《医疗机构水污染物排放标准》（GB18466-2005

本电子版内容如与中国环境出版社出版的标准文本有出入，以 中国环境出版社出版的文本为准。 中华人民共和国国家标准 GB 18466-2005 医疗机构水污染物排放标准 Discharge standard of water pollutants for medical organization 2005－07 － 27 发布 2006－01－01实施 国 家 环 境 保 护 总 局 国家质量监督检验检疫总局 发布 目 录 前 言 ............................................................................................................................... II 1范围 .....................................................................................................................................1 2规范性引用文件 .................................................................................................................1 3术语和定义 .........................................................................................................................1 4技术内容 .............................................................................................................................1 4.1污水排放要求 ..............................................................................................................................1 4.2废气排放要求 ..............................................................................................................................4 4.3污泥控制与处置 ..........................................................................................................................4 5处理工艺与消毒要求 .........................................................................................................4 6取样与监测 .........................................................................................................................5 6.1污水取样与监测 ..........................................................................................................................5 6.2大气取样与监测 ..........................................................................................................................7 6.3污泥取样与监测 ..........................................................................................................................7 7标准的实施与监督 .............................................................................................................7 附录 A .............................................................................................................................................8 附录 B ...........................................................................................................................................15 附录 C ...........................................................................................................................................19 附录 D ...........................................................................................................................................21 附录 E............................................................................................................................................23 附录 F ............................................................................................................................................25 I 前 言 为贯彻《中华人民共和国环境保护法》、《中华人民共和国水污染防治法》、《中华人民共和国 海洋环境保护法》、《中华人民共和国大气污染防治法》、《中华人民共和国传染病防治法》，加强 对医疗机构污水、污水处理站废气、污泥排放的控制和管理，预防和控制传染病的发生和流行， 保障人体健康，维护良好的生态环境，制定本标准。 本标准规定了医疗机构污水及污水处理站产生的废气和污泥的污染物控制项目及其排放限 值、处理工艺与消毒要求、取样与监测和标准的实施与监督等。 本标准自实施之日起，代替 GB8978-1996《污水综合排放标准》中有关医疗机构水污染物排 放标准部分，并取代 GB18466-2001《医疗机构污水排放要求》。新、扩、改医疗机构自本标准实 施之日起按本标准实施管理，现有医疗机构在 2007年 12月 31日前达到本标准要求。 本标准的附录 A、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E和附录 F为规范性附录。 本标准为首次发布。 本标准由国家环境保护总局科技标准司提出并归口。 本标准委托北京市环境保护科学研究院和中国疾病预防控制中心起草。 本标准由国家环境保护总局 2005年 07月 27日批准。 本标准由国家环境保护总局负责解释。 II 医疗机构水污染物排放标准 1范围 本标准规定了医疗机构污水、污水处理站产生的废气、污泥的污染物控制项目及其排 放和控制限值、处理工艺和消毒要求、取样与监测和标准的实施与监督。 本标准适用于医疗机构污水、污水处理站产生污泥及废气排放的控制，医疗机构建设 项目的环境影响评价、环境保护设施设计、竣工验收及验收后的排放管理。当医疗机构的办 公区、非医疗生活区等污水与病区污水合流收集时，其综合污水排放均执行本标准。建有分 流污水收集系统的医疗机构，其非病区生活区污水排放执行 GB8978的相关规定。 2规范性引用文件 下列标准和本标准表 5、表 6所列 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 方法标准及规范所含条文在本标准中被引用即构 成为本标准的条文，与本标准同效。当上述标准和规范被修订时，应使用其最新版本。 GB8978 污水综合排放标准 GB3838 地表水环境质量标准 GB3097 海水水质标准 GB16297 大气污染物综合排放标准 HJ/T55 大气污染物无组织排放监测技术导则 HJ/T91 地表水和污水检测技术规范 3术语和定义 本标准采用下列定义。 3.1医疗机构 medical organization 指从事疾病诊断、治疗活动的医院、卫生院、疗养院、门诊部、诊所、卫生急救站等。 3.2医疗机构污水 medical organization wastewater 指医疗机构门诊、病房、手术室、各类检验室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平间 等处排出的诊疗、生活及粪便污水。当医疗机构其他污水与上述污水混合排出时一律视为医 疗机构污水。 3.3污泥 sludge 指医疗机构污水处理过程中产生的栅渣、沉淀污泥和化粪池污泥。 3.4废气 waste gas 指医疗机构污水处理过程中产生的有害气体。 4技术内容 4.1污水排放要求 4.1.1传染病和结核病医疗机构污水排放执行表 1的规定。 4.1.2县级及县级以上或 20张床位及以上的综合医疗机构和其他医疗机构污水排放执行表 2 1 的规定。直接或间接排入地表水体和海域的污水执行排放标准，排入终端已建有正常运行城 镇二级污水处理厂的下水道的污水，执行预处理标准。 4.1.3县级以下或 20张床位以下的综合医疗机构和其他所有医疗机构污水经消毒处理后方可 排放。 