白芍总苷粉针剂的免疫药理作用

白芍总苷粉针剂的免疫药理作用 白芍总苷粉针剂的免疫药理作用 2OO2年3月第19卷第1期广州中医药大学 Mar~h2002,.19nlJ.uroalofcuIIUn~ersT~6analCneMedicine43 文章编号:1007—3213(2OO2)01—0043—03 白芍总苷粉针剂的免疫药理作用 高崇凯,吴雁,王勇,颜 (1广东省深圳南方制药厂技术中.深圳518029 杰,潘华新,曹柳英,梁瑞燕 2.广州中医药大学临床药理研究所,广州510405) 摘要:【目的l探计白芍苷(TGP)将针剂的免疫药理作用.【方法】观察IGp粉针剂对小鼠迟发型超敏反应(ddayedhy- perset~sitivity,DH),碳廓清,瘩血素生成反应,免攫器官重量和脾淋巴细胞增殖的影响.【结果】腹腔内注射(iP.)TGP 将针荆200,300mg?kg'.-d,,连用7d,可显着降低小鼠DH和磺廓清指数;100—300mg?虹..?diP.×7d对小鼠溶血素生 成反应,小鼠脾脏和胸咏重量均无嗝显影响在64,256g-mL..浓度范围内可抑制刀豆素蛋白A(co)请导的体外小鼠 脾淋巴细胞增殖反应【结论】TGP粉针剂在适当量下可抑制特异性细胞免疫反应和单核/巨噬细胞,T淋巴细胞功能, 并对免疫器官重量无明显影响. 关键词:白芍总苷粉针荆/#i理学:白芍/药理学;超敏反应,迟发型/中药疗法;溶血素类/血液; 淋巴细胞增多/免疫学 中图分类号:R285.5文献标识码:A 白芍总苷(totalglucosidesofpaeonia,wP)是 从中药白芍中提取的主要有效成分,文献报道 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明 TGP具有免疫调节,抗炎,镇痛,镇静和降温等多 种药理作用,并可用于I临床治疗类风湿性关节炎 等l】_2J.TGP粉针剂是在原有口服制剂基础上研制 而成的新剂型,为探讨该药的免疫药理作用机制, 我们观察了TGP粉针剂对小鼠迟发型超敏反应 (delayedhypersensitivib,,DH),碳廓清,溶血素生 成反应,免疫器官重量和脾淋巴细胞增殖的影响, 现将实验结果报告如下. 1材料与方法 1.1药物TGP粉针剂,深圳三九医药股份有限 公司提供批号000809,临用前以1.54moLeL(即 0.9%)氯化钠注射液(NS)稀释成所需浓度, 0.22tan+0.45tan双层滤膜过滤除菌:注射用环磷 酰胺,批号99O607,上海华联制药有限公司出品 1.2动物NIH小白鼠,体重l8,22g,雌雄各 半,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号 99A030 1.3试剂RPMI1640,Gibco产品;小牛血清, 杭州四季青生物工程材料研究所产品;刀豆素蛋白 A(CorLa.),四唑蓝(M),十二烷基磺酸钠 (SDS),均为Sigma产品;二硝基氟苯(DNFB),日 本东京化成工业株式会社产品;中华墨汁,北京一 收稿日期:2001—08—10 作者茼介:高崇凯(1957一).男.高级工程师 得阁墨汁厂特制品;新鲜豚鼠血清(作补体),其 他试剂均为国产 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯试剂. 1.4主要仪器1/101300电子分析天平(13本岛 津);超纯水器(美国Millipore);96孔细胞培养板 (美国CORNING);c02培养箱(13本三洋);倒置 显微镜(日本OLYMPUS);冷冻离心机(美国 Beckmen);酶联免疫检测仪(华东电子管厂);打 孔器(直径8一)等. 1.5试验方法 1.5.1动物分组及给药方法将小鼠随机分为5 组,每组l0只,雌雄各半,每13给药1次(对照 组给予等体积Ns),腹腔内注射(i.P.)连续7d. 15.2DNFB谤导的DH反应L3J用药3d,50 LDNFB涂小鼠右侧背中部致敏.用药7d,以l0 LDNFB涂左耳攻击;右耳涂丙酮对照.