826-实验三 食品中还原糖的测定——费林氏容量法
实验三 食品中还原糖的测定——费林氏容量法
一、实验内容
用直接滴定法(费林氏容量法)测定食品中的还原糖含量。
二、实验目的
通过本实验，加深用直接滴定法(费林氏容量法)测定食品中的还原糖含量的原理的理解;掌握其操作要点，熟练基本操作技术。
三、实验原理
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液(碱性酒石酸铜溶液)，费林氏液(碱性酒石酸铜溶液)被还原析出氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖立即将氧化型蓝色的次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据样品消耗体积，计算还原糖量。
GB5009.7-85，本
方法
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适用于所有食品中还原糖的检测。检出限0.1mg。
四、仪器和试剂
(一)仪器:100mL、250mL烧杯，1000mL、250mL容量瓶，25mL酸碱滴定管，250mL锥形瓶，滤纸，玻璃珠，电炉，铁架台，漏斗等。
(二)试剂
除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为
分析
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纯。
1(费林甲液(碱性酒石酸铜甲液)
2(费林乙液(碱性酒石酸铜乙液)
3(乙酸锌溶液
4(亚铁氰化钾溶液
5(盐酸
6(葡萄糖标准溶液
五、实验步骤
(一)试剂配置
1(费林甲液(碱性酒石酸铜甲液)
称取15 g硫酸铜(CuSO?5HO)，及0.05 g次甲基蓝，溶于水中并稀释至42
1000mL。
2(费林乙液(碱性酒石酸铜乙液)
称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氧化钠，溶于水中，再加入4 g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3(乙酸锌溶液
称取21.9 g乙酸锌，加3 mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100 mL。
4(亚铁氰化钾溶液
称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100mL。
5(葡萄糖标准溶液
精密称取1.000 g经过80 ?干燥至恒量的葡萄糖(纯度在99%以上)，加水溶解后加入5mL盐酸(如果即配即用就不加)，并以水稀释至1000mL。此溶液相当于1 mg/mL葡萄糖。
(二)样品处理:吸取20mL液体样品，置于250mL容量瓶中，加50mL蒸馏水，摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置0.5h。用干燥滤纸过滤，弃去初滤液(刚开始过滤出的几毫升)收集滤液供测定用。
(三)测定
1( 标定费林氏液溶液(碱性酒石酸铜溶液)
吸取5.0mL费林氏甲液(碱性酒石酸铜甲液)及5.0 mL乙液，置于250mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠3粒，从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去并出现淡黄色为终点，
记录
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消耗的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值。计算每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
m=V×C 21
式中，C—葡萄糖标准溶液的浓度，mg/mL;
V—标定时消耗葡萄糖标准溶液的平均体积，mL; 1
m—10mL费林氏液溶液(碱性酒石酸铜溶液)相当于葡萄糖的质量，2
mg。
2(样品溶液预测
吸取5.0mL费林氏甲液(碱性酒石酸铜甲液)及5.0mL乙液，置于250 mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液兰色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色(如亮红)，记录消耗样液
的总体积。
3( 样品溶液测定:
吸取5.0mL费林氏甲液(碱性酒石酸铜甲液)及5.0 mL乙液，置于250mL锥形瓶中，加水10 mL，加入玻璃珠2粒，在2min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1mL的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。
六、结果计算
m2w,，100%V2m，，1000250
式中:w—样品中还原糖的含量(以葡萄糖计)，%;
V—测定时平均消耗样品溶液的体积，mL; 2
m—样品质量，g;(如果样品是液体，近似认为1mL=1g)
m—10mL费林氏液溶液(碱性酒石酸铜溶液)相当于葡萄糖的质量，2
mg;
250—样品溶液总体积，mL。
七、注意事项
1( 本方法测定的是一类具有还原性质的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式
表
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示，所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知样品中只含有某一种糖，如乳制品中的乳糖，则可以认为还原糖=某糖。
2(分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所消耗标准溶液的体积有所不同。
证明
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即便同是还原糖，在物化性质上仍有所差别，所以还原糖的结果只是反映样品整体情况，并不完全等于各还原糖含量之和。如果已知样品只含有某种还原糖，则应以该还原糖做标准品，结果为该还原糖的含量。如果样品中还原糖的成分未知，或为多种还原糖的混合物，则以某种还原糖做标准品，结果以该还原糖计，但不代表该糖的真实含量。
浙公网安备 33021202002483