银杏萜类内酯含量测定使用外标四点法可靠性的探讨

银杏萜类内酯含量测定使用外标四点法可靠性的探讨 银杏萜类内酯含量测定使用外标四点法可 靠性的探讨 中华医学研究杂志J0umal0fChineseMedicineRese啪h2OO6年第6卷第5期 ? 论着? 银杏萜类内酯含量测定使用外标四点法可靠性的探讨 黄枯雯,唐钦强,王存芳 ?487? 【摘要】目的探讨外标四点法的可行性.方法HPLC法,色谱柱:ALLTECHcI8(4.6mmx250ram,5pm),流动相:正 丙醇一四氢呋喃一水(1:15:85),流速1.Oral/rain,ELSD参数:漂移管温度108.0~C;载气(压缩空气)流速3.10L/rain.结果 外标四点法得出回归方程,经统计学方法证明成立,且相关系数r显着.结论外标四点法可以用于银杏萜类内酯的含量 测定. 【关键词】银杏叶萜类内酯;含量测定;HPLC—ELSD;外标四点法 【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】1680—6115(2呻6)05—0487—03 StudyonreliabilityofESMoffourpointstodeterminetheassayforGinkgo TerpeneLactones 日Z7,7lGZhe—wen,TANGQin—qiang,WANGCurt一_厂nng.nNeptunusPharnu~euticalandTechnologic C_0..Ltd,Shenzhen518057,China 【Abstract】ObjectiveStudyonthereliabilityofESMoffourpoints.Me~odsHPLCsystemconsistingofa n AlltechC18column(4.6mm×250mm,5f上rn),andthemobilephasewasn— Propylalchol,tetrahydrofuranandwater (1:15:84)atflowrateof1.0ml/min.edetectortemperaturewas108.0~Candthedrygasflowra teWas3.10L/ rain.ResultsTheESMoffourpointshasbeenestablished.ConclusionTheESMoffourpoints Canbeusedon determinetheassayforGinkgoTerpeneLactones. 【Keywords】ginkgoterpenelactones;assay;HPLC—ELSD;ESMoffourpoints 有关银杏叶中萜类内酯的含量测定方法的报道较多, 目前银杏叶制剂的萜类内酯含量测定方法采用的多为 HPLC法[卜.我们亦采用2005版中国药典收录的HPLC 法[引,蒸发光散射检测器进行测定.HPLC—ELSD使用外 标两点法对数方程分别计算白果内酯,银杏叶内酯A,银杏 叶内酯B和银杏叶内酯c的含量,四种银杏内酯的含量之 和为萜类内酯含量.我们在实际工作中使用外标两点法 时,直接从数值上难以判断对照溶液的配制是否准确,及其 外标两点法对应的工作曲线(1'l=2)是否可靠.因此,同时 配制两份对照溶液各自分别测定5ta,10td两点,将四个浓 度和相应峰面积一条 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线(rl=4),得出回归方程及相 关系数r,通过统计学方法考察曲线和回归方程是否成 立f引. 1仪器与试药 1,1仪器高效液相色谱仪:SHIMADZU一10A;蒸发光散 射检测器AI~TECHELSD2000. 1.2试药白果内酯,银杏叶内酯B,银杏叶内酯c对照 品购于中国药品生物制品检定所;银杏叶内酯A对照品购 于SIGMA.甲醇为色谱纯;水为自制超纯水;其他试剂均为 分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适应性试验色谱柱:ALLTECHC18 作者单位:518057广东深圳.深圳海王药业有限公司 (4.6mmx250mm,5tun);流动相:正丙醇一四氢呋喃一水(1: 15:84);流速1.Oml/min;ELSD参数:漂移管温度108.0?; 载气(压缩空气)流速3.10L/rain;柱温35?;进样量5,15. 理论塔板数按白果内酯峰计算应不低于25o0,相邻峰的分 离度应>1.5. 2.2对照品溶液的制备分别精密称取经五氧化二磷干 燥过夜的白果内酯,银杏叶内酯A,银杏叶内酯B和银杏叶 内酯c对照品适量,置同一10ml量瓶中加甲醇稀释至刻 度,混匀,即得. 2.2.1对照品溶液一白果内酯22.73mg,银杏内酯A13. 42mg,银杏内酯Bl1.13mg和银杏内酯C9.05rag. 2.2.2对照品溶液二白果内酯14.71mg,银杏内酯Al1. 