攻击后 30h处死,打孔器取耳片,左右耳片重量之差为肿 胀度另取胸腺,脾脏称重,以每10g小鼠脾重 (mg)和胸腺重(mg)作为脾脏指数和胸腺指数. 1.5.3溶血素生成反应参考文献方法改进后 进行.用药1d,i_pl5%绵羊红细胞(SRBC)0.5mL 致敏;用药7d后,摘眼球取血,收集血清,按常规 测定溶血素含量.以D(OD值)代表溶血素生成反 应强弱.另取胸腺,脾脏称重,以每10g小鼠脾重 (唱)和胸腺重(唱)作为脾脏指数和胸腺指数 1.5.4碳廓清试验用药7d后,将各组小鼠尾静 广州中医药大学20O2年第19卷 脉注射体积分数为1:5的稀释墨汁.分别于注射后 2rain,20rain取血.参考文献:3方法测定和计 算碳廓清指数 1.5.5体外淋巴细胞增殖试验取正常NIH系小 鼠,按常规制取脾淋巴细胞悬液2Xlo6/叭L.取 0.2mL加至96孔细胞培养板,设空白,CorL~对照, ConA+TGP等组,TCP设5个等比稀释的浓度.采 用MIT法测定淋巴细胞增殖能力.向= D刺融孔/D无刺融孔(D为光谱光密度.opticaldensi~, 俗称OD值). 2结果 2.1对小鼠碳廓清能力的影响表1显示,TGP 粉针高,中剂量组和环磷酰胺组小鼠校正廓清指数 n均较对照组降低(P<O.05).TGP粉针高,中剂 表1TGP粉针痢对小鼠碳廓清能力c口)的影响{?} "fal~1Ef~elofTPGlOI1carbonclear'oneplasma 统计方法:检验;*与对照组比(cm',twt岬)P<005;# 与环磷酰胺蛆比较(街CPAuP)P(0.05 量组与环磷酰胺组比较均无显着差别,TGP粉针剂 低剂量组高于环磷酰胺组(P<0.05). 2.2对小鼠DH及胸腺,脾脏重量的影响表2 显示TGP粉针剂高,中剂量组耳肿胀度均比对照 组降低(P<0.01或P<0.05);TGP粉针剂各剂 量组胸腺指数()和脾脏指数(sDl)与 对照组比均无显着性差异(P>0.05)环磷酰胺 组耳肿胀度虽也有显着降低(P<0.01),但同时 对免疫器官胸腺,脾脏的重量也比对照组有显着减 轻作用(P<0001).TG~粉针剂低剂量组耳肿胀 度,TGP粉针剂各剂量组脾脏指数和胸腺指数均显 着高于环磷酰胺组(P<0.01或P<0.001) 2.3对小鼠溶血素生成反应及胸腺,脾脏重量的 影响表3显示,与对照组比较,环磷酰胺组小鼠 溶血素口值降低(P<0.001),TGP粉针剂各剂量 组均无显着性变化;环磷酰胺组小鼠的胸腺指数显 着降低【P<0.001).TGP粉针剂各剂量组溶血素 D值,胸腺指数均高于环磷酰胺组(均P< 0.001).脾脏指数各组之间均无显着差别. 2.4对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响表4显示, 与ConA对照孔比较,TGP粉针剂在64—256 ?mL浓度范围内,可显着降低ConA诱导的小 鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数(,)(P<005, P<0,01). 表2P粉针剂对小鼠DH及胸腺,脾脏重量的影响 Table2EffectofTPGIondelayedhypersensitivandtheweightoftmUSandspleeninmicef?) 统计方法:槛验;*与对照组比较(?controlg~uup)P(0.05 <O01.##P(0.001;AS(~,-ioularswelling),耳肿胀;CPA *}P(00l,…P<0GOI;#与环磷酰胺组比较(ClOAgroup>P d0ph09ph口e 表3TGP粉针剂对小鼠溶血素生成反应厦胸腺,脾脏重量的影响 Table3EfIedofTPGIOnhemc;ysinnB鲁bn.thewe畸htof廿'yrnusand甲l?nc?s) 检验方法ll检驻;…与对照组比较{w~ont,xa删PP'0.0Ol;##与环磷酰胺组比较(?CPAp)P(0001 等白芍总苷粉针剂的免疫药理作用45 第1期高崇凯. 表4唧粉针痢对CorL~.诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 Table4EffeclofTPGION口1eD『oIifera0nol spleenq)h0哪einmiceIi?) 检验方法:检验;*与对照组比较(?n【rd【 P<005.**P<00l 3讨论 本实验结果表明.TGP粉针剂可降低小鼠DFI 和碳廓清指数,又可抑制ConA诱导的体外小鼠脾 淋巴细胞增殖反应,且不会明显减轻主要免疫器官 胸腺和脾脏的重量,提示该药在适当剂量下对特异 性细胞免疫反应和单核/巨噬细胞功能以及T淋巴 细胞功能具有抑制作用,并且对免疫器官无明显副 作用.本实验未发现11.P粉针剂对溶血素生成反 应有明显作用,其机制有待于进一步探讨.阳性对 照药环磷酰胺虽对免疫功能有较强的抑制作用,但 对免疫器官的重量也有明显的减轻作用. 文献报道显示TGP口服制剂对小鼠免疫功能 具有双向调节作用[2,6S,本实验未见此类作用,可 能与给药剂量和给药途径,以及TGP口服制剂改 制成粉针剂后引起有效成分含量,血药浓度变化等 因素有关. 参考文献: [1]赵泰,朱僭金近年来白芍总甙的药理研究.J]天津药 学.1992,4(1):23 [2]张鸿炼,吴文蔚白芍总甙的药理作用与临床应用[J].中 国医院药学杂志,1995,15(8):371 3]椽叔云,卞如潦.陈修药理实验方法学:M:第2版 北京:人民卫生出版社,I9941226 4]李仪奎中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术 出版社,1991159,157. 5]郑隶唐.贲昆龙测定细胞存活和增殖的MTr方法的建立 [J:免疫学杂志,1992,8(4):266 [6]魏文树,汪叉琦王玉山,等白芍总甙对免疫应答的调节 作用:J_中国药理学通报,1987,3(3):148. ActionofTotalPaeoniaGlueo~desh~jecaonin? 0Chongkai.,Yon,WANGYong,YAN皿, PANHuaxin,CAOrig,HANGRuiyan (ITedmolo~Cater.Sh~nhenNanfangH?口?删Factory,sl】518029.China; 2ClinlcalPhrarnacok~Institute,‰gh挑un田畸d代M.G曲叩519405.Chlna) Abstract:【Objective】Tostudytheimn1un叩ha? nacol0gicalactionoftotalpaconiaglueosidesinjection(TPGI)inmice. 【Methods】EffectsofTPGIOildelayedhypersensitivity,~rbolqclearance,hemolysinresponse,Jlllnltlil eo[~anweishtand spleenlymphowteproliferationinmicewereobserved.【Results】'13~Iinthedoseof200,300mg/kSi.P.perdayfor 7dayscanremarkablydecreasethedelayedhypo~ensitivityandc日nclearance,and64,256mLTPGICallinhibit thespleenlymphocyteproliferationinducedbyConA.【Conclusion】TIinproperdosecaI1dep]sspecialcellularim— mu/leresponseandthefunctionofthemononuelearcell,macr0phBgeandTlymphocyte. Keywords:TOTALPAEONIAGLUCOSIDESINJEc?0N/pIlarmacology RADIXPAEONIAEALBA/pharmacy; DELAYED/TCDtherapy HEM0IYSINS/bl00d: LYMPHOC~3"OSIS/immunology