4.1.4 禁止向 GB3838I、II类水域和 III类水域的饮用水保护区和游泳区，GB3097 一、二类 海域直接排放医疗机构污水。 4.1.5 带传染病房的综合医疗机构，应将传染病房污水与非传染病房污水分开。传染病房的 污水、粪便经过消毒后方可与其他污水合并处理。 4.1.6 采用含氯消毒剂进行消毒的医疗机构污水，若直接排入地表水体和海域，应进行脱氯 处理，使总余氯小于 0.5mg/L。 表 1 传染病、结核病医疗机构水污染物排放限值（日均值） 序号 控制项目 标准值 1 粪大肠菌群数（MPN/L） 100 2 肠道致病菌 不得检出 3 肠道病毒 不得检出 4 结核杆菌 不得检出 5 PH 6-9 6 化学需氧量（COD） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 60 60 7 生化需氧量（BOD） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 20 20 8 悬浮物（SS） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 20 20 9 氨氮（mg/L） 15 10 动植物油（mg/L） 5 11 石油类（mg/L） 5 12 阴离子表面活性剂（mg/L） 5 13 色度（稀释倍数） 30 14 挥发酚（mg/L） 0.5 15 总氰化物（mg/L） 0.5 16 总汞（mg/L） 0.05 17 总镉（mg/L） 0.1 18 总铬（mg/L） 1.5 19 六价铬（mg/L） 0.5 20 总砷（mg/L） 0.5 2 21 总铅（mg/L） 1.0 22 总银（mg/L） 0.5 23 总Α(Bq/L) 1 24 总Β(Bq/L) 10 25 总余氯 1）2（mg/L） （直接排入水体的要求） 0.5 注：1）采用含氯消毒剂消毒的工艺控制要求为： 消毒接触池的接触时间≥1.5h， 接触池出口总余氯 6.5-10 mg/L。 2）采用其他消毒剂对总余氯不作要求。 表 2 综合医疗机构和其他医疗机构水污染物排放限值（日均值） 序号 控制项目 排放标准 预处理标准 1 粪大肠菌群数（MPN/L） 500 5000 2 肠道致病菌 不得检出 - 3 肠道病毒 不得检出 - 4 pH 6-9 6-9 5 化学需氧量（COD） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 60 60 250 250 6 生化需氧量（BOD） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 20 20 100 100 7 悬浮物（SS） 浓度 （mg/L） 最高允许排放负荷（g/床位） 20 20 60 60 8 氨氮（mg/L） 15 - 9 动植物油（mg/L） 5 20 10 石油类（mg/L） 5 20 11 阴离子表面活性剂（mg/L） 5 10 12 色度（稀释倍数） 30 - 13 挥发酚（mg/L） 0.5 1.0 14 总氰化物（mg/L） 0.5 0.5 15 总汞（mg/L） 0.05 0.05 16 总镉（mg/L） 0.1 0.1 17 总铬（mg/L） 1.5 1.5 18 六价铬（mg/L） 0.5 0.5 3 19 总砷（mg/L） 0.5 0.5 20 总铅（mg/L） 1.0 1.0 21 总银（mg/L） 0.5 0.5 22 总Α(Bq/L) 1 1 23 总Β(Bq/L) 10 10 24 总余氯 1）2）（mg/L） 0.5 - 注：1）采用含氯消毒剂消毒的工艺控制要求为： 一级标准：消毒接触池接触时间≥1h，接触池出口总余氯 3-10 mg/L。 二级标准：消毒接触池接触时间≥1h，接触池出口总余氯 2-8 mg/L。 2）采用其他消毒剂对总余氯不作要求。 4.2废气排放要求 4.2.1 污水处理站排出的废气应进行除臭除味处理，保证污水处理站周边空气中污染物达到 表 3要求。 4.2.2传染病和结核病医疗机构应对污水处理站排出的废气进行消毒处理。 表 3 污水处理站周边大气污染物最高允许浓度 序号 控制项目 标准值 1 氨（mg/m3） 1.0 2 硫化氢（mg/m3） 0.03 3 臭气浓度（无量纲） 10 4 氯气（mg/m3） 0.1 5 甲烷（指处理站内最高体积百分数 %） 1% 4.3污泥控制与处置 4.3.1栅渣、化粪池和污水处理站污泥属危险废物，应按危险废物进行处理和处置。 4.3.2污泥清淘前应进行监测，达到表 4要求。 表 4 医疗机构污泥控制标准 医疗机构类别 粪大肠菌群数 (MPN/g) 肠道致病菌 肠道病毒 结核杆菌 蛔虫卵死亡率（%） 传染病医疗机构 ≤100 不得检出 不得检出 - >95 结核病医疗机构 ≤100 - - 不得检出 >95 综合医疗机构和 其它医疗机构 ≤100 - - - >95 5处理工艺与消毒要求 5.1 医疗机构病区和非病区的污水，传染病区和非传染病区的污水应分流，不得将固体传染 性废物、各种化学废液弃置和倾倒排入下水道。 4 5.2 传染病医疗机构和综合医疗机构的传染病房应设专用化粪池，收集经消毒处理后的粪便 排泄物等传染性废物。 5.3化粪池应按最高日排水量设计，停留时间为 24-36h。