表皮生长因子受体与胃粘膜损伤修复的研究进展

表皮生长因子受体与胃粘膜损伤修复的研究进展 表皮生长因子受体与胃粘膜损伤修复的研 究进展 2008年5月第5卷第5期WorldHealthDigest 脾胃之气.印堂为经外奇穴,位于两眉之间,鼻根上方是治疗 头,目,鼻疾的常用穴之.印堂虽为经外奇穴,但其位于督 脉的循行线上,督脉从背部正中线,经巅至额抵鼻柱入上龈. 督脉为阳脉之海,诸阳之会.故印堂兼可鼓舞阳气.迎香及印 堂穴的针感均要达于鼻腔,产生较强的酸胀感才有佳效,这也 即《灵枢?九针十二原》所说:"为针之要,气至而有效". 远取合谷,足三里.合谷为手阳明大肠经原穴,肺与大肠相表 里,手阳明经循行"络肺下膈属大肠"最后止于鼻旁,"经脉 所过主治所及".以其解表祛邪,治疗外感,鼻疾等与肺有关 的病症.另外,合谷为四总穴之一,"面口合谷收",是治疗 颜面五官疾患之要穴.足三里为足阳明胃经的合土穴,足阳明 ? 临床研究? 胃经起于鼻旁,为经脉所过的远端取穴.足三里穴又为补益要 穴,脾胃为气血生化之源,后天之本.《金匮要略》有"四季 脾旺不受邪"之说,脾胃相表里,胃在五行为阳土穴,故穴为 土经之土穴.用该穴的"培土生金",补益脾肺之气,以达益 气固表,扶正祛邪之功.实验研究也证明:针灸足三里穴可以 改变机体特异性或非特异性的体液与细胞免疫功能,应用电 针,既能产生电的兴奋作用,又能具有针刺的通调作用,减少 了用穴,又能客观地掌握刺激量,有利于作出定量与定性的的 客观指标.以上合用则能激发机体自身的调节作用,使脏腑紊 乱的功能达到协调,并增强了人体的免疫功能.在治疗变应性 鼻炎上取得较好的疗效. 表皮生长因子受体与胃粘膜损伤修复的研究进展 中图分类号:R34 钟艳严洁 (湖南中医药大学针灸推拿学院湖南长沙410208) 文献标识码:B 表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor, EGFR)是一种具有酪氨酸蛋白激酶活性的细胞表面受体,在包 括胃肠道上皮在内的许多上皮组织中表达.EGFR及其所介导 的信号转导参与调节胃黏膜上皮更新和修复过程".本文就 EGFR的结构,信号转导及其与胃粘膜损伤修复的密切关系作 一 综述. 1EGFR的结构 表皮生长因子受体是原癌基因C-erbB一1(HER一1)的表达 产物,属于跨膜受体酪氨酸蛋白激酶(tyrosineprotein kinase.TPK)家族.其基因定位于7pl1-13,包含26个外显 子,长约为1lOkb,分子量为170KD,含有1186个氨基酸残基. EGFR可分为胞膜外配体结合区,跨膜的疏水区域和胞膜内区 三个功能区.胞膜外配体结合区由氨基端的621个氨基酸构 成,对EGF具有高度亲和力,对热很稳定,抗蛋白酶水解能力 很强;跨膜的疏水区域由23个氨基酸残基构成螺旋状结构的 疏水区.将受体固定于胞膜上,它的变化可能会改变配体对受 体的活化效应,并影响到胞内效应:胞膜内区由542个氨基酸 构成?. 2EGFR的表达和降解 所有表皮细胞和基质细胞以及部分的神经胶质细胞和平 滑肌细胞均可表达表皮生长因子受体.EGFR的转录由一个 TATA缺乏的启动子启动,转录产物为两种大的mRNA片段,其 区别在于3端不翻译序列的长度不同.人类的EGFRmRNA分为 6kb和9kb.EGFR的原始产物为160KD,在翻译过程中加入以 甘露糖为核心的寡糖,而被加工成170KD的糖蛋白".受体的 代谢以其所结合的配体的不同而不同,表皮生长因子 (epiderme1growthfactor,EGF)和EGFR持续结合,引导 文章编号:1672-5085(2008)5-0175-03 EGFR进入降解过程,而转化生长因子a(TGFa)结合的受体 入胞后,由于PH值的改变而使TGFa从受体解离,EGFR获得 再生.通过这种方式,不同的配体可以控制EGFR转导信号的 强度和作用时间,从而为EGFR的多配体,多信号效应提供了 理论依据. 3EGFR介导的信号转导 目前发现EGFR有6种配体,EGFR是EGF,TGFa和 amphireguin的唯一受体,EGFR与其它的C-erbB家族受体共 同的配体有betacelluin(BTC),heparin—bindingEGF(HBEGF) 和epiregulin(EPR).EGFR与其配体的结合具有高亲和性, 可饱和性和特异性. EGFR与配体结合后的活化过程可分为三个步骤,首先 EGFR与配体结合后可致受体形成同源二聚体;其次,二聚体 的形成导致胞内酪氨酸激酶区的激活,结合一个ATP分子,随 后二聚体内发生自磷酸化和转磷酸化作用,促使6个特异的受 体酪氨酸残基(Tyr992,1045,1068,1086,1148,1173)磷 酸化;最后分别依次识别SH2蛋白的底物酶PLC—Y,Cbl,grb2, grb2,shc,shpl,将信号传入细胞内.