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锰对体外鸡脾淋巴细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响

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锰对体外鸡脾淋巴细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响锰对体外鸡脾淋巴细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响 东北农业大学农学硕士学位论文 ,(,(,总,,,的抽提与鉴 定…………………………………………………………………………………,, ,(,(,目的基因实时?,,,方法的鉴 定…………………………………………………………(,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子,,,,表达水平的影响………………………………,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,(, ,,,,表达水平的影响……………………………((,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(,, ,,,,表达...

锰对体外鸡脾淋巴细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响
锰对体外鸡脾淋巴细胞炎症因子和细胞因子mRNA表达的影响 东北农业大学农学硕士学位论文 ,(,(,总,,,的抽提与鉴 定…………………………………………………………………………………,, ,(,(,目的基因实时?,,,方法的鉴 定…………………………………………………………(,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子,,,,表达水平的影响………………………………,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,(, ,,,,表达水平的影响……………………………((,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(,, ,,,,表达水平的影响……………………………(,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,(, ,,,,表达水平的影响……………………………(,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,, ,,,,表达水平的影响………………………………(,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,,, ,,,,表达水平的影响……………………………,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中细胞因子,,,,表达水平的影响………………………………,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(, ,,,,表达水平的影 响………………………………((,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(,,, ,,,,表达水平的影响……………………………(,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,吖,,,,表达水平的影响………………………………,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,, ,,,,表达水平的影响………………………………(,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,, ,,,,表达水平的影响……………………………………,, ,(,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(,, ,,,,表达水平的影响………………………………,,,讨 论…………………………(…………………………………………………………………………………………((,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子,,,(,、,,(,,、,,,,、,,,,,和,,,,, ,,,,表达水平的影响……………………………………………………………………………………((,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,,,、〔,,,,和,,(,,, ,,,,表达水平的影响…………………,, ,(,锰对鸡脾脏淋巴细胞中,,(, ,,,,表达水平的影响…………………………………((,, 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,,,,,, ,, ,,(,(,,,;,,,, ,……………(…………………………………………………,, ? 研究生学位论文独创声明和使用授权书 独 创 声 明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得 ,逵,如遗查基他盂墨挂剔岂明的:奎拦互窒,或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 日期:一口口年,月,日 学位论文作者签名:,,,罗、 学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名:乌听罗, 日期:跏呜年,月,日 导 师 签 名: 腠小吁 日期:),鸬年,月),日 摘要 摘 要 锰是一种必需微量元素,是维持生物机体生长发育和正常机体功能的必需物质。