清掏周期为 180-360d。 5.4医疗机构的各种特殊排水应单独收集并进行处理后，再排入医院污水处理系统。 5.4.1低放射性废水应经衰变池处理。 5.4.2洗相室废液应回收银，并对废液进行处理。 5.4.3口腔科含汞废水应进行除汞处理。 5.4.4检验室废水应根据使用化学品的性质单独收集，单独处理。 5.4.5含油废水应设置隔油池处理。 5.5 传染病医疗机构和结核病医疗机构污水处理宜采用二级处理+消毒工艺或深度处理+消毒 工艺。 5.6 综合医疗机构污水排放执行排放标准时，宜采用二级处理+消毒工艺或深度处理+消毒工 艺；执行预处理标准时宜采用一级处理或一级强化处理+消毒工艺。 5.7 消毒剂应根据技术经济分析选用，通常使用的有：二氧化氯、次氯酸钠、液氯、紫外线 和臭氧等。采用含氯消毒剂时按表 1、表 2要求设计。 5.7.1采用紫外线消毒，污水悬浮物浓度应小于 10 mg/L，照射剂量 30-40mJ/cm2,照射接触时 间应大于 10s或由试验确定。 5.7.2采用臭氧消毒，污水悬浮物浓度应小于 20 mg/L，臭氧用量应大于 10mg/L,接触时间应 大于 12min或由试验确定。 6取样与监测 6.1污水取样与监测 6.1.1应按规定设置科室处理设施排出口和单位污水外排口，并设置排放口标志。 6.1.2表 1第 16-22项，表 2第 15-21项在科室处理设施排出口取样，总Α、总Β在衰变池出 口取样监测。其它污染物的采样点一律设在排污单位的外排口。 6.1.2医疗机构污水外排口处应设污水计量装置，并宜设污水比例采样器和在线监测设备。 6.1.3 监测频率 6.1.3.1粪大肠菌群数每月监测不得少于 1次。采用含氯消毒剂消毒时，接触池出口总余氯每 日监测不得少于 2次（采用间歇式消毒处理的，每次排放前监测）。 6.1.3.2肠道致病菌主要监测沙门氏菌、志贺氏菌。沙门氏菌的监测，每季度不少于 1次；志 贺氏菌的监测，每年不少于 2次。其他致病菌和肠道病毒按 6.1.3.3规定进行监测。结核病 医疗机构根据需要监测结核杆菌。 6.1.3.3收治了传染病病人的医院应加强对肠道致病菌和肠道病毒的监测。同时收治的感染上 同一种肠道致病菌或肠道病毒的甲类传染病病人数超过 5 人、或乙类传染病病人数超过 10 人、或丙类传染病病人数超过 20人时，应及时监测该种传染病病原体。 6.1.3.4理化指标监测频率：pH 每日监测不少于 2次，COD和 SS每周监测 1次，其他污染物 每季度监测不少于 1次。 5 6.1.3.5 采样频率：每 4小时采样 1次，一日至少采样 3次，测定结果以日均值计。 6.1.4监督性监测按 HJ/T91执行。 6.1.5监测分析方法按表 5和附录。 6.1.6污染物单位排放负荷计算见附录 F。 表 5 水污染物监测分析方法 序号 控制项目 测 定 方 法 测定下限（mg/L） 方法来源 1 粪大肠菌群数 多管发酵法 附录 A 2 沙门氏菌 附录 B 3 志贺氏菌 附录 C 4 结核杆菌 附录 E 5 总余氯 N,N-二乙基-1,4-苯二胺分光光度法 N,N-二乙基-1,4-苯二胺滴定法 GB11898 GB11897 6 化学需氧量(COD) 重铬酸盐法 30 GB11914 7 生化需氧量(BOD) 稀释与接种法 2 GB7488 8 悬浮物(SS) 重量法 GB11901 9 氨氮 蒸馏和滴定法 比色法 0.2 0.05 GB7478 GB7479 10 动植物油 红外光度法 0.1 GB/T16488 11 石油类 红外光度法 0.1 GB/T16488 12 阴离子表面活性剂 亚甲蓝分光光度法 0.05 GB7494 13 色 度 稀释倍数法 GB11903 14 pH值 玻璃电极法 GB6920 15 总 汞 冷吸收分光光度法 双硫腙分光光度法 0.0001 0.002 GB7468 GB7469 16 挥发酚 蒸馏后 4-氨基安替比林分光光度法 0.002 GB7490 17 总氰化物 硝酸银滴定法 异烟酸-吡唑啉酮比色法 吡啶-巴比妥酸比色法 0.25 0.004 0.002 GB7486 GB7486 GB7486 18 总 镉 原子吸收分光光度法（螯合萃取法）双硫腙分光光度法 0.001 0.001 GB7475 GB7471 19 总 铬 高锰酸钾氧化－二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7466 20 六价铬 二苯碳酰二肼分光光度法 0.004 GB7467 21 总 砷 二乙基二硫代氨基甲酸银分光光度法 0.007 GB7485 22 总 铅 原子吸收分光光度法（螯合萃取法）双硫腙分光光度法 0.01 0.01 GB7475 GB7470 23 总 银 火焰原子吸收分光光度法 镉试剂 2B分光光度法 0.03 0.01 GB119079 GB11908 24 总Α 厚源法 0.05Bq/L EJ/T1075 25 总Β 蒸发法 EJ/T900 6 6.2大气取样与监测 6.2.1污水处理站大气监测点的布置方法与采样方法按 GB16297中附录 C和 HJ/T55的有关规 定执行。 6.2.2采样频率，每 2h采样一次，共采集 4次，取其最大测定值。每季度监测一次。 6.2.3监测分析方法按表 6。 