【doc】头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价

【doc】头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固 酶阴性葡萄球菌的评价 实验与检验医学2008年12月第26卷第6期 ? 实验研究? 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的 评价 杨庆忠韩立忠2万向农3 中图分类号R446.5.Q939.92文献标识码A文章编号1674—1129(2008)06—0619—02 【摘要】目的评价头孢西丁(F0x)纸片扩散法(K—B)检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的 临床应用价值.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的139株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS1.并与 苯唑西林(0XA)纸片扩散法,mecA基因检测进行比较.结果mecA基因阳性的109株CNS对FOX显 示耐药,而对OXA则只有97株显示耐药结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致.苯 唑西林纸片扩散法则存在一定的差异,临床实验室应用FOX取代OXA来检测MRCNS. 【关键词】耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌;头孢西丁;苯唑西林;纸片扩散法 当前.耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRC. NS)已成为医院感染的重要病原菌之一.它对所有的 B一内酰胺类抗生素及其衍生物耐药,并且常对其它 抗生素 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 现为多重耐药(MDR)因此准确迅速的检 测MRCNS不仅可指导临床合理使用抗生素.还有 利于控制其传播根据美国实验室 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 化委员会 fNCCLS)2005年推荐用头孢西丁检测MRCNS的标 准.对我院临床标本中分离的139株CNS进行头孢 西T(FOX)~片扩散试验.并与苯唑西林(OXA)纸片 试验,mecA基因PCR法进行比较. l 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 与方法 1.1菌株来源留取2005年7月,2005年12月 我院临床各类标本中分离的CNS139株.其中表皮 葡萄球菌42株,溶血葡萄球菌87株,头状葡萄球菌 6株.其它葡萄球菌4株.未检出路邓葡萄球菌.标 准菌株为凝固酶阴性葡萄球菌ATCC4330 1.2仪器材料法国生物梅里埃公司VITEK32型 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 系统,葡萄球菌鉴定用ID32STAPH板条.M—H 琼脂平皿,头孢西丁(FOX,30txg),苯唑西林(OXA, 1均为英国Oxiod公司产品,mecA基因扩增引物 1:5-_AAATCGATGGTAAAGGTTGGC一3,引物2: 5-_AGTTCTGCAGTACCGGATrrGA一3.由上海复星 实业股份有限公司合成并提供配套试剂l11PCR仪 器为PE一570扩增仪 】.3方法 作者单位:330006南昌,1,江西省妇幼保健院检验科; 2000252,上海交通大学附属瑞金医院微生物科;330006 3,江西省武警总队医院检验科 作者简介:37岁,汉族,本科,主管技师,从事临床微生物方 面的研究. 1.3.1头孢西丁纸片扩散法根据NCCLS(2005年1 标准进行试验,判断标准:头孢西丁抑菌圈直径? 24mm为耐药fR),?25mm为敏感fS1.路邓葡萄球菌 按金黄色葡萄球菌的标准判断 1.3,2苯唑西林纸片扩散法按NCCLSf2005年1 标准判断:苯唑西林抑菌圈直径?17mm为耐药fR), ?18mm为敏感fS1. 1.3.3mecA基因检测用PCR法进行mecA基因 检测嘲结果判断在533bp处出现荧光区带为InecA 基因阳性 2结果 2.1mecA基因检测结果139株CNS中mecA基 因阳性的109株.阴性的30株. 2.2两种纸片扩散法检测MRCNS的结果FOX 与OXA纸片扩散法筛选MRCNS的结果见附表 FOX与mecA基因比,阳性率为100%.而OXA的阳 性率为69.8% 3讨论 随着CNS院内感染的日益增多.对常用抗生素 呈现多重耐药.越来越受到医务人员的关注?葡萄 球菌对甲氧西林的耐药机制主要有3种:(1)cA 基因介导产生了低亲和力的青霉素结合蛋白 fPBP2a);(2)产生过量的青霉素酶;(3)PBPs的修饰『21. 其中以葡萄球菌获得了nlecA基因.能够编码产生 低亲和力的PBP2a为主但是mecA基因的表达受 遗传背景和诱导剂等因素的影响.