精氨酸，此外还有,个保守的残基，即甘氨酸、脯氨酸、苏氨酸和赖氨酸(,一防御素包括,,,一,、,,,,,、,,,,,、,,,,,、,,,,,、,,,,,。,,,,,,等,,在?玻埃埃澳甏右疾?に鹱橹蟹?至丝梢杂行 У钟锢际涎粜砸约耙跣跃模龋拢模常?捎媒鸹疲龋拢模场?龋螅簦狄种瓢咨钪榫匝丽上皮细胞粘附作用实验研究色葡萄球菌亲和柱进行了分离纯化。从蛋白水平上首先以有效抵御革兰氏阳性以及阴性菌的,,,,，并采用金黄色葡萄球菌亲和柱进行了分离纯化，从蛋白水平上首先发现了,,,一,。 ,,,,主要在皮肤和扁桃腺中有较强的表达，此外，在呼吸道及生殖道上皮细胞、成年人心脏、骨骼肌、胎儿胸腺、食道、口腔黏膜、气管和胎盘膜中均有表达陌’,】。,,,,可被诱导表达，外界刺激如，，,, ,，,,,—,， ,一干扰素，,,,，革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌都可提高其表达量口’,’,，引。,,,,,,等口,研究显示,,,,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的,,,,分别是,?,(,、,,?,(,、,,?,(,,,,,,。同时，,,,,与,,,,均对白色念珠菌、热带念珠菌、近平滑假丝念珠菌及克柔氏念珠菌等不同的念珠菌菌属有着较强的抗菌活性。在,,,,等阳,实验中，,,,,对,(,,,,;,,, ,,,,、,,,, ,,,的最小抑菌浓度(,，,)分别为,(,、,(,,,,,,。 人类唾液中的富组蛋白(,,,,, ,,,,,,,,,，即,,,,)主要来源于腮腺、颌下腺、舌下腺。在健康成人刺激性唾液约含,,,,,,,,,,，非刺激性唾液约含有,,,, ,,,,,,,。,,的人腮腺唾液蛋白中含富组蛋白混合物,,,,阿,。唾液富组蛋白分子质量为, ,,,(,,,,, ,,,(, ,,，为富含组氨酸的阳离子小蛋白家族。在天然条件下其结构特征是:富含阳离子，同时含有一条疏水侧链和一条亲水侧链，具有规律的,,螺旋和,一折叠结构。人类的唾液富组蛋白家族共含有,,个成员，即,,,,,,,, ,,,,。,,,,,,,, ,、,,,,,,,,, ,、,,,,,,,,, ,在腮腺液中含量最多(,,,,,,,,,)，称主要富组蛋白，其他富组蛋白含量少，称次要富组蛋白阳’,引。实验显示，富组蛋白,在体外显示出强大的抗白色念珠菌作用，对对数生长期及平台期的 白色念珠茵均表现出浓度一时间依赖性的抑制作用。富组蛋白,、,、,杀死念珠菌孢子半数致死量分别,(,、,(,、,(,,,,,,,,，杀死芽管的半数致死量分别,,(,、,,(,、,(,,,,,,,,【,,,。,,,,,,,,,,,等研究也显示富组蛋白,对数生长期白色念珠菌,,，的半数致死量为,(,?,(,,,。 ,,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 由于防御素作用于微生物细胞膜的抗菌机制，不同于其他抗微生物肽类作用于靶细胞酶的方式，因此病原微生物不易产生耐药性。多数观点认为，防御素可以在菌体胞膜上形成多个微孔或通道，这又促进多肽更多的进入菌体，造成胞膜完整性破坏，,,,、,，丢失，呼吸受阻，最终导致菌体死亡,,，;目前认为,,,,对病原微生物的杀伤作用主要分成三个阶段:第一阶段，带正电荷的,,,,被微生物细胞膜上某些位点所带的负电荷吸附后，覆盖在细胞膜上;第二阶段，在膜电势差的作用下，耶,一,和,,,一,以单体而,,,,,以二聚体的形式在膜上向内侧排列成圆筒状，其单体或二聚体的疏水侧朝外镶嵌在膜的脂质体中，亲水侧朝向圆筒内，形成具有通透性的通道孔洞;第三阶段，细胞形成不可逆损伤后，,,,,和外环境中多种物质与水分进入细胞，同时细胞中的物质向外泄露，最终导致细胞被破坏,引。也有研究证实，,,, ,杀死白念菌开始是通过绑定胞壁蛋白,,,,,,,，移位到胞内，再通过,,,,,钾转运蛋白机制引起胞内,,,及小分子核苷酸类和离子流 出,,,,’,,,，造成菌体死亡。 由于抗生素的、免疫抑制剂的广泛使用，以及艾滋病的流行，使真菌，特别是白色念珠菌的感染成为口腔常见感染性疾病。介于传统抗真菌的药物对全身的副作用明显，耐药菌株日益增多抗真菌药物成为研究的热点。尤其是人类,防御素,(,,,,, , ,,,,,,,,,,，,,,,,)及人类富组蛋白,(,,,,, ,,,,,,,,,，,,,,)对白色念珠菌具有较强的抗菌力，毒副作用小，耐药菌株少等优点，受到广泛重视。 本研究旨在体外培养人牙龈角化上皮细胞，建立白色念珠菌感染角化细胞的模型。