表 6 大气污染物监测分析方法 序号 控制项目 测定方法 方法来源 1 氨 次氯酸钠-水杨酸分光光度法 GB/T14679 2 硫化氢 气相色谱法 GB/T14678 3 臭气浓度（无量纲） 三点比较式臭袋法 GB/T14675 4 氯气 甲基橙分光光度法 HJ/T30 5 甲烷 气相色谱法 CJ/3037 6.3污泥取样与监测 6.3.1取样方法，采用多点取样，样品应有代表性，样品重量不小于 1kg。清掏前监测。 6.3.2监测分析方法见附录 A、附录 B、附录 C、附录 D和附录 E。 7标准的实施与监督 7.1本标准由县级以上人民政府环境保护行政主管部门负责监督实施。 7.2 省、自治区、直辖市人民政府对执行本标准不能达到本地区环境功能要求时，可以根据 总量控制要求和环境影响评价结果制定严于本标准的地方污染物排放标准。 7 附录 A （规范性附录） 医疗机构污水和污泥中粪大肠菌群的检验方法 A1 仪器和设备 A1.1 高压蒸汽灭菌器。 A1.2 干燥灭菌箱。 A1.3 培养箱：37℃。 A1.4 恒温水浴箱。 A1.5 电炉。 A1.6 天平。 A1.7 灭菌平皿。 A1.8 灭菌刻度吸管。 A1.9 酒精灯 A2 培养基和试剂 A2.1 乳糖胆盐培养液 A2.1.1成分 蛋白胨 20g 猪胆盐（或牛、羊胆盐） 5g 乳糖 5g 0.4％溴甲酚紫水溶液 2.5mL 蒸馏水 1000mL A2.1.2 制法 将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于 1000mL蒸馏水中，调整 pH到 7.4，加入指示剂，充分 混匀，分装于内有倒管的试管中。115℃下灭菌 20min。贮存于冷暗处备用。 A2.2 三倍浓度乳糖胆盐培养液 A2.2.1成分 蛋白胨 60g 猪胆盐（或牛、羊胆盐） 15g 乳糖 15g 0.4％溴甲酚紫水溶液 7.5mL 蒸馏水 1000mL A2.2.2 制法 制法同附录 A2.1.2。 A2.3 伊红美兰培养基（EMB培养基） A2.3.1 成分 蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 20g 2％伊红水溶液 20mL 0.5％美蓝水溶液 13mL 8 蒸馏水 1000mL A2.3.2 制法 将琼脂加到 900mL蒸馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾和蛋白胨，混匀使溶解， 再加入蒸馏水补足至 1000mL，调整 pH至 7.2～7.4。趁热用脱脂棉和砂布过滤，再加入乳糖， 混匀，定量分装于烧瓶内，115℃灭菌 20min。作为储备培养基贮存于冷暗处备用。 临用时，加热融化储备培养基，待冷至 60℃左右，根据烧瓶内培养基的容量，加入一 定量的已灭菌的 2％伊红水溶液和 0.5％美蓝水溶液，充分摇匀（防止产生气泡）。倾注平皿 备用。 A2.4 乳糖蛋白胨培养液 A2.4.1成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g 氯化钠 5g 1.6％溴甲酚紫乙醇溶液 1mL 蒸馏水 1000mL A2.4.2 制法 将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000mL蒸馏水中，调整 pH到 7.2～7.4， 加入 1.6％溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，充分混匀，分装于内有倒管的试管中。115℃下灭菌 20min。 贮存于冷暗处备用。 A2.5 革兰氏染色液 A2.5.1 结晶紫染色液 结晶紫 1g 95％乙醇溶液 20mL 1％草酸铵水溶液 1000mL 将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸铵水溶液混合。 A2.5.2 革兰氏碘液 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300mL 将碘与碘化钾混合，加入蒸馏水少许，充分摇匀，待完全溶解，再加入蒸馏水至 300mL。 A2.5.3 脱色液 95％乙醇。 A2.5.4 沙黄复染液 沙黄 1g 95％乙醇 2g 蒸馏水 90mL 将沙黄溶于 95％乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 A2.6 染色法 染色的基本步骤为：1）涂片：在载玻片上滴加一滴生理盐水，用灭菌的接种环取菌落 少许，与生理盐水混匀，涂布成薄膜；2）干燥：在室温中使自然干燥；3）固定：将涂片迅 速通过火焰 2～3次，以载玻片反面接触皮肤，热而不烫为度；4）染色：滴加结晶紫染色液， 染色 1min，水洗；5）媒染：滴加革兰氏碘液，作用 1min，水洗；6）脱色：滴加 95％乙醇 脱色，约 30s，水洗；7）复染：滴加复染液，复染 1min，水洗。 9 革兰氏阳性菌染色后呈紫色，革兰氏阴性菌染色后呈红色。 注：亦可用 1：10稀释的石炭酸复红染色液作复染剂，复染时间为 10s。 A3 检验程序 检验程序见图 A. 