但是,近年来,随着工农业中锰的广泛应用,过量的锰在机体内蓄积所导致的毒性反应已经影响到机体的正常生理功能。目前,国内外对锰毒性的研究主要集中在锰的神经和生殖毒性上。对免疫毒性的研究比较少,对禽类免疫细胞影响的研究未见报道。本实验的目的是研究锰对鸡脾脏淋巴细胞炎症因子和细胞因子,,,,表达的影响。试验以鸡脾脏淋巴细胞为研究对象,在培养液中分别加入终浓度为,、,×,,„,、,,,,,、,×,,,和,×,,,,,,,?,。,氯化锰,分别培养,,、,,、,,和,, ,,通过对鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子,,,,(,,、,,,,,、,,,,、,,,(,、,,,,,和细胞因子,,(,、,,,,、,,,,、,,(,,,,、,,,,,、,,,吖,,,,表达水平的检测,探讨锰对脾脏淋巴细胞免疫功能影响的机理。研究结果表明: (,)鸡脾脏淋巴细胞中炎症因子,,,,,、,,(,,,、,,,,、,,,(,和,,,,, ,,,,表达水平随着锰浓度的增加先升高后降低,表明锰促进炎症反应的发生,但是过量的锰会损伤鸡脾脏淋巴细胞的免疫功能。 (,)鸡脾脏淋巴细胞中细胞因子,,(,、,,(,、,,(,、,,(, ,,,和,,(,, ,,,,表达水平随着锰浓度的增加而下降,,,,吖,,,,表达量升高,表明过量的锰对鸡脾脏淋巴细胞的细胞免疫功能有抑制作用。 综上所述,过量的锰会引起鸡脾脏淋巴细胞免疫抑制,损坏鸡脾脏淋巴细胞的免疫功能;引发炎症反应。本研究将为今后对锰的免疫毒性的研究提供基础数据。此外,在禽类免疫方面,锰中毒的机理还需要进一步研究。关键词锰:鸡;脾脏淋巴细胞;细胞因子;炎症因子 ,,,,,,;,—,,,,,目,目,,,,,,,,,,,,,,,,?,,,,,?,,,,,,,,,,,,,,?,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,;, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,。,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,;,,, ,,,,,, ,,,,,,;,,, , ,, ,,,,, 一 一 一 ,,,,,,;, ,,,,,,,,,(,,),, ,, ,,,,,,,,, ,,,;, ,,,,,,,,,,,;, ,, ,,;,,,,,, ,,, ,,,,,,,;,, ,,,,,, ,,,;,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,, , ,,,, ,,, ,,,, ,,,,, ,, ,,,,, ,, ,, ,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,;,,,,,, ,, ,,;,,, ,,,,,,,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,, ,, ,,, ,;;,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,;,,,,, ,, ,,,,,, ,,,;,,,,(,,,,,,,;,, ,,,,,,,;,, ,,,,,, , ,,,,,,, ,,,,,,;,,, ,, ,,,,;,,, ,, ,, ,,;,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,( ,,, ,,, ,, ,,,, ,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,;, ,, ,,,,,,,,, ,, ;,,,,,,, ,,, 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锰中毒是长期暴露于锰环境中或暴露在锰浓度过高的环境中所导致的生物机体中毒的现象。研究表明摄入过量的锰,会对机体产生不良作用。,,,,,;,,,, ,等人(,,,,)研究表明过量的锰会在小鼠体内沉积,引起小鼠的代谢活动异常和机体功能障碍,,,】。,,,,,, ,,等人(,,,,)研究表明过量的锰可引起生物机体运动活动受损【,,,。,(,(, 锰中毒对神经系统的影响 ,,,,,,, ,等人(,,,,)研究发现过量的锰暴露会使动物和人类产生一种类似慢性帕金森病的神经系统综合症,在锰存在的条件下,机体会产生神经毒剂,(羟基多巴胺,可破坏中枢神经系统中的多巴胺神经末梢,,”。,,,,,,, ,等人(,,,,)研究发现过量的锰暴露与神经行为缺陷和神经系统疾病及神经精神疾病有关【,引。之后,,,,, ,,,,等人(,,,,)研究表明锰具有神经毒性,大脑中过量的锰暴露能够破坏大鼠的多巴胺神经元,同时活化的小胶质细胞和其相关的活化产物在神经退化过程中发挥着重要的作用,,,】(此外,,,,,,,, ,,等人 (,,,,)研究表明长期暴露于雾化锰中,吸入的锰会引起神经系统疾病(包括锥体外系运动症状和认知障碍,破坏神经递质的释放,限制苯丙胺诱发的多巴胺增加,,,】。,;,,,,,,, ,,等人(,,,,)研究发现长期锰暴籍会引起大鼠背侧纹状体中的多巴胺转运蛋白水平减少【,,,( 东北农业大学农学硕士学位论文,(,(,锰中毒对生殖系统的影响 ,,,,,,,,, ,等人(,,,,)报道锰可穿过胎盘屏障导致胎儿畸形【,,,。,,,,, ,等人 (,,,,)研究发现小鼠长期摄入高浓度的四水合氯化锰会降低雄性小鼠的生殖能力【,,,(井明艳等人(,,,,)研究发现锰与机体的造血功能有密切的关系,在胚胎发育早期肝脏里就聚集了大量的锰,胚胎期的肝脏是动物机体重要的造血器官,,,】。樊卫萍等人(,,,,)报道过量的锰会影响妊娠啮齿动物的生殖能力,还对母体及胎儿产生毒性,大量锰盐可以通过胎盘,导致生物畸形【,引。