首页 大肠杆菌选择性培养基(共8篇)

大肠杆菌选择性培养基(共8篇)

举报
开通vip

大肠杆菌选择性培养基(共8篇)大肠杆菌选择性培养基(共8篇)以下是网友分享的关于大肠杆菌选择性培养基的资料8篇,希望对您有所帮助,就爱阅读感谢您的支持。大肠杆菌显色培养基篇一编号:CRM002中文名称:大肠杆菌显色培养基英文名称:ChromogenicE.coliAgar用途:用于大肠杆菌的快速检测和计数。原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶发生1特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿色的菌落...

大肠杆菌选择性培养基(共8篇)
大肠杆菌选择性培养基(共8篇)以下是网友分享的关于大肠杆菌选择性培养基的资料8篇,希望对您有所帮助,就爱阅读感谢您的支持。大肠杆菌显色培养基篇一编号:CRM002中文名称:大肠杆菌显色培养基英文名称:ChromogenicE.coliAgar用途:用于大肠杆菌的快速检测和计数。原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶发生1特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿色的菌落。图鉴:配方(每升):蛋白胨10g酵母膏粉3g氯化钠5g十二烷基硫酸钠0.1g琼脂12g显色底物2.7g最终pH7.0?0.2使用方法:1、称取本品32.8g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌。2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。3、采用倾注法:将培养基水浴冷却至约50?,准备直径90mm已灭菌平皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注约15ml上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37?培养224小时。4、采用表面接种法:冷却至约50?,摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4?)。样品用划线接种法或滤膜法,37?培养24小时。5、观察结果。质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36??1?培养18h,24h生长情况如下表。菌名菌号生长状况培养特征大肠埃希氏菌ATCC25922良好菌落绿色弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864良好菌落无色粪肠球菌ATCC29212受抑制-----贮存:贮存于10?-30?、避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规格:可配置1L的培养基干粉。大肠杆菌培养基配制及培养方法篇二大肠杆菌培养一、菌种冻存液的制备含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油,-80oC冻存。3二、培养基制备LB培养基配方(胰化蛋白胨(Trypton):10g/L;酵母提取物(YeastExtract):5g/L;NaCl:10g/L;pH7.4)液体培养基胰化蛋白胨10.0g酵母粉5.0g氯化钠10.0g水1000mlpH7.4固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5,,2.0,的琼脂三、平板的制备1)称取胰化蛋白胨10.0g,酵母粉5.0g,NaCl10.0g,加入800mL二次水溶解,并用玻璃棒搅拌均匀,用1mol/L的NaOH调pH至7.4左右,定容至1L,调pH7.4(若溶液pH大于7.4,用1mol/LHCl回调)。2)分装在锥形瓶中,每瓶量不宜太多,没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂(150mL液体培养基加入2.5g琼脂)。3)在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸,用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。44)高压蒸汽灭菌锅121oC灭菌15min。5)灭菌后的培养基取出置电热鼓风干燥器内60oC烘干,待锥形瓶的封口纸干燥后取出。液体培养基可直接保存或使用,此时加有琼脂的培养基不会凝固,可在预先紫外杀菌30min以上的无菌操作台上,将培养基倒入培养皿内,每个培养皿培养基约10-15mL(直径90mm),在培养皿中厚度大约4mm左右。将平皿叠放在无菌操作台上,放置10min左右,待琼脂基本凝固可涂平板。6)若平板不直接使用,灭菌后将培养基在锥形瓶中保存,待需制备平板时,微波炉中火加热约3min,使琼脂熔化,室温冷却20min至不烫手可制备平板。四、接种大肠杆菌1)取实验室储备的大肠杆菌BL21冻存液,管口用酒精灯灼烧,打开离心管。2)接种方法一:用灭菌枪头蘸取冻存液在平板边缘上划横条,每三道为一组,旋转平皿一圈,最后中间划之字;接种方法二:用移液枪吸取100uL溶液于平板上,用酒精灯灭菌厚的涂抹棒划十字,涂布平板。3)因实验一般都要求挑取单菌落,故涂平板适应考虑冻存液内细菌数量,若菌量过大应适当稀释。一般方法一获得单菌落的可能性比较大。涂平板应在酒精灯附近进行,若冻存液涂完的平板应倒置,防止平皿盖5上产生水蒸气。五、大肠杆菌的培养1)将接种好的平皿倒置放入37?的恒温培养箱中培养,大约十几小时后长出菌落。2)挑取生长状态好,特征明显的单个菌落,接种于新鲜灭菌的LB液体培养基中37?,220rpm/min恒温振荡培养9-12h。菌落特征:乳白色,圆形,菌落边缘整齐,表面光滑,表面和背面颜色一致。大肠菌群大肠杆菌显色培养基篇三培养基名称:大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)英文名称:ChromogenicColiform&E.coliAgar大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)用途:用于大肠菌群和大肠杆菌的快速检测和计数。大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)使用原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;混合显色底物分别与大肠菌群和大肠杆菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上大肠菌群产生橙红色的菌落,大肠杆菌产生蓝绿色的菌落。6大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)配方(每升):蛋白胨15.0g酵母膏粉3.0g氯化钠5.0g十二烷基硫酸钠0.1g琼脂12.0g混合显色底物6.77g最终pH7.0?0.2大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)使用方法:1、称取大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC)41.9g,加入蒸馏水或去离子水1.0L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115?高压灭菌10min。2、以无菌手续取样品25.0g或25.0mL,加入含225.0mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45?左右的培养基。3、观察结果。质量控制:大肠菌群大肠杆菌(ECC)倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36?1?培养18,24h生长情况如下表。菌名7大肠埃希氏菌柠檬酸杆菌鼠伤寒沙门氏菌粪肠球菌菌号ATCC25922ATCC8090CMCC50115ATCC29212生长状况良好良好良好受抑制培养特征菌落蓝绿色菌落橙红色菌落无色-----贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。规格:可配置1L的培养基干粉。关于大肠杆菌培养基的优化实验篇四关于大肠杆菌培养基的优化实验一、实验目的:研究培养基中适宜的PH值,温度及含水量最佳配比,学会处理实验中的各种误差,掌握发酵培养基的配制方法。二、(1)实验单元:培养基,无菌移液器,恒温箱,玻璃棒,大肠杆菌,灭菌箱,营养液等。(2)实验效应:发酵液中的OD值。(3)实验因素:温度,PH值,含水量等。三、实验过程:(1)将培养基灭菌、标记、包扎,将培养好的菌种摇匀用无菌移液器分别移至个实验组中(注意等量原则);8(2)将实验组分别放置在8、15、38、42、50摄氏度的恒温箱中培养30分钟,其他实验变量保持相同;(3)将实验组分别放置在PH为6、7、8、9、10的恒温箱中培养30分钟,其他实验变量保持相同;(4)测定各摇瓶中的OD值并分析比较。四、实验结果假设当温度为38摄氏度,PH值为8时,大肠杆菌的生长速度最快。大肠杆菌的生长速度与设定温度的最佳温度成正比例函数态分布,与PH值呈正态函数分布。下表为实验数据:单位:g/ml/min五、误差分析(1)关于系统误差——T检验法纵向比较X1=0.006669
本文档为【大肠杆菌选择性培养基(共8篇)】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
该文档来自用户分享,如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服,我们会及时删除。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
下载需要: 免费 已有0 人下载
最新资料
资料动态
专题动态
is_482581
暂无简介~
格式:doc
大小:20KB
软件:Word
页数:7
分类:企业经营
上传时间:2018-09-28
浏览量:512