鉴定：挑取革兰氏阴性无芽孢杆菌接种于乳糖蛋白胨培养液 44℃、培养24h 44℃、培养24h 37℃、培养18～24h 图 A 污水、污泥中粪大肠菌群检验程序 样品处理：确定样品接种量 鉴定：挑取可疑菌落革兰氏染色、镜检 计数：根据产酸产气的阳性管数查MPN表 平板分离：将产酸发酵管液接种于EMB 发酵试验：将样品接种于乳糖胆盐培养液 检验结果 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 A4 操作步骤 A4.1 样品准备 A4.1.1 污水 污水样品应至少取 200mL，使用前应充分混匀。 根据预计的污水样品中粪大肠菌群数确定污水样品接种量。粪大肠菌群数量相对较少 的接种量一般为 10mL、1mL、0.1mL。粪大肠菌群数较多时接种量为 1mL、0.1mL、0.01mL或 0.1mL、0.01mL、0.001mL等。 接种量少于 1mL时，水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为 0.1mL、0.01mL 时，取稀释比分别为 1:10、1:100。其它接种量的稀释比依此类推。 1:10稀释样品的制作方法为：吸取 1mL水样，注入到盛有 9mL灭菌水的试管中，混匀， 制成 1:10稀释样品。因此，取 1mL1:10稀释样品，等于取 0.1mL污水样品。其它稀释比的 稀释样品同法制作。 注 1：若样品为经过氯消毒的污水，应在采样后立即用 5％硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。 A4.1.2 污泥 污泥样品应至少取 200g，使用前应充分混匀。 10 根据预计的污泥样品中粪大肠菌群数量确定污泥样品接种量。粪大肠菌群数量相对较 少的污泥样品接种量一般为 0.1g、0.01g、0.001g。粪大肠菌群数量较多时接种量为 0.01g、 0.001g、0.0001g或 0.001g、0.0001g、0.00001g等。 污泥样品应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量 0.1g、0.01g、0.001g 的稀释样 品制作方法如下：取 20g污泥样品，加入到三角烧瓶中，加灭菌水使成 200mL，混匀，制成 1:10稀释样品。吸取 1:10稀释样品 1mL，注入到盛有 9mL灭菌水的试管中，混匀，制成 1:100 稀释样品。按同法制成 1:1000稀释样品。接种 1mL1:10、1:100、1:1000稀释样品等于接种 0.1g、0.01g、0.001g污泥样品。 注 1：若样品为经过氯消毒的污泥，应在采样后立即用 5％硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。 A4.2 发酵试验 将样品接种于装有乳糖胆盐培养液的试管（内有小倒管）中，44℃培养 24h。样品接种 体积以及管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积根据以下条件确定： 样品为污水时，取三个接种量、每个接种量的样品分别接种于 5个试管内，共需 15个 试管。试管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积应根据接种量确定。若接种量为 10mL，吸取 10mL 样品接种于装有 5mL三倍浓度乳糖胆盐培养液的试管内；若接种量为 1mL时，吸取 1mL样品 接种于装有 10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内；若接种量少于 1mL时，吸取 1mL稀释 样品接种于装有 10mL普通浓度乳糖胆盐培养液的试管内。 样品为污泥时，取三个接种量、每个接种量的稀释样品分别接种于 3个试管内，共需 9 个试管。9个试管中，各装有 10mL乳糖胆盐培养液。各个试管接种稀释样品体积均为 1mL。 A4.3 平板分离 大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。经 24h培养后，将产 酸的试管内培养液分别划线接种于 EMB培养基上。置于 37℃培养箱中，培养 18～24h。 A4.4 鉴定 挑选可疑粪大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有：1）深紫黑色，具有 金属光泽的菌落；2）紫黑色，不带或略带金屑光泽的菌落；3）淡紫红色，中心色较深的菌 落。 上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑取上述典型菌落 1～3个接种于 盛有 5mL乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内，置于 44℃培养箱中培养 24h。产酸产气试 管为粪大肠菌群阳性管。 A5 计数 根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数，查表 A1或 A2可得 100mL污水或 1g污泥中 粪大肠菌群MPN值。 由于表 A1和表 A2是按一定的三个 10倍浓度差接种量设计的（污水接种量为 10mL、1mL 和 0.1mL，污泥接种量为 0.1g、0.01g和 0.001g），当采用其他三个 10倍浓度差接种量时， 需要修正表内 MPN值，具体方法如下： 表内所列污水（污泥）最大接种量增加 10倍时表内 MPN值相应降低 10倍；污水（污泥） 最大接种量减少 10倍时表内 MPN值相应增加 10倍。