,,,,,,,, ,等人(,,,,)研究发现海洋环境中,锰亦是一种新的环境污染物,且具有胚胎毒性,过量的锰会影响,,,,;,,,,,,,,苋海胆胚胎的发育,,,,。,(,(,锰中毒对免疫系统的影响 ,,,,,;,,,, ,等人(,,,,)连续,周每日给小鼠注射氯化锰,剂量分别是,,,,,和,,毫克,千克,,,毫克,千克的剂量组肝脏和脾脏的重量增加,,,,。锰具有一定免疫毒性,动物长期暴露在高锰的环境中,可影响免疫器官的正常功能,对免疫系统产生不良影响。郭建霞等人 (,,,,)研究发现给小鼠每天染氯化锰,、,、,周后处死。发现染锰,周后脾脏重量增加,而染锰六周脾脏重量反而下降【,引。,,,,, ,,,,,,,,等人(,,,,)把挪威鳌虾置于含,, ,,,,氯化锰的水域中或给其染锰,,(, ,,,,, ,,天会导致鳌虾血淋巴中的血细胞总数减少约,,,,, ,。李志鹏(,,,,)的研究结果表明过量锰可抑制禽类的免疫功能,能引起鸡免疫器官的剖检、纤维和超微结构发生变化;染锰可使鸡的脾脏、胸腺、法氏囊中锰含量升高而其他金属元素含量降低(如:锌、铁、钙),揭示了锰中毒可破坏动物机体免疫器官中微量元素和钙的平衡;亚慢性锰中毒可诱导鸡的免疫器官(如:脾脏、胸腺、法氏囊)中过量的细胞凋亡,”,。,(,(,(,锰中毒对特异性免疫的影响 特异性免疫通常经过免疫接种进行诱导的免疫反应。所谓免疫接种就是集体接触外来抗原时,接受抗原信号的过程,叭。特异性免疫可分为体液免疫和细胞免疫。 王家骥等人(,,,,)研究发现给小鼠连续,,天自由饮用含不同浓度硫酸锰(,(,,,,,,,,,(,, ,,,,,,)的水,结果显示给锰组血清溶血素水平比空白对照组低,这表明锰可对体液免疫机制产生了显著地免疫抑制毒性作用【,,,。刘凤娟等人(,,,,)研究发现给体外培养的淋巴细胞染锰同时在培养液中加,,、,,、,,,,进行正交试验,结果表明随着染锰剂量的增 加和染锰时间的延长,,淋巴细胞的增殖功能和自然杀伤细胞(,,细胞)的活性以及,,(,的含量都显著下降,?。谢卫红(,,,,)对在含锰环境中作业人群的免疫系统变化及其机理进行了研究,发现当工人作业环境中的锰浓度为,(,,一,(,, ,,,,,时。作业工人的细胞免疫功能就己受到了抑制,体内的,,,和,,,细胞数量明显减少,,,,,,,,的比值下降。并且工人体内的,,细胞数量也比正常人低,,,,。,,,,,, ,等人(,,,,)对暴露在锰环境中的男性的细胞免疫系统进行检测,检测结果表明,淋巴细胞,特别是,,,,和,,,, , 前言,,,,,,,,淋巴细胞及与,,,,,,淋巴细胞均与锰浓度成显著的负相关【,,,。吸入焊接烟尘会影响作业工人的免疫系统,因为焊接烟尘中的锰可诱导免疫抑制作用,,,,,,,,, ,,等人 (,,,,)给,,,,,,,?,,,,,,大鼠气管注入单剂量(, ,,,只)或重复剂量(,(,,,或, ,,,,只,,周)的氯化锰,代表不同级别焊接所产生的烟雾,结果显示,,,,和,,,,,淋巴细胞的数量显著下降,引。 在研究锰中毒对免疫功能的影响时发现,染锰对,,,、,,,、,,,的影响报道结论不一。缪其宏(,,,,)对厂房空气中锰盐气溶胶浓度进行调查发现,在,,,, ,,,,,时,厂内会有半数工人的血清,,浓度高于对照组(检查仪表车间的工人)〔,,,。李东阳等人(,,,,)调查研究发现触锰工人尿液中的锰含量与血液中的锰含量呈正相关(,,,(,,),当血液中的锰浓度在,(,, ,,,,以上时,血清,,,和,,,均低于空白对照组且触锰工人血液中的,,,和,,,与血液中锰的含量呈负相关,这些表明电焊烟尘中的锰能够对免疫功能产生抑制作用【,,】。陈晓敏等人(,,,,)对锰作业工人进行调查研究,发现锰暴露组血清中的免疫球蛋白(,,,、,,,、,,,)的表达水平有随着锰暴露剂量的增加而升高的趋势,,,,、,,,和,,,的含量与尿锰含量呈正相关,且,,,与锰暴露的水平呈正相关【,?。李小玲等人 (,,,,)对锰作业工人检测(作业点,,,,浓度在,(,,,,(,, ,,,,,之间平均为,(,,,,,,,)。结果显示锰作业工人血清中的,,,、,,,均低于空白对照组(,,,(,,)(锰作业工人血液中的,,,、,,,与血液中的锰含量呈负相关,尿液中的锰含量与血液中的锰含量呈正相关(,,,(,,),这些表明锰作业工人长期接触锰烟尘会不同程度的抑制机体的免疫功能,引。,(,(,(,锰中毒对非特异性免疫功能的影响 非特异性免疫和特异性免疫一样都是人类在漫长进化过程中获得的一种遗传特性,但是非特异性免疫是人一生下来就具有,所以又称固有免疫或天然免疫,而特异性免疫需要经历一个过程才能获得。非特异性免疫系统包括:固有免疫细胞(吞噬细胞、杀伤细胞、树突状细胞等);固有免疫分子(补体、细胞因子、酶类物质等);组织屏障(皮肤和黏膜系统、血脑屏障、胎盘屏障等)。非特异性免疫对各种入侵的病原微生物能快速反应,同时在特异性免疫的启动和效应过程也起着重要作用。非特异性免疫是特异性免疫的基础,同时,特异性免疫所产生的免疫物质又能增强非特异性免疫的作用。 ,,,,,,等人(,,,,)研究表明,氯化锰可显著抑制体外培养的家兔吞噬细胞的吞噬能力【”,。,,,,, ,(,,,,,,,,;,等人(,,,,)研究发现给小鼠肌肉注射一剂量的氯化锰,小鼠体内吞噬细胞的吞噬功能显著增强【,们。,,,,,,,,, ,等人(,,,,)报道锰可以跨越完整的血(脑屏酬, ,,。农清清等人(,,,,)研究发现亚慢 性锰中毒可能会通过抑制脑,,,、,,,,(,,“(,,,酶活力,导致细胞的排钙能力下降,细胞内;,,,浓度升高,进而会引起钙稳态失调…。刘风娟等人(,,,,)在体外培养淋巴细胞的试验中,染锰的同时在培养液中加,,、,,、,,,,进行正交试验,用,,,法检测,结果表明随着染锰剂量的增加和染锰时间的延长,自然杀伤细胞(,,细胞)的活性显著下降,?。谢卫红等人(,,,,)对在含锰环境中作 , .
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