34mg,银杏内酯B12.24mg和银杏内酯cl8.99mg. 2.3外标四点法直线回归方程的确定分别精密吸取对 照品溶液一和二5,15,注入液相色谱仪,按上述色谱条 件测定,记录色谱图.结果:对照溶液中白果内酯(tR= 8.375),银杏叶内酯A(tR=9.811),银杏叶内酯B(tR=12. 040)和银杏叶内酯C(tn=7.194),相邻组分分离效果良好 (见图1).浓度与峰面积的数据及处理见表1. 以对照品浓度的自然对数InC(x)为横坐标,峰面积的 自然对数InA(y)为纵坐标作图,见图2,5. 图中四点有成一条直线的趋势,在直线方程Y=ax+b 中,通过统计计算按公式1,2,3分别求出两个常数a,b及 直线的相关系数r,见表2. ? 488? mV 200 1OO O mV 200 r.~,-Gta's 7.1-? 0.$15 9.811 12.? 主.兰}_韭盎蠢J0I些G..M.(1ii.Re.rch20(0年第6卷第5 5175 6218 8871 8976 图1萜类内酯对照溶液I~I.L图 (出峰顺序为银杳内酯C.白果内酯.银杳内酯A.银杏内酯B) 表1对照进样量()与峰面积 圈25 2.?6 a.-1 -.?2 ?住n ':L':': ?舶? ???? 中华医学研究杂志JournalofChin8eMedicineftesearch2006年第6卷第5期 a==Ex2- ~Ex公式1 b;—ni………………'……………………..….?.式2 ?州一千? r=——=========三二二=二========= ~/(?.一牙?)(?y一Y?) 2.4直线回归方程的统计学检验 公式3 2.4.1相关系数检验法相关系数表示两变量间关系的 密切程度.使用相关系数检验法来进行相关系数的显着性 测验.见表2. 表2回归方程和相关系数r计算结果以及r的.f值 检验rn:4,显着性水平a为0.01时,查相关系数临界 值表得ro01.4=0.990,表2中r>r0_0l_4'说明确立的回归方 程是有意义的. 2.4.2t检验法进行相关系数r的显着性测验 t检验法进行相关系数的显着性测验,公式4如下: ,_—— t=n一自由度………………………公式4 ~/1一r t>t(一2)-ol0l时,x(InC)与y(InA)间的相关关系有非常 显着意义.查表得t(2)00l:9.93.表2中t均>(2)o.oI,所以 认为x(InC)与Y(InA)之间存在线性相关关系.外标四点对 数方程法的直线可确立. 2.4.3外标四点法的重复性考察取对照一与对照二,按 照标准曲线的制备进行六次实验,分别得到六组标准曲线 及相关系数r,见表3. 衰3外标四点法所得回归直线的比较 ?489? 3结论 实验数据中外标四点法对应的标准曲线相关系数均大 于r001.4=0.990,线性相关且回归方程是有意义的.在实 验得到的回归方程当相关系数>0.990时可用计算内酯的 含量,该方法增加了标准曲线的可靠性,可有效控制制剂的 质量. 【参考文献】 lMarkBlumentha1.GermangovernmentlimitsGilll【golivlaetonelevelsin ginkgoleaf.HerralGram,1997,(41):29. 2ZhangL,ChenXP,D0ngXP,eta1.DeterminationofGinkgolac~nein GinkgocapsulesbyI-IPI..C(I-IPI..C法测定银杏叶胶囊的含量). jiangsuPharmacyandClinicalResearch(江苏药学与临床研究), 2004,12(1):29—32. 3TangJW.DeterminationofGinkgolactoneinK曲'ail.ngcaIe昌by I-IPI..C(I-IPI..C法测定康脉灵胶囊中银杳萜内酯的含量).Ti叽jin Pharmacy(天津药学),2005.17(1):11—13. 4ChP.(中国药典).VdI.2005. 5蒋子刚,顾学梅.分析检验的质量保证和计量认证.上海:华东 理工大学出版社,1998,50—210. (收稿日期:2006—02—07)(编辑:守中) ? 病例 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 ? 静脉滴注头孢曲松钠致过敏反应病例分析 赵连茹 【中图分类号】R978.1【文献标识码】Dl【文章编号】1680—6HS(2006)0S—O489 —02 1病历摘要 2005年12月27日因腹痛应用头孢曲松钠致过敏反应 1例,现报告如下. 作者单位:102600北京.北京和医院急诊室 患者,女,56岁,于2005年l2月27日因腹痛来院就 诊.既往无过敏史,查体后遵医嘱行输液抗炎治疗.静脉 给予(1)o.9%NS100ml+头孢曲松钠2g静滴;(2)甲硝唑 100ml静滴.当输入头孢曲松钠80ml时,患者主诉全身有 痒感,立即停止输入,改输甲硝唑.当甲硝(下转第492页)