如污水接种量改为 1mL、0.1mL和 0.01mL 时，A1表内 MPN值相应增加 10倍。其它的三个 10倍浓度差接种量的 MPN值相应类推。 由于 A1表内 MPN值的单位为每 100mL污水样品中 MPN值，而污水以 1L为报告单位，因 此需将查 A1表得到的 MPN值乘上 10，换算成 1L污水样品中的 MPN值。 11 表 A1 污水中粪大肠菌群最可能数（MPN）检索表 （污水样品接种量为 5份 10mL水样，5份 1mL水样和 5份 0.1mL水样） 阳性管数 阳性管数 阳性管数 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 0 0 0 0 2 0 0 5 4 0 0 13 0 0 1 2 2 0 1 7 4 0 1 17 0 0 2 4 2 0 2 9 4 0 2 21 0 0 3 5 2 0 3 12 4 0 3 25 0 0 4 7 2 0 4 14 4 0 4 30 0 0 5 9 2 0 5 16 4 0 5 36 0 1 0 2 2 1 0 7 4 1 0 17 0 1 1 4 2 1 1 9 4 1 1 21 0 1 2 6 2 1 2 12 4 1 2 26 0 1 3 7 2 1 3 14 1 1 3 31 0 1 4 9 2 1 4 17 4 1 4 36 0 1 5 11 2 1 5 19 4 1 5 42 0 2 0 4 2 2 0 9 4 2 0 22 0 2 1 6 2 2 1 12 4 2 1 26 0 2 2 7 2 2 2 14 4 2 2 32 0 2 3 9 2 2 3 17 4 2 3 38 0 2 4 11 2 2 4 19 4 2 4 44 0 2 5 13 2 2 5 22 4 2 5 50 0 3 0 6 2 3 0 12 4 3 0 27 0 3 1 7 2 3 1 14 4 3 1 33 0 3 2 9 2 3 2 17 4 3 2 39 0 3 3 11 2 3 3 20 4 3 3 45 0 3 4 13 2 3 4 22 4 3 4 52 0 3 5 15 2 3 5 25 4 3 5 59 0 4 0 8 2 4 0 15 4 4 0 34 0 4 1 9 2 4 1 17 4 4 1 40 0 4 2 11 2 4 2 20 4 4 2 47 0 4 3 13 2 4 3 23 4 4 3 54 0 4 4 15 2 4 4 25 4 4 4 62 0 4 5 17 2 4 5 28 4 4 5 69 0 5 0 9 2 5 0 17 4 5 0 41 0 5 1 11 2 5 1 20 4 5 1 48 0 5 2 13 2 5 2 23 4 5 2 56 0 5 3 15 2 5 3 26 4 5 3 64 0 5 4 17 2 5 4 29 4 5 4 72 0 5 5 19 2 5 5 32 4 5 5 81 12 阳性管数 阳性管数 阳性管数 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 接种 100mL 水样 接种 10mL 水样 接种 0.1mL 水样 每 100mL 水样中 MPN 1 0 0 2 3 0 0 8 5 0 0 23 1 0 1 4 3 0 1 11 5 0 1 31 1 0 2 6 3 0 2 13 5 0 2 43 1 0 3 8 3 0 3 16 5 0 3 58 1 0 4 10 3 0 4 20 5 0 4 76 1 0 5 12 3 0 5 23 5 0 5 95 1 1 0 4 3 1 0 11 5 1 0 33 1 1 1 6 3 1 1 14 5 1 1 46 1 1 2 8 3 1 2 17 5 1 2 63 1 1 3 10 3 1 3 20 5 1 3 84 1 1 4 12 3 1 4 23 5 1 4 110 1 1 5 14 3 1 5 27 5 1 5 130 1 2 0 6 3 2 0 14 5 2 0 49 1 2 1 8 3 2 1 17 5 2 1 70 1 2 2 10 3 2 2 20 5 2 2 94 1 2 3 12 3 2 3 24 5 2 3 120 1 2 4 15 3 2 4 27 5 2 4 150 1 2 5 17 3 2 5 31 5 2 5 180 1 3 0 8 3 3 0 17 5 3 0 79 1 3 1 10 3 3 1 21 5 3 1 110 1 3 2 12 3 3 2 24 5 3 2 140 1 3 3 15 3 3 3 28 5 3 3 180 1 3 4 17 3 3 4 32 5 3 4 210 1 3 5 19 3 3 5 36 5 3 5 250 1 4 0 11 3 4 0 21 5 4 0 130 1 4 1 13 3 4 1 24 5 4 1 170 1 4 2 15 3 4 2 28 5 4 2 220 1 4 3 17 3 4 3 32 5 4 3 280 1 4 4 19 3 4 4 36 5 4 4 350 1 4 5 22 3 4 5 40 5 4 5 430 1 5 0 13 3 5 0 25 5 5 0 