其中研究较多的主 要有四条途径: raf-MEK—MAPK信号通路 3.1EGFR介导的ras— 此通路由以下成员组成:EGFR一含有SH2结构域的接头蛋 白(如Grb2)一鸟嘌呤核苷酸释放因子(如SOS)Ras蛋白 一 MAPKKK(如Raf1)一MAj)KK—MAPK一转录因子等,其中心环 节是ERK的激活. 3.2EGFR介导的肌醇磷脂信号通路 磷脂酶C—Y(phospholipaseC,PLC—Y)是EGFR介导的 肌醇磷脂信号通路的关键酶和重要信号中介.EGFR酪氨酸残 ?l75? ? 临床研究? 基自动磷酸化产生磷酸化位点与靶蛋白PLCYl的SH2结构域 结合成为受体一PLCY1复合物,PLCY1随即被酪氨酸磷酸化 激活,使profilin蛋白和PIP:解离,再通过其PH结构域在 细胞膜上识别PIP:使其水解产生两个胞内信使分子二酰基甘 油(DG)和I,然后分别激活两个信号转导系统即IP,/Ca' 和DG/PKC双信号通路. 3.3EGFR介导的PI,K信号通路 磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinsitol3'kinase,PhK)是 由p85调节亚单位和p11O催化亚单位组成的异_聚体,EGFR 的酪氨酸残基产生磷酸位点,PIK通过P的SH2结构域把 P一P...复合物聚集到细胞膜上并使之活化,PIK被激活后在细 胞膜上生成PIP,然后以它作为第二信使激活下游蛋白. 3.4EGFR介导的JAK-STAT信号通路 EGF等与受体结合后,使其二聚体化,JAK相互靠近,磷 酸化,使受体上的酩氨酸残基也磷酸化,通过STAT形成二聚 体后,'STAT与受体分离,转移到核内,结合到DNA序列,从 而调控基因表达. 现已发现EGFR介导的ras-raf—MEK-MAPK信号通路与增殖 激活有关,EGFR介导的肌醇磷脂信号通路,PIK信号通路, JAK—sTAT信号通路与细胞移动性的增强有关. 4EGFR及EGFR信号转导通路与胃黏膜损伤修复 EGFR主要集中在胃黏膜胃腺颈区(增殖带)的壁细胞,颈 黏液细胞的细胞膜和细胞浆中,并以细胞膜为主,在正常机体 胃黏膜的上皮细胞,固有膜细胞及黏膜肌细胞皆有EGFR的少 量表达,而以胃黏膜上皮细胞的分布为最多n,胃黏膜损伤 时可见EGFR分布区的表达明显增加"".刘建平等观察到正常 大鼠胃黏膜EGFR为弱阳性表达,主要集中胃腺颈部,基底部 的壁细胞,颈部细胞,在溃疡自愈过程中溃疡旁组织EGFR的 表达比正常组织高,溃疡的早期表达不明显,溃疡的愈合期及 瘢痕期呈过度表达,说明在溃疡自愈过程中EGFR可能对细胞 增殖,分化,迁移以及抑制胃酸方面起着重要作用".李兆 申在重复浸水束缚应激制作动物模型中发现单次应激后EGFR 的表达明显减弱,坏死区表达缺失.重复应激后EGFR的表达 明显增强,提示胃黏膜耐受性细胞保护作用伴有黏膜细胞的增 殖反应:邓兰琼在柴胡桂枝汤(CHGZT)促进胃溃疡大鼠泌 酸腺再生的作用机制研究中发现在溃疡形成后的3个时间段, CHGZT组溃疡边缘胃体侧正常黏膜以及再生黏膜EGFR的表达 均增多,说明CHGZT可促进泌酸腺再生,其机制可能与其促进 溃疡附近胃体黏膜以及再生黏膜EGFR的表达有关":赵保民 等研究发现电针足三里等胃经腧穴可引起胃运动及胃分泌功 能发生变化,提高胃黏膜细胞Gas和EGFR的表达率,说明针 刺对胃黏膜损伤的修复效应可能是通过EGFR的表达上调而实 现的".除此之外,EGFR下游的多种信号转导分子在胃黏膜 损伤修复中也出现表达上的变化.Hirofumi等研究发现在门 脉高压大鼠胃黏膜中可见EGFRmRNA含量,膜PTK的活性,ERK2 磷酸化,MEK-1mRNA都显着增加,c—fos,c—myc和cyclin DImRNA的表达却降低,提示在门脉高压大鼠胃黏膜中,ERK ?l76? 2008年5月第5卷第5期WorldHealthDigest 的活性是通过EGFR的上调所介导的".