获得性mecA基 因表达的耐药水平从表型敏感到高度耐药不等I31 这些低水平,异质性耐药株给表型检测MRS带来一 定困难用苯唑西林纸片扩散法检测常常出现假敏 ? 620?Experimental&LabMed.December2008.Vo126,N06 附表三种方法检测MRCNS的比较 感.特异性不高,只有mecA基因或PBP2a的检测被 认为是判断MRS的金标准.但临床实验室难于常规 开展.NCCLs(2004年1推荐用头孢西丁纸片扩散法 检测耐甲氧西林的葡萄球菌【4J. 从附表的结果可以看出.用头孢西丁检测的结 果与检测mecA基因结果高度一致.特异性为 100%.而苯唑西林的特异性只有89%,这主要是由 于部分低水平,异质性的CNS用苯唑西林时会出现 假敏感.导致漏检.特异性下降,特别是表皮葡萄球 菌和溶血葡萄球菌而头孢西丁与mecA基因的表 达有很好的相关性.这可能是由于头孢西丁与 PBP2a及其各种PBPs相互作用的结果.头孢西丁属 于第二代头霉素,对B一内酰胺酶稳定,有文献报道 [51 .金黄色葡萄球菌耐头霉素菌株在头霉素的诱导 下会产生PBP2a.而非头霉素类的头孢菌素却没有 这个特点mecA基因在葡萄球菌属中具有较高的 同源性.无论是金黄色葡萄球菌还是凝固酶阴性葡 萄球菌.只要有mecA基因存在就会表达为MRS.因 此对于低水平,异质性的CNS,由于头孢西丁的诱 导.促使mecA基因的高表达.可提高MRCNS筛选 f上接第663页1定虽然在国外已不作为肝功能测定的指标, 但在我国没有条件开展电泳的实验室A/G仍是肝肾疾病等 低蛋白血症监测的一个替代指标.由于G是通过TP,ALB 计算而来的.试剂盒说明书中也没有给出G参考值范围. 而近年的参考书中也没有A/G参考值的描述.故很多实验室 仍借用旧的参考书中1.52.5作为参考值范围.其值源于用 20.8%的Na~SO和7%的Na0沉淀球蛋白后测定1]P和 ALB.再通过计算求出G比值[21.而我们采用国内公认的双 缩脲法和溴甲酚绿法对,rP和ALB进行测定.计算出G比 值为0.981.82.临床标本结果分布良好,比较符合实际. 综上所述.我们得出的参考值范围与国内其他地区存在 较大差异,这可能是由于种族,性别,年龄,体位,气温,饮食 习惯等不同所致.也可能是由于仪器,试剂不同所致.因此, 有必要建立和使用适合本地区的TP,ALB,A/G比值的参考 的准确性.与检测mecA基因的金标准法比较,其敏 感性和特异性均在96%以上[61.结果准确可靠.且方 法简便易行.易于临床实验室推广. 结合本研究结果和NCCLs(2005年1的建议.临 床实验室在筛选MRCNS时应用头孢西丁取代苯唑 西林.作为I临床检测的常规方法. 参考文献 【1】KarenC,RebeccaB.RapiddetectionofthestaphylococcalmeeA genefromBACTECbloodculturebotbottlesbythepolymericehmn reaction[J].AmJClinPathol,1996,106:600. 『21吕文祥.沈蓓琼.潘立勇,等.1997,2001年耐甲氧西林葡萄球菌I临 床分离率及耐药性分析『JI.检验医学,2004,19(3):220~223. 【3]Berger-BachiB,RohrerS.Factorsinfluencingmethicillinresistance inStaphylococci[J].ArchMicrobiol,2002,178:165-171. 【4]NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards.Performance standardsforantimicmbialsusceptibilitytesting[S].Fourteenthinfo~ mationalsupplement.Wayne,Pennsylvania:NCCLs,2004,46-47. [5]OkonogiK,NogiY,KondoM,etat.Emergenceofmethicillin-re- sisantclonesfromcephamycin-resistantStaphylococcusaurcus.J AntimicrobChemother,1989,24(5):637-645. f61陈民钧.美国l临床实验室标准化研究所2005年版有关药敏试验 标准化更新要点Ij1.中华检验医学杂志,2005,28(4):449—451. 值.以便更好地服务于临床 参考文献 【1]叶应妩,王毓三.全国l临床检验操作规程【M】.第3版,南京:东南大学 出版社.2006.338,340. [2】张秀明.现代f临床生化检验学[M】.北京:人民军医出版社,2001, 1159. 【3】3上海市医学化验所.临床生化检验【M】.上海:上海科学技术出版社, 1979,44. [4]陈筱菲.温州市区血清总蛋白,白蛋白及MG比值参考值调查明. 临床检验杂志.2001.19(1):49,50. [5】张瑾.台州市区血清总蛋白,白蛋白和MG比值参考值调查明. 中国社区医师,2002,18(16):32. [6]6李忠信.现代临床实验诊断 手册 华为质量管理手册 下载焊接手册下载团建手册下载团建手册下载ld手册下载 [M】.天津:天津科学技术出版社, 1997.107,109.