240 1 5 1 15 3 5 1 29 5 5 1 350 1 5 2 17 3 5 2 32 5 5 2 540 1 5 3 19 3 5 3 37 5 5 3 920 1 5 4 22 3 5 4 41 5 5 4 1600 1 5 5 24 3 5 5 45 5 5 5 >1600 13 表 A2 污泥中粪大肠菌群最可能数（MPN）检索表 （污泥样品接种量为 3份 0.1g泥样，3份 0.01g泥样和 3份 0.001g泥样） 阳性管数 阳性管数 阳性管数 接种 0.1 g 污样 管 接种 0.01 g 污样 管 接种 0.001 g污样 管 每 1g 泥样 中 MPN 接种 0.1 g 污样 管 接种 0.01 g 污样 管 接种 0.001 g污样 管 每 1g 泥样 中 MPN 接种 0.1 g 污样 管 接种 0.01 g 污样 管 接种 0.001 g污样 管 每 1g 泥样 中 MPN 0 0 0 <3 1 2 0 11 3 0 0 23 0 0 1 3 1 2 1 15 3 0 1 39 0 0 2 6 1 2 2 20 3 0 2 64 0 0 3 9 1 2 3 24 3 0 3 95 0 1 0 3 1 3 0 16 3 1 0 43 0 1 1 6.1 1 3 1 20 3 1 1 75 0 1 2 9.2 1 3 2 24 3 1 2 120 0 1 3 12 1 3 3 29 3 1 3 160 0 2 0 6.2 2 0 0 9.1 3 2 0 93 0 2 1 9.3 2 0 1 14 3 2 1 150 0 2 2 12 2 0 2 20 3 2 2 210 0 2 3 16 2 0 3 26 3 2 3 290 0 3 0 9.4 2 1 0 15 3 3 0 240 0 3 1 13 2 1 1 20 3 3 1 460 0 3 2 16 2 1 2 27 3 3 2 1100 0 3 3 19 2 1 3 34 3 3 3 >1100 1 0 0 3.6 2 2 0 21 1 0 1 7.2 2 2 1 28 1 0 2 11 2 2 2 35 1 0 3 15 2 2 3 42 1 1 0 7.3 2 3 0 29 1 1 1 11 2 3 1 36 1 1 2 15 2 3 2 44 1 1 3 19 2 3 3 53 A6 检验结果报告 根据粪大肠菌群MPN值，报告 1L污水或 1g污泥样品中粪大肠菌群MPN值。 14 附录 B (规范性附录) 医疗机构污水和污泥中沙门氏菌的检验 B1 仪器和设备 B1.1高压蒸汽灭菌器。 B1.2干燥灭菌箱。 B1.3培养箱。 B1.4恒温水浴箱。 B1.5电炉。 B1.6天平。 B1.7灭菌平皿。 B1.8 灭菌刻度吸管。 B1.9 酒精灯。 B2 培养基和试剂 B2.1 亚硒酸盐增菌液(SF增菌液) B2.1.1 成分 胰蛋白胨(或多价胨) 10g 磷酸氢二钠(Na2HPO3) 16g 磷酸二氢钠(NaH2PO3) 2.5g 乳 糖 4g 亚硒酸氢钠 4g 蒸馏水 1000mL B2.1.2 制法 除亚硒酸氢钠外，将以上各成分放入蒸馏水中，加热溶化。再加入亚硒酸氢钠，待完 全溶解后，调整 pH到 7.0～7.1，分装于三角烧杯内。121℃下灭菌 15min备用。 B2.2 二倍浓度亚硒酸盐增菌液(二倍浓度 SF增菌液) B2.2.1 成分 除蒸馏水改为 500mL外，其它成分同附录 B2.1.1。 B2.2.2 制法 制法同附录 B2.1.2。 B2.3 SS培养基 B2.3.1 基础培养基 B2.3.1.1 成分 牛肉膏 5g 示胨 5g 三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000mL B2.3.1.2 制法 将牛肉膏、示胨和胆盐溶解于 400mL 蒸馏水中。将琼脂加到 600mL 蒸馏水中，煮沸使 其溶解。再将二者混合，121℃下灭菌 15min，保存备用。 B2.3.2 完成培养基 B2.3.2.1 成分 基础培养基 1000mL 15 乳糖 10g 柠檬酸钠 8.5g 硫代硫酸钠 8.5g 10%柠檬酸铁溶液 10mL 1%中性红溶液 2.5mL 0.1%煌绿溶液 0.33mL B2.3.2.2 制法 加热溶化基础培养基，按比例加入除中性红和煌绿溶液以外的各成分，充分混合均匀， 调整 pH到 7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。 注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于 18h内使用。煌绿溶液配好后应在 10天以内使用。 B2.4 亚硫酸铋琼脂培养基（BS培养基） B2.4.1 基础培养基 B2.4.1.1 成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化钠 5g 琼脂 20g 蒸馏水 1000mL B2.4.1.2 制法 加热溶解各成分，按每份 100mL的量分装于 250mL三角瓶中，121℃下灭菌 20min备用。 B2.4.2 亚硫酸铋贮备液 B2.4.2.1 成分 柠檬酸铋铵 2g 亚硫酸钠 20g 磷酸氯二钠 10g 葡萄糖 10g 蒸馏水 200mL B2.4.2.2 制法 将柠檬酸铋铵溶解