ms造就基母液的配制与保留[新版]
实验一 MS培养基母液的配制与保存
一、目的要求
1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能; 2、掌握培养基各种母液的保存
方法
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。
二、仪器与用具
1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;
2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签; 3、试剂:95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有
机物，蒸馏水。
三、方法步骤
(一)母液的配制
母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。
优点:(1)保证各物质成分的准确性;
(2)便于配置时快速移取;
(3)便于低温保藏。
、MS大量元素母液(10×) 1
称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。
化学药品 1升量 10升量(10×) 50升量(50×)
? NHNO 1650 mg 16.5g 43
? KNO 1900 mg 19.0g 3
? CaCl?2HO (CaCl) 440 mg ( ) 2224.4g
? MgSO?7HO(MgSO) 370 mg ( ) 4243.7g
? KHPO 170 mg 1.7g 24
2、MS微量元素母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量 100升量(100×)
MnSO?4HO 222.3mg 223mg 4? ( MnSO?HO) (21.4 mg) (214 mg) 24
? ZnSO?7HO 428.6 mg 86mg ? HBO 6.2 mg 62 mg 33
? KI 0.83 mg 8.3 mg ? NaMoO?2HO 20.25 mg 2.5mg 24
? CuSO?5HO 420.025 mg 0.25mg ? CoCl?6HO 220.025mg 0.25mg 注意:CoCl?6HO和CuSO?5HO可按10倍量(0.25 mg×10=2.5 mg)或100倍量(25 mg)2242
称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。
3、MS铁盐母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量 100升量(100×)
Na?EDTA 37.3 mg 373 mg 2
FeSO?7HO 4227.8 mg 278 mg
注意配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶(烧杯)中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。
4、MS有机物母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量 100升量(100×)
? 烟酸 0.5 mg 5mg
? 盐酸吡哆素(VB6) 0.5 mg 5mg
? 盐酸硫胺素(VB1) 0.1 mg 1 mg
? 肌醇 100 mg 1 g
? 甘氨酸 2 mg 20mg
5、生长调节剂
单独配制，浓度为1—5 mg/ml(
书
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中为0.5 — 1 mg/ml)，本实验要求配成1 mg/ml 。
配制培养基母液时
注意事项
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:
?一些离子易发生沉淀，可先少量水溶解，在按配方顺序依次混合;
?配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水;
?药品应用化学纯或
分析
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纯;
?溶解生长素时，可用少量0.1—1 N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0.1
—1 N的HCl加热溶解(如再加蒸馏水，易产生白色沉淀，此时可加入热水)。
(二)母液的保存
1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期、配制者。(注意将易分解、氧化者，放入棕色瓶中)例如:MS铁盐(100×)，2013.10.22,12生技班甲组
2、贮藏:4?冰箱。
四、作业
1、写出实验
报告
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。
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