李建玲等用TGF—a刺 激分离的大鼠胃黏膜细胞发现TGF-a不仅能显着诱导AP—l的 活性,而且明显激活MEK和ERK一1/2:EGFR特异性抑制剂 PD153035或MEK特异性抑制剂PD98059能完全阻断TGF-Q诱 导的胃黏膜细胞AP—l活化,说明大鼠胃黏膜细胞EGFR通过 ERK一1/2信号传导通路激活^J)一l从而引起黏膜细胞的增殖和 分化". 5评价与展望 近年来,国内外对胃黏膜EFGR及其下游信号通路在维 持胃黏膜的完整性,调节黏膜上皮的更新和黏膜损伤修复的 研究正逐步深入,取得了显着进展.同时也存在一些问题: 一 是重视单条信号转导通路以及其中单个信号分子研究,而 对各种不同通路间的相互联系,相互作用,功能整合研究甚 少:二是实验研究水平相差悬殊,既有高水平深层次的探索, 亦有低水平的重复,多数研究仍停留在低水平的重复上,仅 限于运用现代医学手段检测某些药物或针刺对EGFR及其信 号转导分子表达的影响.今后,要逐步要从信号通路组成结 构和模块研究走向更高层次的网络研究,可利用蛋白质表达 指纹图谱技术研究多条信号转导通路中蛋白质磷酸化等翻 译后修饰,蛋白问的相互作用和下游靶细胞的改变,从整体 上揭示细胞信号转导的复杂网络机制,全面阐述胃粘膜损伤 修复机制及中医药调控机制. 参考文献 【1】MendelsohnJ.Targetinstheepiderma1growthfactor receptorforcancertherapy【J】.CIinOncol,2002, 20(18Supp1):1S-13S. 【2]李兆中,诺先保,许国铭.胃黏膜损伤与保护一基础与临 床.上海:上海科学技术出版社,2004:271. 【3】Wel1s-A.EGFreceptor【J】.Int-J-Biochem-Cel1-Biol, 1999Jun,31(6):637-43. 【4】OlayioyeMA,NeveRM,LaneH^,etaI.Theerb-B Signa1insnetworks:receptorheterodimerizationin developmentandcancer【J】.E岫0J,2000,19(13): 3159-3167. 【5】BowersG,ReardonD,HewittZ,etaI.Therelativerole ofErbB1—4receptortyrosinekinaSCSintadiation Signa1transductionresponsesofhumancarcinoma eel1S.2001,20(11):1388-97. 】RaymondE,FaivreS,ArmandJP,etaI.Epiderma1growth 【6 factorreceptortyrosinekinaseasatargetfor anticancertherapy.Drugs.2000;60(suppl1):15—23. 【7】NewmanL,XiaW,YangHY,etaI.Correlationofp27 proteinexpressionwithHER一2/neuexpressionin breastcancer.MolCarcinog.2001,0(3):169-75. 【8】黄文林,朱孝峰.信号转导.北京:人民卫生出版社,2005. 【9】HognasonZ,ChatterjeeS,VartanianZ,eta1.Epiderma1 growrthfactorreceptorinducedapoptosis: 2008年5月第5卷第5期WorldHealthDigest potentiationofrassignaling.FEBSLett.2001 491(1-2):9-15. f10]于燕妮,方艺,车筑萍等.胃溃疡病活检标本中表皮生长 因子受体的表达….责州医药.2000.24(6)323-324. 【11】HeJH.Roleofgrowthfactorinthepepticulcer healing.ForeignMed(SectionofDigestiveDi$ease) 2003;23(1):12-15. 【l2】刘建平,卜涛,白建乐等.EGF,TGF2c【及EGFR在大鼠胃 溃疡自愈过程中的表达及意义.中国药理学通报.2003, 19(10):1185—1188. 【13】李兆申,崔忠敏,湛先保等.应激状态下胃黏膜耐受性细 胞保护中表皮生长因子及其受体的免疫组化研究【J】.解 放军医学杂志.1999.24(6):397-4O0. 【14】邓兰琼.