细胞膜的渗透性
细胞生物学实验
题目:细胞膜的渗透性
姓名: 学号: 班级: 时间: 一、实验目的:
了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
二、实验原理:
将红细胞放入数种等渗溶液中,由于红细胞对各种溶质的透性不同,有的溶质可以渗入,渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞,引起溶血。由于溶质透入速度互不相同,因此溶血时间也不相同。 三、实验用品:
1. 器材:
试管,试管架,载玻片,盖玻片,显微镜,吸管,离心机。 2. 试剂:
0.85%NaCl溶液,0.085%NaCl溶液,0.8mol/L甲醇,0.8mol/L丙三
0.6%葡萄糖溶液,2% Triton X-100。 醇,
材料: 3.
鸡血。
四、实验步骤:
1. 取鸡血2~3mL,加0.85%NaCl溶液4mL,在1000r/min条件下离心5min。
(红细胞压积量不少于0.3mL,否则应补加鸡血)
2. 将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度。(总体积量应不少于0.6mL) 3. 取6支试管,分别加入如下溶液各3mL
? 0.85%NaCl溶液;?0.085%NaCl溶液;?0.32mol/L甲醇;?
0.32mol/L丙三醇;?6%葡萄糖溶液;?10% Triton X-100。 4. 向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴,轻松混匀,观察个试
管是否有溶血现象发生(观察时间1h),记录溶血时间并于显微镜下观
察溶液中细胞。
五、实验结果:
1. 鸡血红细胞在不同溶液下的溶血现象。
表1 鸡血红细胞在不同溶液下的溶血现象
编号 是否溶血 时间 结果分析
溶液渗透压与细胞内渗透压相同,故短时间内不?0.85%NaCl溶液 不溶 --- 发生溶血
溶液渗透压较细胞内渗透压很低,故较短时间内?0.085%NaCl溶液 全溶 3min 发生溶血
甲醇可与细胞膜主要成分磷脂互溶,使细胞迅速?0.32mol/L甲醇 全溶 45s 溶血
丙三醇可与细胞膜上的磷脂互溶,但是其分子量?0.32mol/L丙三醇 半溶 35min 比较大,故发生溶血的时间较长 ?6%葡萄糖溶液 半溶 43min 葡萄糖分子较大,故溶血时间较长
Triton X-100能去除细胞膜上的蛋白质,故能在?10% Triton X-100 全溶 2min 较短时间内使细胞发生溶血
1
2. 实验图片
(1) 肉眼观察到的细胞溶血情况
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图1 六个试管溶血情况(?-?为试管编号,从左至右为溶血程度由小至大) (2) 显微镜下观察到的细胞溶血现象
图2 未发生溶血现象的细胞(10×40)图3 发生溶血现象的细胞(10×40)
六、结果分析
1. 对于溶血较快的试管,用显微镜观察时要注意滴加血液后立即镜检,否
则将会因为细胞溶血太快而看不到细胞。
2. 即使细胞在等渗溶液中短时间内未发生溶血现象,但是细胞长时间处于
等渗溶液中也会发生溶血现象。
3. 发生溶血的细胞从形态上看,膜结构上有一个个口,膜还是有结构的,
但是细胞比正常细胞小。
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