通过抗菌活性试验进一步观察,,,,与,,,,对白色念珠菌的抗菌活性与作用机制及其抑制白色念珠菌对口腔上皮细胞的粘附作用。为将来,,,一,、,,,,在口腔念珠菌病的诊疗提供依据和积累资料。,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 ,材料与方法,(,主要试剂 标准白色念珠菌株,,,,,,,,, 南京便诊 液体沙氏培养基 北京陆桥技术有限责任公司 固体沙氏培养基 北京陆桥技术有限责任公司 人类,防御素,,(,,,,) ,,,,,,,,,公司 人类富组蛋白,(,,,,) ,，,,,公司 人角化细胞无血清培养基,,,,, ,，,,,公司 牛垂体浸出液(,,,) ,，,,,公司 表皮生长因子(,,,) ,，,,,公司 ,,,,培养基 ,,;,,,,公司 胎牛血清 四季青公司 中性蛋白酶(,,,,,,,) ,，,,,公司 胰蛋白酶 ,，,,,公司 乙二胺四乙酸(,,,,) 上海生工生物工程有限公司 鼠尾胶原 杭州生友生物技术有限公司 广谱单克隆角蛋白抗体(克隆号: ,,,,,,,) 迈新生物公司,(,主要仪器 倒置相差显微镜 日本,,,,,,,公司,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上二皮细胞粘附作用实验研究 ,,,培养箱 美国,,,,,, ,,,,,公司 ,,,型智能生化培养箱 宁波江南厂 ,,,,,,,多管架自动平衡离心机 湘仪离心机仪器有限公司 超净工作台 苏净,，,,,,,公司 ,,,型摇床 中国科学院武汉科学仪器厂 ,,,,?电冰箱 ,，,,,,,公司 高压灭菌锅 上海泸西公司 ,,,—,,,电热恒温鼓风干燥箱 上海亚荣公司,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 ,实验方法,(,病例的采集 ,,,,年,月,,,,,年,月期间前往广西医科大学附属口腔医院口腔颌面外科及牙周粘膜科门诊就诊的患者，年龄在,,,,一,,岁之间，采集因拔除下颌第三磨牙手术时修整的牙龈或正畸前冠延长术修整遗弃的正常牙龈。,(,抗菌活性的研究,(,(,标准白色念珠菌菌液制备 标准白色念珠菌,,,,,,,,,质控菌株接种在液体沙氏培养基中，,,。,摇床培养,,,，,,,,转,,,,，离心,,,,，弃去上清夜，，,,,,,(,,,(,)洗涤,次，用血细胞计数板计数后，调整菌悬液浓度为,×,,,;,,,,,,,胡。标准菌悬液制备后立即使用。,(,(,药液制备 ,,,,,、,, ,,,, ,,一,这,种抗菌肽用灭菌双蒸水进行倍比稀释，稀释成,个浓度梯度，使,,,,,及,,,,,,,,,,浓度为,,,、,,,、,,(,、,,(,,、,,(,,,、,(,、,(,、,(,,、,(,,, ,,,‘,〕,。,(,(,抗菌活性的研究及结果判定 取,,,孑,板，将调整好的各个浓度的抗菌肽加入编号的卜,孔，每孔为,,,,。再将配制好的菌液分别加入上述各孔，每孑,,,,,。这,组均于第,,,,加入,,,,菌液，,,,,的,,,,,,,,注射用两 性霉素,，为标准对照孔;第,,;,,只加入,,,,菌液(未处理的菌体)，,,,,,,，正常对照孔:第,,孔只加入,,,,,,，为空白对照孔。各组反应物于,,?培养箱培养,,，分别稀释,,倍后吸取,,,,反应物接种于沙氏琼脂培养基中，,, ,;培养,,,后数菌落数。与,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈(，:皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文未处理过的菌液正常对照组相比较，计算杀菌率:(卜加入抗菌肽组菌落数,未处理组菌落数)×,,,,。每组实验组重复,次测定各抗菌肽对白念菌的抗菌浓度,引。,(,人口腔牙龈上皮细胞分离与培养,(,(,消化液配制 ,,,,,,,液配制,(,,,,,中性蛋白酶液、,,,配制,(,,,胰蛋白酶:,(,,,,,,,以,:,混合，过滤灭菌后一,,?保存备用。,(,(,口腔牙龈上皮细胞分离与培养 无菌条件下取健康人拔智齿时切除的牙龈粘膜(,,,,,岁)。加入含有,,,,,,,,的双抗(青霉素，链霉素)及,,,,,,,的两性霉素,的,,,反复冲洗。除去粘膜下组织，剪成,,,×,,,的小块。牙龈上皮组织中加入,(,,,中性蛋白酶，,。,消化,,,一,,,，将表皮上层及上皮下层分开。将上皮层置于无菌青霉素瓶，剪碎，加入混合消化液中(,(,,,胰蛋白酶:,(,,,,,,,,，:,)，,,?