柴胡桂枝汤对大鼠乙酸胃溃疡黏膜表皮生长因子 受体的影响….中国中西医结合消化杂志.2005.13(3): '' ? 临床研究? 141-145. 【15]ZhaoBM,HuangYX,wangQL,ChuZH,ZhaoNX.Effects ofe1ectrOacupunctureongastric8cidsecretionand itsrelationshipwithgastricandepiderma1growth factotinrats【J】.ShiJieHuarenZazhi(Wor1dChin JDigesto1),2000;8(3):271-278. 【16]HirofumiKawanaka,MorimasaTomikawa,Dolgor Baatar.DespiteactivationofEGF—receptor—ERK signa1ingpathwayepithe1ia1proliferationis impairedinportalhypertensivegastric~uco$8 Re1evsnceofMXP一1,c—los,c---mycandcyclinD1 expression.LifeSciences69(2O01)3019-3033. [17】李建玲,易红,冯雪萍等大鼠胃黏膜细胞EGFR通过 ERK-1/2信号传导通路激活AP-1【J】.中国医师杂 志.2003.5(9):1170-1172. 象思维方法"与经络实质研究 何可张泓 (1湖南中医药大学2007级研究生班湖南长沙410007) (2湖南中医药大学湖南长沙410007) [摘要]从经络理论的形成,经络的生理,病理以及经络的研究现状等方面对经络的实质与"象思维方法"的关系进行初 步探讨,认为"象思维方法"与经络理论及经络的研究有较强的内在联系,并指出当 今及以后的经络研究方向应该以临床 疗效为基础. 关键词:象思维方法经络实质经络研究 中图分类号:R245.2文献标识码:B文章编号:1672-5085(20o8)5-0177-02 "象思维方法",就是以事物表现于外的形象,征象为依据, 通过广泛联系,来探究事物内在本质和事物运动变化规律的思 维方法.象思维的"象",可以说与现代信息科学的"信息" 同义…."象思维方法"最早见于《周易》,《黄帝内经》大量 运用该方法建立了一系列中医学的基本理论.经络学说是《黄 帝内经》的主要内容之一,该书用大篇幅论及,故《灵枢》又 有《针经》之称.然而经络的实质是什么?《内经》中记载的 经络是否客观存在?其所记载的经脉循行路线又是如何产生 的?这些问题一直以来困扰着人们,在该书及以后的医书中并 无明确 答案 八年级地理上册填图题岩土工程勘察试题省略号的作用及举例应急救援安全知识车间5s试题及答案 .从上世纪五十年代开始,经络实质研究一直作为 重大研究课题,但是至今为止,学者们大多都是通过各种各样 的现代实验为基础来研究经络实质,提出了各种假说,然而并 未为经络实质的研究带来春天. 半个多世纪以来经络实质的假说层出不穷,如:经络与神 经系统相关说,经络与神经体液调节说,经络波导说,动态液 晶系统说,经络与血管淋巴管相关说,生物电磁场说,第三 平衡系统说,经络与进化学相关论,经络信息论,轴索反射接 力联动说,经络的基因观,芯片论等.但目前众多的假说都不 能独立的对经络系统循行分布,生理功能,病理反应等作出完 美的诠释.实质上,由于现代医学界有许多人在对经络进行 研究时并没有摆脱笛卡尔机械唯物论的束缚,或多或少受到近 代还原论思路方法的影响,试图对经络存在于人体的现象和规 律直接用物理的,化学的现象来解释,把经络归结为机械的, 物理的,化学的,生物的等等低级运动形式,仅仅停留在"看 到了才承认存在"的运动形式上.结果导致任何一种经络模式 假说都不能完全包容中医经络的内涵.'. 实际上经络学说的产生是人们在当时的历史条件下用 "象思维方法"对经络现象的解释,那么完全用现代实验去 研究,当然不可能找出一个实体的经络.回想一下经络理论 的形成背景:经络学说的记载最早见于1973年湖南省长沙 市马王堆出土的帛书《阴阳十一脉灸经》和《足臂十一脉灸 经》,但其内容只涉及十一脉的循行和病证以及灸法等,《黄 "象思维方法"详细说 帝内经》则确立了经络学说,并运用 明了十二经脉循行路线及主治.《灵枢?经脉》日:"经脉者, 常不可见也,其虚实也,以气口知之",这说明古人并没有 确认经脉的客观存在,而只是对人体生命活动的外在表现来 ?177?