振荡消化,”,,,,,,，加入含有,,,胎牛血清的,,,,培养液终止消化。,,,目细胞筛滤过，洗涤，去上清液，加入角化细胞培养液(,，,,,)(含有重组表皮生长因子,,,,,(卜,(,,,,,,、牛垂体提取物,,,,,—,,,,,,,)。用吸管吹打成单细胞悬液，细胞计数板计数，,×,,,,;,,接种子,孔板(提前孔里铺上鼠尾胶原),,’,叫。,,,,,饱和湿度培养箱中培养，第,天首次换液，以后每两天换液,次。细胞长至培养瓶的,,,时传代，用混合消化液，,,?消化,,,,,,，镜下见胞质回缩即终止消化，以,×,,,,,,的密度接种于,孔板，每孑,,,,。,(,(,牙龈角化细胞免疫学鉴定 取第,代细胞爬片，,,,洗涤,次，,,,福尔马林溶液固定,,,,,，按照广谱单克隆角蛋白抗体及,,,,免疫组化试剂盒说明书进行免疫组化染色。正常牙龈上皮石蜡切片作为阳性对照组。,,,,、,,,,抑制白色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文,(, ,,,,、,,,,抑制白色念珠菌粘附人角质形成细胞 同上方法采集标准白色念珠菌，菌悬液浓度为,×,,,;,,,,,,。,,,,的茵液分别混于,,,,,,, ,,,,、,,,,,,,,,,各,,,,，终体积,,,,。,,?恒温水浴培养,,，各管混合悬液分别添加入,(,,,,的,,,,,，混匀，各取其中,,,悬液加入,,,,的,,,,,，调整最终菌体浓度,,,;,, ,,,,。角化细胞长至,孔板的,,,,,,时，单层细胞用,,,冲洗,次，,(, ,,的菌体与抗菌肽混合悬液添加入每个孔，为实验组;未添加抗菌肽的正常白色念珠菌,(,,,与角化细胞共同培养为阳性对照组;正常角化细胞为阴性对照组。均,,?培养,,,,,后，吸走未附着的白念菌，,,,冲洗,次，每个孔板铺上沙氏琼脂培养基，,,?培育,,,。与对照组计算,,,,百分数,引，每组实验组重复,次测定,,,,、,,,,作用下白念菌存活率,(加入抗菌肽组菌落数,未处理组菌落数)×,,,,。,(,透射电镜下观察,,,,、,,,,作用下白色念珠菌形态结构 同上方法采集标准白色念珠菌，菌悬液浓度为,×,,,;,,,,,,。,,,,的菌液分别混于 ,,, ,,,,,,,,,、,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,各,,,,，终体积各,,,,。,,?恒温水浴培养,,，,,,,,,,,,转,,,,离心，弃去上清液，加入,,?的融化的,,琼脂。按常规制作透射电镜的标本，观察照相，未添加抗菌肽的,,,,的浓度,×,,,;,,,,,,的白色念珠菌与,,,,的,,为正常对照组。,(,统计学分析 应用,,,,,,(,统计软件对实验数据进行分析，并绘制图表。计量资料以 ,?,,表示，组间的抗菌率采用随机区组方差分析进行比较。检验水准:,,, ,,。,,,,、,,,,抑制自色念珠菌对牙龈上皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级硕士研究生论文 ,结果,(, ,,,,、,,,,对白色念珠菌抗菌活性 ,,,,、,,,,具有广谱的抗微生物活性，能有效杀死真菌、革兰阳性和阴性菌，并能灭活某些病毒等。本研究主要探讨,,,,、,,,,对白色念珠菌的抗菌活性。人工合成,,,,、,,,,分别在相对较低浓度范围 (,(,—,,(,,,,,,:,,(,—,,(,,,,,,)可杀死大部分白色念珠菌，抑制菌落的形成。且在本实验中，根据浓度一抗菌率曲线计算,,,,的,,,,,、,,,,,分别为(,(,,,?,(,,,,,,,,;,,(,,?,(,,,,,,,,)，而,,,,的，,,,,,,、,,,,,分别为(,(,,?,(,,,,,,,,;,,(,,?,(,,,,,,,,)。以上均显示出,,,,比,,,,对白色念珠菌具有更强大的抗菌活性(,,,(,,,)。注射用两性霉素,(,,,,,,,,)的标准对照组及空白对照组无任何菌落形成。(详见表,、图,) 表, ,,,,、,,,,对白念茵抗菌率,,?,,(,，) ,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,;,,, ,,,,,, ,, ,,,, ,,, ,,,,,?,,、,,,,抑制自色念辣菌对牙龌,皮细胞粘附作用实验研究 ,,,,级碗?研究生论文 ,,,——————?,;二, , , 。, ,, ,, , , ”叫 , ， 崭,,?，，‘, ”叫 ,, .